Восстановление клеток печени

Во всех этих моделях условная инактивация генов пути Hippo была достигнута с использованием трансгенных мышей CAGGCre-ER (Zhou et al., 2009; Song et al., 2010) или альбумина -Creed Cre . (Benhamouche et al., 2010; Lu et al., 2010; Zhang et al., 2010), который также активен в фетальных гепатобластах, которые дают клетки желчных протоков.Мыши-мутанты демонстрировали различную степень пролиферации гепатоцитов, но также демонстрировали пролиферацию и расширение популяции клеток печени с небольшими ядрами вокруг портальной триады, так называемые «овальные клетки». Долгое время считалось, что эти клетки функционируют как бипотентные клетки-предшественники печени, которые могут дифференцироваться в гепатоциты и клетки желчных протоков при определенных условиях, таких как серьезное повреждение гепатоцитов - гипотеза, которая была оспорена недавними исследованиями (Tanimizu and Mitaka, 2014). Экспансия овальных клеток и развитие как HCC, так и ICC первоначально привели к предположению, что опухоли в моделях, инактивированных путем Hippo, возникают из этих потенциальных бипотентных клеток-предшественников.Однако недавние исследования показывают, что эти фенотипы возникают в результате трансдифференцировки мутантных гепатоцитов и дерегулированного морфогенеза желчевыводящих путей (Yimlamai et al., 2014; Benhamouche-Trouillet et al., 2018). Несколько гепатоцит-специфических моделей трансфекции могут инициировать развитие опухолей со смешанной дифференцировкой: сверхэкспрессия YAP, а также инактивация вышестоящего регулятора Hippo Nf2, опосредованного AAV-Cre, индуцирует дедифференцировку гепатоцитов к фенотипу, подобному предшественнику (Yimlamai et al. ,2014). Кроме того, гидродинамическая инъекция в хвостовую вену экспрессирующих конструкций на основе транспозона для конститутивно активных YAP и PIK3CA - каталитической субъединицы PI3K - приводила к образованию опухолей печени с гепатоцеллюлярной, холангиоцеллюлярной или смешанной дифференцировкой HCC / ICC. В этой модели опухоли характеризовались активацией путей mTORC1 / 2, ERK / MAPK и Notch (Li et al., 2015). На сегодняшний день молекулярная основа для сотрудничества между передачей сигналов PI3K и YAP при раке печени не совсем понятна, но может быть опосредована индуцированной PI3K активацией CD166, белка клеточной поверхности, который, как было показано, положительно регулирует активность YAP (Ma et al. и др.2014). С другой стороны, данные эпителиальных клеток молочной железы и клеток рака толстой кишки указывают на то, что передача сигналов PI3K / PDK1 / AKT способствует активности YAP через LATS-зависимые и -независимые механизмы (Zhao et al., 2018). Однако, если этот механизм сохраняется при раке печени и как он связан с клеточной дифференцировкой, еще предстоит выяснить. Из того, что известно на сегодняшний день, YAP - и, возможно, другие онкогенные пути, такие как передача сигналов PI3K - не только способствуют пролиферации и онкогенезу в целом, но и онкогенной пластичности гепатоцитов с трансдифференцировкой к фенотипу, похожему на предшественник или даже к желчному фенотипу ( Yimlamai et al.2014; Fitamant et al., 2015; Font-Burgada et al., 2015; Патель и др., 2017). Сигнализация Notch - критический путь в развитии желчных протоков - является ключевым кандидатом для запуска этого дифференцирующего переключателя. Следует отметить, что передача сигналов Notch может быть активирована посредством активации генов-мишеней YAP, таких как Notch3 и Jag1 (Jeliazkova et al., 2013; Tschaharganeh et al., 2013; Yimlamai et al., 2014; Wu et al. , 2017; Zhang S. et al., 2018). Однако исследование с использованием печеночно-специфического нокаута киназ LATS1 и LATS2 пути Hippo не подтвердило роль передачи сигналов Notch, но показало, что активная передача сигналов TGFβ ниже YAP индуцирует транс-дифференцировку в клетки желчных протоков (Lee et al., 2016). Кроме того, YAP способствует связыванию регуляторов транскрипции HNF4A и FOXA2 с сайтами эмбриональных энхансеров во время дифференцировки гепатоцитов, чтобы усилить транскрипцию эмбрион-специфических генов - механизм, который может быть угнан в трансформированных клетках для стимулирования дедифференцировки и онкогенеза (Alder et al., 2014) , Взятые вместе, сложный паттерн взаимодействий онкогенного пути определяет пластичность гепатоцитов и дифференцировку опухоли при инактивации пути Бегемота, что мы только начинаем понимать.

