Размер шрифта
Цвета сайта
Изображения

Обычная версия сайта

Днк mycoplasma hominis что это


Mycoplasma hominis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя урогенитального микоплазмоза (Mycoplasma hominis), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микоплазм в образце биоматериала.

Синонимы русские

Возбудитель микоплазмоза, микоплазма.

Синонимы английские

M. hominis, DNA.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Секрет простаты, первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Общая информация об исследовании

Mycoplasma hominis (микоплазма хоминис) является представителем микоплазм – микроорганизмов, способных паразитировать на мембране сперматозоидов и эпителия слизистой оболочки мочеполовых органов. Основной путь передачи микоплазмы – половой. Возможно заражение через общее пользование бытовыми предметами, а также вертикальный путь передачи – от больной матери к ребенку во время беременности или родов. Источник инфекции – больной микоплазмозом или бессимптомный носитель Mycoplasma hominis.

Микоплазма хоминис считается условно-патогенным микроорганизмом, опасным для человека только в определенных условиях при бурном размножении. Нередко микоплазма выявляется при бактериальном вагинозе (гарднереллезе). Инкубационный период составляет 3-5 недель. Симптомы микоплазменной инфекции неспецифичны и зачастую отсутствуют. При снижении иммунитета Mycoplasma hominis у женщин и мужчин может быть причиной воспалительных заболеваний органов малого таза (негонококкового уретрита, хронического простатита, орхоэпидидимита, эндометрита, аднексита, цистита). Для беременных женщин микоплазма хоминис опасен преждевременным прерыванием беременности, послеродовым или послеабортным эндометритом, а также внутриутробным инфицированием плода, менингитом и сепсисом новорождённых.

Кроме того, при снижении иммунитета Mycoplasma hominis может приводить к заболеваниям дыхательных путей.

Микоплазмозу часто сопутствуют заболевания, вызванные условно-патогенной флорой, коинфицирование гонококками, трихомонадами, уреаплазмами, а также ВИЧ.

Единственный способ диагностики Mycoplasma hominis – метод полимеразной цепной реакции, который позволяет выявить ДНК конкретного вида микоплазмы в исследуемом биоматериале. Его принцип основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы установить причину воспалительных заболеваний органов мочеполовой или дыхательной системы.
  • Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих со сходными симптомами, например хламидиоза, гонореи, уреаплазменной инфекции (наряду с другими исследованиями).
  • Чтобы оценить эффективность антибактериальной терапии.
  • Для профилактического скринингового обследования.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на микоплазменную инфекцию, в том числе при частой смене половых партнеров.
  • При вялотекущих воспалительных заболеваниях мочеполовой системы (особенно при отсутствии гонококков, хламидий, трихомонад и Mycoplasma genitalium).
  • При заболеваниях дыхательных путей с невыясненными причинами.
  • При планировании беременности (обоим супругам).
  • При бесплодии или невынашивании беременности.
  • Через 1 месяц после антибактериальной терапии.
  • При ВИЧ.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат

  • Выявление ДНК M. hominis при симптомах воспаления и отсутствии патогенных возбудителей (гонококков, хламидий, трихомонад, M. genitalium) свидетельствует о наличии микоплазменной инфекции.
  • Если ДНК микоплазма хоминис выявляется в небольшом количестве у людей без признаков патологии органов мочеполовой системы, это расценивается как носительство (микоплазмопозитивность).

Отрицательный результат

  • Наличие инфекции, вызванной Mycoplasma hominis, маловероятно.

Что может влиять на результат?

  • Антибактериальная терапия.

Также рекомендуется

  • Mycoplasma genitalium, ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • Ureaplasma species, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]
  • Neisseria gonorrhoeae, ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • Trichomonas vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • Gardnerella vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов женщин (микрофлора), 3 локализации

Кто назначает исследование?

Гинеколог, уролог, венеролог.

Литература

  • Kenny G.E. Genital Mycoplasmas: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, and Ureaplasma Species. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E. , Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
  • Non-chlamydial non-specific genital infection. In: Oxford handbook of genitourinary medicine, HIV, and Aids / R. Pattman [et al.] (Eds) ; 1st edition. – USA : Oxford University Press, 2005. – 580 p.
  • Хамитова И.В. Сравнение выявляемости микоплазменной инфекции культуральным методом с полуколичественной оценкой титра и методом полимеразной цепной реакции / И.В. Хамитова, А.В. Семенов // Terra medica. – 2008. – Т. 19, № 3.
  • Кисина В. Значение генитальных микоплазм в развитии клинических синдромов у женщин / В. Кисина, Е. Ширшова // Врач. – 2006. - № 2. – С. 6–10.

Микоплазма (Mycoplasma hominis)(качественное определение ДНК)

Рейтинг статьи:  4,84 (58)

Описание Подготовка

Микоплазмы — это микроорганизмы, занимающие в медицинской классификации промежуточное положение между бактериями, грибами и вирусами. Микоплазмы имеют маленькие размеры (300 нм),  у них нет собственной клеточной оболочки, и это сближает их с вирусами. Точно так же, как вирусы, микоплазмы не могут существовать иначе, чем паразитируя на клетках хозяина, из которых микоплазмы получают основные питательные вещества. Однако, в отличие от вирусов, микоплазмы способны расти в бесклеточной среде.

Микоплазмы — это самые мелкие микроорганизмы, способные жить и размножаться автономно. Размножаются микоплазмы делением и почкованием. Поэтому иногда их рассматривают как переходную ступень от вирусов к одноклеточным микроорганизмам.
В организме человека встречается большое количество видов микоплазм, однако патогенными для человека, то есть при определенных условиях вызывающими болезнь, считаются всего три вида этих микроорганизмов:

Mycoplasma hominis
Mycoplasma genitalium
Mycoplasma pneumoniae
Все эти виды микоплазм паразитируют, как правило, на клетках эпителия — слизистой оболочки, выстилающей стенки кишечного, дыхательного и мочеполового трактов.