Сигналы гиппопотама в клетках желчных протоков - одинаковые, но разные

Помимо стимуляции дифференцировки желчных путей в гепатоцитах, передача сигналов YAP имеет большое значение для клеток желчных протоков. Высокая цитоплазматическая и ядерная экспрессия YAP в холангиоцитах у человека и мышей печени позволяет предположить, что активность YAP имеет отношение к клеткам желчных протоков, но функциональные исследования, анализирующие роль передачи сигналов Hippo в холангиоцитах, ограничены. (Bai et al., 2012; Patel et al., 2017). Тем не менее было сделано несколько интересных наблюдений в на основе Albumin-Cre моделей условного нокаута, которые активируют Cre в предшественниках как гепатоцитов, так и холангиоцитов (Geisler et al. ,, 2008): условный нокаут одного YAP или как YAP, так и его ортопеда TAZ - также известного как WWTR1 - приводит к дефектам морфогенеза желчных протоков с неправильной формой и деформацией внутрипеченочных желчных протоков (Zhang et al., 2010; Lu et al. al., 2018), в то время как нокаут Nf2 приводил к расширению билиарных структур (Benhamouche-Trouillet et al., 2018).

У людей YAP активируется при протоковых реакциях при холестатической болезни печени и при неалкогольном стеатогепатите (Bai et al.2012; Anakk et al., 2013; Machado et al., 2015). При холестатическом повреждении печени после перевязки желчных протоков у мышей эта реактивная пролиферация и расширение клеток желчных протоков заметно снижается при недостаточности YAP в печени, что указывает на то, что активность YAP необходима для формирования протоковых реакций. У взрослых мышей генетическая инактивация YAP с использованием индуцибельной системы Mx-Cre приводит к глубокому повреждению гепатоцитов и уменьшению компенсаторной пролиферации гепатоцитов и клеток желчных протоков, что связано с повышенной смертностью по сравнению с мышами дикого типа (Bai et al.2012). Механистически, накопление желчных кислот при холестатическом заболевании печени, по-видимому, является важным активатором YAP ниже по течению белка белка IQGAP1, который индуцируется желчными кислотами - механизм, который также может играть роль в канцерогенезе (Anakk et al., 2013) , Механистически, существует немало свидетельств того, что IQGAP1 может напрямую связываться с YAP, чтобы изменять его транскрипционную активность (Sayedyahossein et al., 2016). Однако это взаимодействие, по-видимому, является в основном тормозящим, что указывает на то, что другой, пока неизвестный механизм может быть ответственен за IQGAP1-опосредованную активацию YAP в печени.При холангиокарциноме человека активированный YAP ассоциируется с плохим прогнозом, химической стойкостью, ангиогенезом и хромосомной нестабильностью (Marti et al., 2015; Wu et al., 2016; Rizvi et al., 2018), а высокая экспрессия TAZ коррелирует с уменьшением выживаемость после резекции опухоли (Xiao et al., 2016). У мышей экспрессия активированных YAP и AKT в гепатоцитах является достаточной для индукции холангиокарциномы, зависящей от передачи сигналов AKT / mTOR, которая, вероятно, взаимодействует с YAP в онкогенезе и, возможно, способствует активности YAP (Zhang et al., 2017; Чжао и др., 2018). Кроме того, YAP важен для поддержания фенотипа холангиоцитов, так как ингибирование YAP путем сверхэкспрессии либо LATS2, либо доминантно-негативного варианта TEAD2 приводило к снижению экспрессии маркеров холангиоцитов (Zhang S. et al., 2018).

Регенерация печени - на хорошей стороне YAP / TAZ

Долгое время оставалось загадкой, как восстановление размера печени почти точно до ее первоначального объема надежно достигается после резекции печени.Передача сигналов гиппопотама, казалось, была идеальным кандидатом для пути, который управляет контролируемой активацией и прекращением пролиферации гепатоцитов во время регенерации. Действительно, существует активная активация YAP / TAZ ниже по течению примерно через 24 ч после частичной гепатэктомии с последующей активацией ингибирующих киназ Hippo, возможно, для ограничения чрезмерной активации YAP / TAZ и остановки пролиферации, когда печень приближается к своему первоначальному объему (Grijalva et al., 2014; Loforese et al., 2017; Lu et al., 2018). Специфичный для печени нокаут YAP и TAZ приводит к нарушению регенерации печени и задерживает восстановление массы печени (Lu et al., 2018), подтверждая важность передачи сигналов Hippo в регенерации печени. Напротив, YAP и TAZ не являются обязательными для завершения процесса регенерации, поскольку альтернативные пути могут заменить их активность для обеспечения регенерации печени, хотя и с существенной задержкой (Michalopoulos, 2017). В развитии плода опосредованный Alb-Cre условный нокаут YAP в гепатоцитах и ​​холангиоцитах, начиная с эмбрионального дня 13,5, приводил главным образом к дефектному развитию внутрипеченочных желчных протоков - но интересно, что явного фенотипа в гепатоцитах не было до 8 недель после рождения (Zhang et al. и др.2010). Частично это открытие было объяснено спасением функции YAP за счет повышенной активности его ортолога TAZ, сходного с фенотипами, наблюдаемыми у рыбок данио (Yi et al., 2018). Но что поразительно, удаление как YAP, так и TAZ с помощью Albumin-Cre приводит к развитию почти нормальной печени - и, как это ни парадоксально, приводит к увеличению размера печени. Этот неожиданный фенотип может быть объяснен увеличением повреждения гепатоцитов с последующей активацией других путей пролиферации, которые неспособны контролировать печеночную массу так же жестко, как передача сигналов Hippo (Zhang et al.2010; Lu et al., 2018). Эти данные подчеркивают, что активация и взаимодействие пути в эмбриональном развитии и во время регенерации печени характеризуется высокой пластичностью, чтобы приспособиться к функциональному дефициту основных пролиферативных путей, таких как передача сигналов YAP / TAZ. Однако эта функциональная избыточность, по-видимому, не работает так эффективно, как только мыши достигают определенного возраста: пожилые или больные печени часто не могут в достаточной степени регенерировать, поскольку они не способны поддерживать адекватную пролиферативную передачу сигналов.В некоторой степени этот дефект регенерации обусловлен гиперактивной передачей сигналов Hippo - которая не в достаточной мере устранена компенсаторной активацией других пролиферативных путей по причинам, которые до сих пор не совсем понятны. Глушение MST-киназ с помощью инкапсулированной в липосомы миРНК восстанавливало экспрессию генов-мишеней YAP и улучшало регенерацию печени у пожилых животных (Loforese et al., 2017). В другом исследовании новый ингибитор MST2 уменьшал апоптоз и повреждение печени при острой печеночной недостаточности, вызванной аминоацетофеном.Поразительно, что аналогичный эффект, включая стихание фиброза, наблюдался при хроническом повреждении печени после перевязки желчных протоков или повторного введения CCl _{и 4 954 соответственно (Fan et al., 2016). Ориентация вверх по течению гиппинкиназ при острой или хронической печеночной недостаточности у человека для восстановления регенерации является многообещающим подходом с высокой клинической значимостью, но его необходимо сопоставить с риском онкогенной трансформации, особенно при цирротической печени, которая по своей природе имеет высокий риск развития ГЦК.}