Болезнь может возникнуть либо при ослаблении иммунной системы хозяина, либо при сочетании патогенных типов микоплазмы с другими патогенными микроорганизмами. Mycoplasma hominis – входит в группу урогенитальных микоплазм и чаще выявляется у лиц с активным сексуальным поведением. Инфицирование происходит преимущественно половым путем, но далеко не всегда это приводит к развитию заболевания. Обычно M. hominis определяется в небольшом количестве в отделяемом влагалища у 50-60% практически здоровых женщин. Однако именно это и создает все условия для распространения микоплазм.

Нередко микоплазмы присоединяются к различным возбудителям ИППП (хламидиям, гонококкам, трихомонадам и др.) и развиваются сочетанные (ассоциированные) инфекции. Самым распространенным заболеванием, при котором почти всегда присутствуют M. hominis, является бактериальный вагиноз (БВ). При определенных условиях возможно внутриутробное инфицирование плода и заражение новорожденных при прохождении через инфицированные родовые пути матери.

Являясь условно-патогенным микроорганизмом, Mycoplasma hominis при иммунодефицитных состояниях может вызывать ВЗОМТ - воспалительные заболевания органов малого таза (вагиниты, сальпингиты, оофориты, эндометриты и др.). Именно распространение микоплазменной инфекции в верхние отделы урогенитального тракта с развитием ВЗОМТ часто приводит к нарушениям репродуктивной функции – невынашиванию беременности, бесплодию. Микоплазма  может являться причиной негонококкового уретрита и простатита, бесплодия у женщин и мужчин.

Показания:

  • Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
  • Стертая картина воспаления мочеполовой системы.
  • Беременность.
  • Внематочная беременность.
  • Бесплодие.
  • Ослабление иммунитета.
  • Контроль эффективности антибиотикотерапии (не ранее чем через месяц после приема антибактериальных препаратов).
  • Профилактические скрининговые исследования (для исключения вероятности бессимптомного и латентного течения инфекции).

В зависимости от вида биоматериала Правила подготовки см. здесь

Используя сайт gemohelp.ru, вы соглашаетесь с использованием файлов cookie

Подтверждаю

Подробнее

Идентификация гена Mycoplasma hominis, связанного с преждевременными родами и микробной нагрузкой при интраамниотической инфекции

1. Thorsen P, Jensen IP, Jeune B, et al. Несколько микроорганизмов, связанных с бактериальным вагинозом, могут составлять патологическое ядро: популяционное микробиологическое исследование среди 3596 беременных женщин. Am J Obstet Gynecol. 1998; 178: 580–587. [PubMed] [Google Scholar]

2. Pereyre S, Sirand-Pugnet P, Beven L, et al. Жизнь на аргинине для Mycoplasma hominis : подсказки из его минимального генома и сравнение с другими урогенитальными микоплазмами человека. Генетика PLoS. 2009;5:e1000677. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

3. Харсаны А.Б., Хусен А.А., Мудли Дж. Бактериальный вагиноз и инфекции нижних отделов половых путей у женщин, посещающих амбулаторные клиники третичного учреждения, обслуживающего развивающееся сообщество. J Obstet Gynaecol. 1997; 17: 171–175. [PubMed] [Google Scholar]

4. Aaltone R, Jalava J, Laurikainen E, Karkkainen U, Alanen A. Cervical Колонизация Ureaplasma urealyticum : сравнение ПЦР и посева для ее обнаружения и ассоциации с преждевременными родами. Scand J Infect Dis. 2002; 34:35–40. [PubMed] [Google Scholar]

5. Breugelmans M, Vancutsem E, Naessens A, Laubach M, Foulon W. Связь аномальной вагинальной флоры и видов уреаплазмы как факторов риска преждевременных родов: когортное исследование. Acta Obstet Gynecol Scand. 2010; 89: 256–260. [PubMed] [Google Scholar]

6. Goldenberg RL, Andrews WW, Goepfert AR, et al. Исследование преждевременных родов в Алабаме: пуповинная кровь 9Культуры 0005 Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis у глубоконедоношенных новорожденных. Am J Obstet Gynecol. 2008;198:43. е1–5. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

7. Kataoka S, Yamada T, Chou K, et al. Связь между преждевременными родами и колонизацией влагалища микоплазмами на ранних сроках беременности. Дж. Клин Микробиол. 2006; 44:51–55. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

8. Ларсен Б., Хван Дж. Микоплазма, уреаплазма и неблагоприятные исходы беременности: свежий взгляд. Infect Dis Obstet Gynecol. 2010;2010 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

9. Квак Д.В., Хван Х.С., Квон Дж.И., Пак Ю.В., Ким Ю.Х. Коинфекция вагинальными Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis увеличивает неблагоприятные исходы беременности у пациенток с преждевременными родами или преждевременным преждевременным разрывом плодных оболочек. J Matern Fetal Neonatal Med. 2014; 27:333–337. [PubMed] [Google Scholar]

10. Oh KJ, Lee KA, Sohn YK, et al. Интраамниотическое заражение генитальными микоплазмами вызывает более выраженную воспалительную реакцию, чем внутриамниотическое заражение другими микроорганизмами у больных с преждевременным преждевременным излитием плодных оболочек. Am J Obstet Gynecol. 2010;203:211. е1–8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

11. Вен А., Шринивасан У., Голдберг Д. и соавт. Отдельные вагинальные бактерии и риск преждевременных родов: экологическая перспектива. J заразить Dis. 2014; 209:1087–1094. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

12. Бхат Г., Пельтье М.Р., Сайед Т.А., Дробек К.О., Сааде Г., Менон Р. Разнообразие сети биомаркеров фетальной мембраны и функции заболеваний, вызванные внутриамниотическими патогенами. Am J Reprod Immunol. 2013;69:124–133. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