Фиброз печени - рубцовое лицо YAP и TAZ

Звездчатые клетки печени являются основным типом клеток, вовлеченных в фиброз печени, но также играют критическую роль в остром восстановлении после повреждения печени или частичной гепатэктомии (Kordes et al., 2014). Хроническое повреждение печени запускает постоянную активацию звездчатых клеток с секрецией и накоплением избыточных белков внеклеточного матрикса (ECM), транс-дифференцировкой спокойных HSCs в миофибробласты, накапливаясь в образовании фиброзной рубцовой ткани.Результат этого нерегулируемого процесса восстановления продиктован молекулярными факторами, которые контролируют активацию HSC, которые поэтому рассматриваются как кандидаты на целевую терапию. Недавно передача сигналов Hippo была идентифицирована как важный путь активации звездчатых клеток. YAP активируется в HSCs во время острой регенерации печени после частичной гепатэктомии или ишемии-реперфузионного повреждения и, соответственно, при хроническом повреждении фиброзной печени человека, а также при индуцированном CCl ₄ фиброзе у мышей (Mannaerts et al.2015; Swiderska-Syn и др., 2016; Konishi et al., 2018). Важно, что устойчивая активация YAP при фиброзе печени связана с увеличением белков ЕСМ и жесткости тканей (Dechene et al., 2010). Влияние жесткости матрикса на передачу сигналов YAP хорошо установлено, и механические сигналы все чаще признаются в качестве медиатора патологической активации YAP in vivo : повышенная жесткость матрикса связана с активацией рецепторов клеточной поверхности, которые регулируют полимеризацию F-актина в RhoA -зависимый способ стимулирования ядерной транслокации и активации YAP / TAZ - вероятно, обеспечивает молекулярную основу для активации YAP в HSC и гепатоцитах при фиброзе и, возможно, усиливает канцерогенез в цирротических печенках (Dupont et al.2011; Жубанчалиев и др., 2016). При остром повреждении печени другие пути, такие как передача сигналов Hedgehog, вероятно, способствуют активации YAP. После частичной гепатэктомии мыши с HSC, дефицитными по функциональной передаче сигналов Hedgehog, обнаруживают нарушенную активацию YAP в звездчатых клетках, а также в гепатоцитах (Swiderska-Syn et al., 2016), что указывает на то, что передача сигналов Hedgehog / YAP обеспечивает важную перекрестную связь между этими клетками типы для обеспечения достаточной регенерации. В то время как активность HSC важна для целостности печени после острого повреждения, устойчивая активация вредна для хронического повреждения печени, что делает YAP потенциальной мишенью для предотвращения активации HSC и прогрессирования фиброза.Важно отметить, что фармакологическое ингибирование YAP / TEAD вертепорфином заметно снижает активацию HSC и затрудняет фиброгенез, который обычно происходит после лечения CCl ₄ у мышей (Mannaerts et al., 2015; Martin et al., 2016).

Другими непаренхиматозными клетками, играющими существенную роль в повреждении печени, являются синусоидальные эндотелиальные клетки печени (LSEC), которые, как было показано, влияют на регенерацию и фиброз через ангиокринную передачу сигналов звездчатым клеткам при остром и хроническом повреждении печени (Ding et al.2014; Пуассон и др., 2017). Эксперименты по совместному культивированию показали, что дифференцированные LSECs поддерживают HSC покоя и что нарушение регуляции перекрестных помех между гепатоцитами, LSECs и HSCs при хроническом повреждении печени способствует фиброзу (Poisson et al., 2017). Интересно, что LSEC также важны для поддержания целостности клеток после активации YAP в отдельных гепатоцитах. Комбинированное повреждение гепатоцитов и LSEC, вызванное этанолом, но не повреждение только гепатоцитов или LSEC, меняет судьбу активированных YAP гепатоцитов от пролиферации до апоптоза (Miyamura et al., 2017). Было показано, что активация YAP в LSEC регулирует экспрессию белков HIF-1α и VEGF-A, способствуя ангиогенезу при фиброзе - процессе, блокирующем транспорт питательных веществ из синусоид и усиливающем повреждение печени (Elpek, 2015; Zhang C. et al., 2018 ). Помимо запуска неоангиогенеза в больной печени, весьма вероятно, что YAP / TAZ также играют важную роль в формировании печеночных кровеносных сосудов во время развития печени, в том числе в прорастании эндотелиальных клеток (EC) и созревании соединения (Park and Kwon, 2018 ).Тем не менее, соответствующая экспрессия YAP / TAZ не может быть обнаружена в печеночных ECs в P5 и P12, что в отличие от эндотелиальных клеток в развивающейся сетчатке и мозге в те же моменты времени - ткани, где YAP и TAZ функционально необходимы для правильного ангиогенеза (Kim et al., 2017a). Хотя это может указывать на то, что передача сигналов YAP / TAZ может не иметь отношения к ангиогенезу печени, более вероятно, что активация YAP и TAZ действительно происходит в более ранние моменты времени во время развития печени, где формирование EC начинается уже в E9.5 (Чжао и Дункан, 2005). Если активация передачи сигналов YAP / TAZ в эндотелиальных клетках играет значительную роль при фиброзе и других заболеваниях печени, тем не менее, это еще предстоит изучить.

В связи с растущей важностью передачи сигналов Hippo в HSC, LSECs и, возможно, эндотелиальных клетках при фиброзе и повреждениях, любые соображения, направленные на терапевтическую направленность этого пути, должны учитывать, что регенерация печени, вероятно, будет нарушена - возможно, усугубит повреждение печени в долгосрочной перспективе.