13. Marconi C, de Andrade Ramos BR, Peracoli JC, Donders GG, da Silva MG. Интерлейкин-1 бета и интерлейкин-6, но не интерлейкин-8 в амниотической жидкости коррелируют с микробной инвазией амниотической полости при преждевременных родах. Am J Reprod Immunol. 2011;65:549–556. [PubMed] [Google Scholar]

14. Taylor-Robinson D, Lamont RF. Микоплазмы при беременности. БЖОГ. 2011; 118:164–174. [PubMed] [Google Scholar]

15. Massaro G, Scaravilli G, Simeone S, et al. Интерлейкин-6 и Mycoplasma hominis как маркеры преждевременных родов и связанных с ними повреждений головного мозга: наш опыт. J Matern Fetal Neonatal Med. 2009; 22:1063–1067. [PubMed] [Google Scholar]

16. Hillier SL, Nugent RP, Eschenbach DA, et al. Связь между бактериальным вагинозом и преждевременными родами ребенка с низкой массой тела при рождении. Группа по изучению вагинальных инфекций и недоношенности. N Engl J Med. 1995;333:1737–1742. [PubMed] [Google Scholar]

17. Doyle RM, Alber DG, Jones HE, et al. Срочные и преждевременные роды связаны с различными структурами микробного сообщества в плацентарных оболочках, которые не зависят от способа родоразрешения. Плацента. 2014;35:1099–1101. [PubMed] [Google Scholar]

18. Фихорова Р.Н., Битти Н., Сасси Р.Р., Ямамото Х.С., Оллред Э.Н., Левитон А. Системное воспаление у новорожденных на экстремально низком сроке беременности после инфекций мочеполовой системы у матери. Am J Reprod Immunol. 2014 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

19. Гольденберг Р.Л., Хаут Дж.К., Эндрюс В.В. Внутриутробная инфекция и преждевременные роды. N Engl J Med. 2000;342:1500–1507. [PubMed] [Google Scholar]

20. Гольденберг Р.Л., Калхейн Дж.Ф., Ямс Дж.Д., Ромеро Р. Эпидемиология и причины преждевременных родов. Ланцет. 2008; 371: 75–84. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

21. DiGiulio DB, Romero R, Kusanovic JP, et al. Распространенность и разнообразие микробов в амниотической жидкости, воспалительная реакция плода и исход беременности у женщин с преждевременным разрывом плодных оболочек перед родами. Am J Reprod Immunol. 2010;64:38–57. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

22. Бобитт Дж. Р., Леджер В. Дж. Анализ амниотической жидкости. Его роль в материнской неонатальной инфекции. Акушерство Гинекол. 1978; 51: 56–62. [PubMed] [Google Scholar]

23. Миллер Дж.М., младший, Пупкин М.Дж., Хилл Г.Б. Бактериальная колонизация амниотической жидкости интактных плодных оболочек. Am J Obstet Gynecol. 1980; 136: 796–804. [PubMed] [Google Scholar]

24. Уоллес Р.Л., Херрик К.Н. Амниоцентез в оценке преждевременных родов. Акушерство Гинекол. 1981; 57: 483–486. [PubMed] [Академия Google]

25. Бобитт Дж. Р., Хейслип К. С., Дамато Дж. Д. Инфекция околоплодных вод по данным трансабдоминального амниоцентеза у пациенток с интактными плодными оболочками при преждевременных родах. Am J Obstet Gynecol. 1981; 140: 947–952. [PubMed] [Google Scholar]

26. Wahbeh CJ, Hill GB, Eden RD, Gall SA. Внутриамниотическая бактериальная колонизация при преждевременных родах. Am J Obstet Gynecol. 1984; 148: 739–743. [PubMed] [Google Scholar]

27. Romero R, Sirtori M, Oyarzun E, et al. Инфекция и роды. V. Распространенность, микробиология и клиническое значение интраамниотической инфекции у женщин с преждевременными родами и интактными плодными оболочками. Am J Obstet Gynecol. 1989;161:817–824. [PubMed] [Google Scholar]

28. Hameed C, Tejani N, Verma UL, Archbald F. Тихий хориоамнионит как причина преждевременных родов, рефрактерная к токолитической терапии. Am J Obstet Gynecol. 1984; 149: 726–730. [PubMed] [Google Scholar]

29. Gravett MG, Hummel D, Eschenbach DA, Holmes KK. Преждевременные роды, связанные с субклинической инфекцией амниотической жидкости и бактериальным вагинозом. Акушерство Гинекол. 1986; 67: 229–237. [PubMed] [Google Scholar]

30. Сколл М.А., Моретти М.Л., Сибай Б.М. Частота положительных культур амниотической жидкости у пациенток с преждевременными родами с интактными плодными оболочками. Am J Obstet Gynecol. 1989;161:813–816. [PubMed] [Google Scholar]

31. Watts DH, Krohn MA, Hillier SL, Eschenbach DA. Связь скрытой инфекции амниотической жидкости с гестационным возрастом и неонатальным исходом у женщин с преждевременными родами. Акушерство Гинекол. 1992; 79: 351–357. [PubMed] [Google Scholar]

32. Coultrip LL, Grossman JH. Оценка экспресс-тестов при выявлении микробной инвазии амниотической полости. Am J Obstet Gynecol. 1992; 167:1231–1242. [PubMed] [Академия Google]

33. Ромеро Р., Дей С.К., Фишер С.Дж. Преждевременные роды: один синдром, много причин. Science (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк), 2014; 345:760–765. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

34. Combs CA, Gravett M, Garite TJ, et al. Инфекция, воспаление и колонизация амниотической жидкости при преждевременных родах с интактными плодными оболочками. Am J Obstet Gynecol. 2014;210:125. e1–125 e15. [PubMed] [Google Scholar]

35. Hofer N, Kothari R, Morris N, Muller W, Resch B. Синдром воспалительной реакции плода является фактором риска заболеваемости у недоношенных новорожденных. Am J Obstet Gynecol. 2013;209:542. e1–542 e11. [PubMed] [Google Scholar]

36. Romero R, Chaiworapongsa T, Kuivaniemi H, Tromp G. Бактериальный вагиноз, воспалительная реакция и риск преждевременных родов: роль генетической эпидемиологии в профилактике преждевременных родов. Am J Obstet Gynecol. 2004; 190:1509–1519. [PubMed] [Google Scholar]

37. Kemp MW, Miura Y, Payne MS, et al. Повторное внутримышечное или внутриамниотическое введение эритромицина матери не полностью устраняет внутриутробную инфекцию Ureaplasma parvum в модели беременности овец. Am J Obstet Gynecol. 2014; 211:134. е1–9. [PubMed] [Google Scholar]

38. Grigsby PL, Novy MJ, Sadowsky DW, et al. Терапия азитромицином у матери при внутриамниотической инфекции Ureaplasma задерживает преждевременные роды и уменьшает повреждение легких плода в модели на приматах. Am J Obstet Gynecol. 2012;207:475. e1–475 e14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

39. Lamont RF, Nhan-Chang CL, Sobel JD, Workowski K, Conde-Agudelo A, Romero R. Лечение аномальной вагинальной флоры на ранних сроках беременности с помощью клиндамицина для профилактика спонтанных преждевременных родов: систематический обзор и метаанализ. Am J Obstet Gynecol. 2011; 205: 177–19.0. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

40. Mercer BM, Crouse DT, Goldenberg RL, et al. Лечение антибиотиками исследования PPROM: системные материнские и фетальные маркеры и перинатальные исходы. Am J Obstet Gynecol. 2012;206:145. е1–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

41. Basraon SK, Menon R, Makhlouf M, et al. Могут ли статины уменьшить воспалительную реакцию, связанную с преждевременными родами, на животных моделях? Am J Obstet Gynecol. 2012;207:224. е1–7. [PubMed] [Академия Google]

42. Ромеро Р., Гарите Т.Дж. Двадцать процентов глубоко недоношенных новорожденных (23–32 недели беременности) рождаются с бактериемией, вызванной генитальными микоплазмами. Am J Obstet Gynecol. 2008; 198:1–3. [PubMed] [Google Scholar]

43. Donders GG, Van Calsteren K, Bellen G, et al. Прогностическая ценность преждевременных родов при аномальной вагинальной флоре, бактериальном вагинозе и аэробном вагините в первом триместре беременности. БЖОГ. 2009; 116:1315–1324. [PubMed] [Google Scholar]

44. Принц А. Л., Энтони К.М., Чу Д.М., Аагард К.М. Микробиом, роды и сроки родов: больше вопросов, чем ответов. J Reprod Immunol. 2014 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

45. Боггесс К.А., Мосс К., Мадианос П., Мурта А.П., Бек Дж., Оффенбахер С. Иммунный ответ плода на оральные патогены и риск преждевременных родов. Am J Obstet Gynecol. 2005; 193:1121–1126. [PubMed] [Google Scholar]

46. Боггесс К.А. Лечение локализованных заболеваний пародонта во время беременности не снижает частоту преждевременных родов: результаты исследования пародонтальных инфекций и недоношенности (PIPS) Am J Obstet Gynecol. 2010; 202:101–102. [PubMed] [Google Scholar]

47. Macones GA, Parry S, Nelson DB, et al. Лечение локализованных заболеваний пародонта во время беременности не снижает частоту преждевременных родов: результаты исследования пародонтальных инфекций и недоношенности (PIPS) Am J Obstet Gynecol. 2010;202:147. е1–8. [PubMed] [Академия Google]

48. Polyzos NP, Polyzos IP, Mauri D, et al. Влияние лечения заболеваний пародонта во время беременности на частоту преждевременных родов: метаанализ рандомизированных исследований. Am J Obstet Gynecol. 2009; 200: 225–232. [PubMed] [Google Scholar]

49. Jeffcoat M, Parry S, Gerlach RW, Doyle MJ. Использование не содержащего спирта противомикробного ополаскивателя для полости рта связано со снижением частоты преждевременных родов в группе высокого риска. Am J Obstet Gynecol. 2011;205:382. е1–6. [PubMed] [Академия Google]

50. Xiong X, Buekens P, Goldenberg RL, Offenbacher S, Qian X. Оптимальные сроки лечения заболеваний пародонта для предотвращения неблагоприятных исходов беременности: до или во время беременности? Am J Obstet Gynecol. 2011;205:111. е1–6. [PubMed] [Google Scholar]

51. Choi SJ, Park SD, Jang IH, Uh Y, Lee A. Распространенность вагинальных микроорганизмов у беременных с преждевременными родами и преждевременными родами. Энн Лаб Мед. 2012;32:194–200. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

52. Capoccia R, Greub G, Baud D. Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis и неблагоприятные исходы беременности. Curr Opin Infect Dis. 2013; 26: 231–240. [PubMed] [Академия Google]

53. Фоксман Б., Вен А., Шринивасан У. и соавт. Микоплазма , бактерии, ассоциированные с бактериальным вагинозом BVAB3, раса и риск преждевременных родов в группе высокого риска. Am J Obstet Gynecol. 2014;210:226. е1–7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

54. Perni SC, Vardhana S, Korneeva I, et al. Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum в амниотической жидкости в середине триместра: связь с уровнем цитокинов в амниотической жидкости и исходом беременности. Am J Obstet Gynecol. 2004;191: 1382–1386. [PubMed] [Google Scholar]

55. Nguyen DP, Gerber S, Hohlfeld P, Sandrine G, Witkin SS. Mycoplasma hominis в амниотической жидкости в середине триместра беременности: связь с исходом беременности. J Перинат Мед. 2004; 32: 323–326. [PubMed] [Google Scholar]

56. Кэрролл С.Г., Папайоанноу С., Нтумаза И.Л., Филпотт-Ховард Дж., Николаидес К.Х. Мазки из нижних отделов половых путей в прогнозе внутриутробной инфекции при преждевременном излитии плодных оболочек. Br J Obstet Gynaecol. 1996;103:54–59. [PubMed] [Google Scholar]

57. Vouga M, Greub G, Prod'hom G, et al. Лечение генитальной микоплазмы у колонизированных беременных на поздних сроках беременности связано с меньшей частотой преждевременных родов и неонатальных осложнений. Клин Микробиол Инфект. 2014;20:1074–1079. [PubMed] [Google Scholar]

58. Reuter S, Connor TR, Barquist L, et al. Параллельная независимая эволюция патогенности внутри рода Yersinia . Proc Natl Acad Sci U S A. 2014;111:6768–6773. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

59. Агарвал Дж., Сривастава С., Сингх М. Патогеномика уропатогенных Escherichia coli . Индийская J Med Microbiol. 2012;30:141–149. [PubMed] [Google Scholar]

60. Whidbey C, Harrell MI, Burnside K, et al. Гемолитический пигмент группы B Streptococcus позволяет бактериям проникать через плаценту человека. J Эксперт Мед. 2013; 210:1265–1281. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

61. Hitti J, Krohn MA, Patton DL, et al. Фактор некроза опухоли амниотической жидкости-альфа и риск респираторного дистресс-синдрома у недоношенных детей. Am J Obstet Gynecol. 1997;177:50–56. [PubMed] [Google Scholar]

62. Henrich B, Feldmann RC, Hadding U. Цитоадгезины Mycoplasma hominis . Заразить иммун. 1993; 61: 2945–2951. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

63. Harwich MD, Jr, Serrano MG, Fettweis JM, et al. Анализ геномной последовательности и характеристика Sneathia amnii sp. ноябрь Геномика BMC. 2012;13(Приложение 8):S4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

64. Rissman AI, Mau B, Biehl BS, Darling AE, Glasner JD, Perna NT. Переупорядочивание контигов черновых геномов с помощью выравнивателя Mauve. Биоинформатика. 2009 г.;25:2071–2073. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

65. Overbeek R, Olson R, Push GD, et al. SEED и быстрая аннотация микробных геномов с использованием технологии подсистем (RAST) Nucleic Acids Res. 2014;42:D206–D214. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

66. Chen F, Mackey AJ, Stoeckert CJ, Jr, Roos DS. OrthoMCL-DB: запрос обширной многовидовой коллекции групп ортологов. Нуклеиновые Кислоты Res. 2006; 34:D363–D368. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

67. Алихан Н.Ф., Петти Н.К., Бен Закур Н.Л., Битсон С.А. BLAST Ring Image Generator (BRIG): простое сравнение геномов прокариот. Геномика BMC. 2011;12:402. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

68. Fettweis J, Alves J, Borzelleca J, et al. Вагинальный микробиом: болезни, генетика и окружающая среда. [Проверено 26.02.15]; Nature Preceedings. 2011 Доступно по адресу: http://dx.doi.org/10.1038/npre.2011.5150.2. [Google Scholar]

69. Fettweis JM, Serrano MG, Sheth NU, et al. Классификация вагинального микробиома на уровне видов. Геномика BMC. 2012;13(Приложение 8):S17. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

70. Ван К., Гэррити Г.М., Тидже Д.М., Коул М.Р. Наивный байесовский классификатор для быстрого отнесения последовательностей рРНК к новой таксономии бактерий. Appl Environ Microbiol. 2007; 73: 5261–5267. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

71. Segata N, Izard J, Waldron L, et al. Открытие и объяснение метагеномных биомаркеров. Геном биол. 2011;12:R60. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

72. Roske K, Calcutt MJ, Wise KS. Профаг phiMFV1 Mycoplasma fermentans : организация генома, подвижность и вариабельная экспрессия кодируемого поверхностного белка. Мол микробиол. 2004; 52:1703–1720. [PubMed] [Академия Google]

73. Ладефогед С.А., Дженсен Л.Т., Брок Б., Биркелунд С., Кристиансен Г. Анализ 0,5-килопарных повторов в генной системе Mycoplasma hominis lmp и идентификация генных продуктов. J Бактериол. 1996; 178: 2775–2784. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

74. Boesen T, Emmersen J, Baczynska A, Birkelund S, Christiansen G. Локус vaa Mycoplasma hominis содержит расходящийся генетический островок, кодирующий предполагаемую мембрану белок. БМС микробиол. 2004; 4:37. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

75. Чжан К., Мудрый К.С. Молекулярная основа размера и антигенной изменчивости адгезина Mycoplasma hominis , кодируемого дивергентными генами vaa. Заразить иммун. 1996; 64: 2737–2744. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

76. Mygind T, Birkelund S, Christiansen G. Характеристика изменчивости мембранного белка 75 кДа в Mycoplasma hominis . FEMS Microbiol Lett. 2000; 190:167–176. [PubMed] [Google Scholar]

77. Ниволд С., Биркелунд С., Кристиансен Г. Mycoplasma hominis Мембранный белок P120 содержит гипервариабельный домен из 216 аминокислот, который распознается гуморальным иммунным ответом человека. Микробиология. 1997; 143 (часть 2): 675–688. [PubMed] [Google Scholar]

78. Yu NY, Wagner JR, Laird MR, et al. PSORTb 3.0: улучшенное предсказание субклеточной локализации белка с уточненными подкатегориями локализации и возможностями предсказания для всех прокариот. Биоинформатика. 2010; 26:1608–1615. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

79. Келли Л.А., Штернберг М.Дж. Предсказание структуры белка в Интернете: тематическое исследование с использованием сервера Phyre. Нат Проток. 2009; 4: 363–371. [PubMed] [Google Scholar]

80. Кацеровский М., Плишкова Л., Болеховская Р. и соавт. Микробная нагрузка генитальными микоплазмами коррелирует со степенью гистологического хориоамнионита у недоношенных PROM. Am J Obstet Gynecol. 2011;205:213. е1–7. [PubMed] [Google Scholar]

81. Кацеровский М., Плишкова Л., Менон Р. и соавт. Микробная нагрузка пуповинной крови Ureaplasma видов и Mycoplasma hominis при преждевременном дородовом разрыве плодных оболочек. J Matern Fetal Neonatal Med. 2014 [PubMed] [Google Scholar]

82. Randis TM, Gelber SE, Hooven TA, et al. Группа B Streptococcus бета-гемолизин/цитолизин нарушает барьер между матерью и плодом, вызывая преждевременные роды и внутриутробную гибель плода in vivo. J заразить Dis. 2014; 210:265–273. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

83. Разин С., Йогев Д., Наот Ю. Молекулярная биология и патогенность микоплазм. Микробиол Мол Биол Ред. 1998;62:1094–1156. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

84. Jansson E, Backman A, Hakkarainen K, von Bonsdorff CH, Seniusova B, Miettinen A. Выделение и предварительная характеристика микоплазмавируса 20-P. мед. биол. 1982; 60: 116–120. [PubMed] [Google Scholar]

85. Robertson J, Gomersall M, Gill P. Вирусоподобные частицы в Mycoplasma hominis. Может J Microbiol. 1972; 18:1971–1972. [PubMed] [Google Scholar]

Новая диагностическая ПЦР в реальном времени для специфического обнаружения ДНК Mycoplasma hominis

  • Список журналов
  • Международный J Microbiol
  • v. 2010; 2010
  • PMC2913506

Международный журнал микробиологии. 2010 г.; 2010: 317512.

Опубликовано в сети 25 июля 2010 г. doi: 10.1155/2010/317512

, 1 , 2 , 3 , 1, 2 , и 1, 2 , *

Информация об авторе Примечания к статье Информация об авторских правах и лицензии Отказ от ответственности

Mycoplasma hominis — прихотливый микроорганизм, вызывающий генитальные и экстрагенитальные инфекции. Мы разработали специальную ПЦР в реальном времени, которая демонстрирует высокую чувствительность и низкую внутрисерийную и межсерийную изменчивость. Применительно к клиническим образцам эта количественная ПЦР позволила подтвердить роль M. hominis у трех пациентов с тяжелыми экстрагенитальными инфекциями.

Mycoplasma hominis — прихотливые бактерии, которые не обнаруживаются на рутинно используемых аксеновых средах [1]. Отсутствие клеточной стенки делает эти микроорганизмы естественно устойчивыми к β -лактамным антибиотикам и не обнаруживаемыми при окрашивании по Граму. M. hominis является признанным возбудителем генитальных инфекций у взрослых, а также неонатальных инфекций [2, 3]. Кроме того, сообщалось, что он является этиологическим агентом различных серьезных экстрагенитальных инфекций, таких как абсцесс головного мозга, пневмония, медиастинит, перикардит, эндокардит, остеит, артрит, раневые инфекции, перитонит и пиелонефрит, как у иммуносупрессивных, так и у иммунокомпетентных лиц [4]. –11]. Поскольку наиболее часто используемые в клинической практике антибиотики не активны в отношении M. hominis, Диагностика инфекций, вызванных этой привередливой бактерией, является важнейшей проблемой, особенно в случае экстрагенитальных случаев.

В связи с этим мы разработали ПЦР в реальном времени для обнаружения M. hominis. Затем этот новый ПЦР был применен к клиническим образцам, полученным от пациентов, страдающих экстрагенитальными инфекциями M. hominis .

Прямой праймер MhF (5-TTTGGTCAAGTCCTGCAACGA-3', положение 2472–2493 последовательности GenBank {"type":"entrez-нуклеотид","attrs":{"text":"AF443616","term_id":" 110815963"}}AF443616), обратный праймер MhR (5'-CCCCACCTTCCTCCCAGTTA-3', положение 2553–2572 {"type":"entrez-нуклеотид","attrs":{"text":"AF443616"," term_id":"110815963"}}AF443616), который амплифицирует 101 bp часть гена, кодирующего рРНК 16S, и связывающий зонд малой бороздки, помеченный 5' VIC (TACTAACATTAAGTTGAGGACTCTA, положение 2513–2537 {"type": "entrez-нуклеотид","attrs":{"text":"AF443616","term_id":"110815963"}}AF443616) отбирали с использованием программного обеспечения Primer Express (Applied Biosystems, Дармштадт, Германия). Реакции проводили в последнем томе 20  мк мкл, в том числе по 0,2  мк М каждого праймера, 0,2. мк М зонда, 10  мкл мкл 2× TaqMan Universal Master Mix (Applied Biosystems) и 5  мкл мкл образца ДНК. Условия циклирования: 2 мин при 50°C и 10 мин при 95°C, затем 45 циклов по 15 с при 95°C и 1 мин при 60°C. Для амплификации и обнаружения продуктов ПЦР использовали прибор ABI Prism 7900 (Applied Biosystems). Специфичность ПЦР в реальном времени была высокой благодаря использованию зонда TaqMan. Не наблюдалось перекрестной амплификации при 5 нг геномной ДНК человека, гриба ( Candida Albicans ATCC 10231), и 15 различных бактериальных штаммов были протестированы ( микоплазма пневмония, уреаплазма, уреаплаз, мочевина, gardnerella vaginalis, lactobacillus Sp. , Chlamydia Trachomatis, Chlamydophilus , , Chlamydia Trachomatis, Chlamydophilus , , Chlamydia Trachomatis, Chlamydophilus , , , , , , , , , , , , , . influenzae, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pyogenes, и Streptococcus agalactiae) . Плазмида, содержащая целевой ген, была сконструирована для выполнения этапа количественного определения, как описано ранее [12].

Дубликаты 10-кратных серийных разведений плазмиды запускали в десяти независимых экспериментах для анализа чувствительности и воспроизводимости результатов ПЦР. Как показано на графике, воспроизводимость внутри цикла была превосходной. Как и ожидалось, внутрисерийная изменчивость была немного выше при очень низкой концентрации ДНК-мишени (1). Межсерийная изменчивость была низкой, за исключением низкой концентрации 10 копий плазмиды на 5  мк л (). Таким образом, средние значения Ct +/-1 стандартное отклонение составили 290,64 +/- 0,38 (1,28%), 32,69 +/- 0,36 (1,10%) и 36,43 +/- 0,49 (1,34%) для 1000, 100 и 10 копий ДНК на 5  мк л. Аналитическая чувствительность ПЦР в реальном времени составляла 10 копий плазмидной контрольной ДНК на реакционную смесь, что аналогично ПЦР со световым циклером, о которой уже сообщалось Baczynska et al. [14]. Эта чувствительность примерно в 10 раз выше, чем у широкодиапазонной ПЦР 16SrРНК, разработанной Bosshard et al. [15]. При тестировании геномной ДНК, полученной путем выращивания M. hominis в культуре, мы снова получили превосходную чувствительность, которая составила около 1000 бактерий/мл. При серийном разбавлении клинического образца (паховый абсцесс пациента 1) ПЦР на эубактерии был слегка положительным, когда специфичные 9ПЦР на 0005 Mycoplasma была положительной с Ct 33,4 (45 копий в 5  мкл мкл ДНК), тогда как ПЦР на эубактерии была отрицательной, когда ПЦР в режиме реального времени на Mycoplasma была положительной с Ct 36,3 (6,5 копий в 5 мк мкл ДНК).

Открыто в отдельном окне

Внутри- и межсерийная воспроизводимость ПЦР в реальном времени, оцененная на дубликате плазмидных положительных контролей, выполненных в 10-кратных разведениях от 1000 до 10 копий плазмиды/5  мк L в течение 10 последовательных запусков. ( а ) Графики порога цикла (Ct) для первого и второго дубликатов, показывающие внутрисерийную изменчивость ПЦР в реальном времени между дубликатами положительных плазмидных контролей; 95% доверительный интервал показан пунктирными линиями. (b) График Бленда-Альтмана, показывающий отношение Ct обоих дубликатов в соответствии со средним значением Ct дубликатов. ( c ) Графики среднего значения дубликатов плазмидных положительных контролей в соответствии с каждым последующим прогоном, демонстрирующие низкую изменчивость между прогонами ПЦР в реальном времени. Стандартные отклонения показывают внутрисерийную воспроизводимость ПЦР.

Поскольку появляется все больше данных, подтверждающих роль M. hominis как нового агента экстрагенитальных инфекций, ПЦР в реальном времени был протестирован на 34 клинических образцах, взятых у 15 пациентов, страдающих различными экстрагенитальными инфекциями. Эти образцы включали физиологически стерильные участки, такие как плевральная жидкость, перкардиальная жидкость, спинномозговая жидкость и сердечный клапан ( n = 19), а также образцы, потенциально контаминированные ротоглоточной флорой ( n = 15), то есть в основном образцы из дыхательных путей. ( н = 8). ДНК экстрагировали из 200  мкл мкл образцов с использованием автоматизированной системы MagNAPureLC (Roche) и набора для выделения ДНК MagnaPureLC 1 (Roche). ДНК элюировали в конечном объеме 100  мкл л элюирующего буфера, входящего в комплект. Отрицательный контроль экстракции (вода, не содержащая ДНК, экстрагированная параллельно образцу) тестировался для каждого цикла экстракции. Каждый образец амплифицировали в двух повторностях. Ингибирующий контроль (образец с добавлением 1  мкл мкл, содержащий 200 копий плазмиды) и отрицательный контроль смеси ПЦР систематически тестировали. Все образцы были исследованы из-за клинического подозрения, кроме двух, для которых было обнаружено наличие 9ДНК 0005 M. hominis уже была обнаружена с помощью ПЦР широкого спектра 16SrRNA, проведенной непосредственно на образцах [16]. Оба были подтверждены положительными с помощью новой ПЦР с очень высокой бактериальной нагрузкой (). ДНК M. hominis также была обнаружена в образцах 1 из 13 оставшихся пациентов.

Таблица 1

Характеристики трех пациентов с экстрагенитальными инфекциями Mycoplasma hominis , включая клиническую картину и результаты ПЦР в реальном времени.

Номер пациента Возраст Пол Клиническая инфекция Сопутствующие заболевания Другая этиология Клинический образец M. Hominis QPCR Результаты в копиях/мл Другие положительные диагностические тесты
1 54 Женщина Ингуминальный LYMPHADIITS LYMPENIISE0383 Жидкость абсцесса и 16 175 000 Specific culture c and broad-spectrum PCR
Cervix swab 4,400
Vaginal swab 130
Urine 82

2 15 Женщина Пневмония и перикардит Нет Нет Жидкость абсцесса и 98 500 000 Specific culture c and broad-spectrum PCR
Pleural fluid 380,000
Pericardiac fluid 85
Sputum b 6
Pleural fluid b 0

3 56 Мужской Медиастинит Расслоение аорты типа А Нет Жидкость средостения и 7 000 Кровяной агар d
Мазок из средостения 460
Кровь 5

Открыть в отдельном окне

a Первые образцы, подтверждающие инфекцию;

b Образцы, взятые через несколько дней после начала лечения;

c Питательные среды: Mycoplasma IST, bioMérieux, Франция;

d Традиционная положительная культура на чашке с кровяным агаром с последующим секвенированием для идентификации [13].

У всех 3 положительных пациентов ДНК M. hominis была обнаружена в ≥3 образцах (). Более того, для каждого из этих 3 пациентов по крайней мере один из положительных молекулярных результатов был дополнительно подтвержден культивированием на коммерческих средах (9).0005 Mycoplasma IST, bioMérieux, Франция) или на кровяном агаре (тонкий слой бактерий и секвенирование для идентификации) [13]. Из-за высокого уровня консервативности 16S рРНК наша ПЦР в реальном времени, вероятно, амплифицирует любого члена группы M. hominis , которая включает M. salivarium, M. orale, и M. arginii. Все случаи, представленные в этой статье, были M. hominis sensu stricto, что было подтверждено секвенированием гена, кодирующего 16S рРНК. Клиническая картина этих трех случаев обобщена в .

В заключение, мы разработали новую ПЦР, которая показала высокую чувствительность и позволила нам диагностировать или подтвердить три экстрагенитальных случая инфекции M. hominis , которые могут остаться незамеченными из-за прихотливого роста этой бактерии. Недавно Masalma et al., используя метод клонирования и/или пиросеквенирования, также идентифицировали две экстрагенитальные церебральные инфекции M. hominis [4]. Преимуществом их стратегии является широкий спектр подхода, который не ограничивается Mycoplasma , в то время как преимущества нашей ПЦР в реальном времени заключаются в простоте, скорости и меньшем риске заражения.

Эта новая ПЦР в режиме реального времени представляет собой эффективный инструмент для диагностики инфекций M. hominis , который может способствовать лучшему определению распространенности и патогенности M. hominis . Кроме того, это может помочь улучшить клинические исходы тяжелых экстрагенитальных инфекций у пациентов, не отвечающих на обычно используемые бета-лактамные антибиотики.

Г. Греуб получает поддержку от Фонда Леонардса в виде карьерной премии, озаглавленной «Биржа Леонарда для академической помощи в клинике медицины в Лозанне». Авторы благодарят Ф. Тарра за рецензирование этой статьи. В эту работу в равной степени внесли свой вклад А. Паскуаль и К. Жатон.

1. Уэйтс К.Б., Робинсон Т. Микоплазма и уреаплазма. В: Мюррей PR, редактор. Руководство по клинической микробиологии . Вашингтон, округ Колумбия, США: ASM Press; 2007. стр. 1004–1020. [Google Scholar]

2. Тейлор П. Медицинское значение микоплазм. Методы молекулярной биологии . 1998; 104:7–15. [PubMed] [Google Scholar]

3. Уэйтс К.Б., Кац Б., Шелонка Р.Л. Микоплазмы и уреаплазмы как неонатальные возбудители. Обзоры клинической микробиологии . 2005;18(4):757–789. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

4. Masalma MA, Armougom F, Scheld WM, et al. Расширение микробиологического спектра абсцессов головного мозга с использованием множественного 16S рибосомного секвенирования ДНК. Клинические инфекционные болезни . 2009;48(9):1169–1178. [PubMed] [Google Scholar]

5. Феноллар Ф. , Годучон В., Касальта Дж. П., Лепиди Х., Ванденеш Ф., Рауль Д. Микоплазменный эндокардит: два клинических случая и обзор. Клинические инфекционные болезни . 2004;38(3):e21–e24. [PubMed] [Google Scholar]

6. García C, Ugalde E, Monteagudo I, et al. Выделение Mycoplasma hominis у тяжелобольных с легочными инфекциями: клинико-микробиологический анализ в отделении реанимации. Медицина интенсивной терапии . 2007;33(1):143–147. [PubMed] [Google Scholar]

7. Lyon GM, Alspaugh JA, Meredith FT, et al. Mycoplasma hominis пневмония, осложняющая двустороннюю трансплантацию легких: клинический случай и обзор литературы. Сундук . 1997;112(5):1428–1432. [PubMed] [Google Scholar]

8. Marini H, Merle V, Frébourg N, et al. Mycoplasma hominis Раневая инфекция после аллотрансплантации сосудов. Журнал инфекций . 2008;57(3):272–274. [PubMed] [Google Scholar]

9. Mechai F, Le Moal G, Duchêne S, Burucoa C, Godet C, Freslon M. Mycoplasma hominis остит у иммунокомпетентного мужчины. Европейский журнал клинической микробиологии и инфекционных заболеваний . 2006;25(11):715–717. [PubMed] [Google Scholar]

10. Нортон Р., Моллисон Л. Mycoplasma hominis пневмония у взрослых аборигенов. Патология . 1995;27(1):58–60. [PubMed] [Академия Google]

11. Вонг SS-Y, Юэнь KY. Острый пиелонефрит, вызванный Mycoplasma hominis . Патология . 1995;27(1):61–63. [PubMed] [Google Scholar]

12. Jaton K, Bille J, Greub G. Новая ПЦР в реальном времени для обнаружения Chlamydia trachomatis в первой порции мочи или генитальных мазках. Журнал медицинской микробиологии . 2006;55(12):1667–1674. [PubMed] [Google Scholar]

13. Petti C, Bosshard P, Brandt M, et al. Критерии интерпретации для идентификации бактерий и грибов с помощью секвенирования ДНК-мишени. Утвержденное руководство . 2008;28(12) [Google Scholar]

14.


Learn more

 

2011-2017 © МБУЗ ГКП №  7, г.Челябинск.