Стеатогепатит - связь с метаболизмом и воспалением

В любой ткани пролиферация и рост клеток зависят от доступности питательных веществ.В этом контексте вероятна регуляция пролиферативного YAP и TAZ посредством клеточного метаболизма. Действительно, низкие уровни энергии запускают ингибирование YAP и TAZ, в то время как высокие уровни глюкозы и жирных кислот активируют транскрипцию YAP / TAZ вниз по течению. С другой стороны, было показано, что сами YAP / TAZ способствуют ключевым метаболическим процессам, таким как гликолиз, для обеспечения адекватного снабжения энергией пролиферирующих клеток (Koo and Guan, 2018). В печени избыточная доступность питательных веществ может привести к стеатозу и стеатогепатиту (неалкогольная жировая болезнь печени или НАЖБП), при которой накопление жира приводит к воспалению и разрушению гепатоцитов, способствуя развитию цирроза и рака печени.

На мышиных моделях НАЖБП и в образцах стеатогепатита человека может наблюдаться повышение уровня YAP / TAZ - главным образом при регенеративных протоковых реакциях. У мышей вирусная экспрессия активированного TAZ способствует воспалению в печени, НАЖБП и образованию опухолей, связывая TAZ - но не YAP - с признаком воспаления в развитии опухоли (Wang et al., 2016; Hagenbeek et al., 2018). Механистически, TAZ / TEAD напрямую активирует передачу сигналов Hedgehog с повышенной экспрессией про-фибриногенных факторов в HSC, включая остеопонтин, Timp1 и Col1a1 (Machado et al.2015; Wang et al., 2016). Интересно, что скрининг транспозонов у мышей выявил мутации в адаптере белка Hippo Sav1 в опухолях, ассоциированных с НАЖБП, но не тех, которые развивались при вирусном гепатите (Kodama et al., 2018). Один из механизмов, с помощью которого стеатоз может способствовать активации YAP / TAZ, связан с белком JCAD, связанным с ожирением, который ингибирует LATS2 выше по течению (Ye et al., 2017). На сегодняшний день дифференциальная роль YAP и TAZ далека от понимания, и большинство моделей заболеваний печени сосредоточены на роли YAP.Тем не менее, вышеупомянутые исследования показывают, что TAZ может играть уникальную роль в стеатогепатите и развитии фиброза, связанного с НАЖБП.

Рак печени - онкогенные корни YAP

Цирроз и хроническое воспаление в печени являются ведущими факторами риска развития рака печени (Massarweh and El-Serag, 2017). Хотя активация YAP является ранним событием в развитии HCC (Perra et al., 2014), мутации в пути Hippo редки - что указывает на альтернативные регуляторные пути для стимулирования передачи сигналов YAP.Поиск восходящих регуляторов передачи сигналов Hippo привел к выявлению множества регуляторных механизмов, начиная от механотрансдукции по передаче сигналов GPCR до взаимодействующих путей, наиболее заметно пути передачи сигналов Wnt (Meng et al., 2016; Dobrokhotov et al., 2018; Liu et al. al., 2018).

Учитывая увеличение жесткости печени, которое происходит при циррозе, механические воздействия являются ключевыми кандидатами для онкогенной активации YAP, которая способствует прогрессированию фиброза и раку печени.Механистически было показано, что некоторые мембранно-ассоциированные белки, такие как Nf2 / Merlin, строительные леса семейства ангиомотинов и белки WWC, положительно и - для некоторых членов семейства ангиомотинов - негативно регулируют передачу сигналов Hippo (Zhang et al., 2010; Li et al., 2012; Yi et al., 2013; Moleirinho et al., 2017; Hermann et al., 2018) - однако актуальность этих белков при циррозе печени до настоящего времени неизвестна. Несколько взаимодействующих путей, включая передачу сигналов Wnt и Notch, играют роль в контроле онкогенного YAP при раке печени.При гепатоцеллюлярной карциноме передача сигналов Notch не только активируется YAP, но также поддерживает петлю положительной обратной связи в Mst1 / 2-дефицитной печени для усиления передачи сигналов YAP и онкогенеза. Напротив, передача сигналов Wnt, как было показано, ингибирует передачу сигналов YAP / TAZ в печени - частично путем вмешательства в петлю обратной связи Notch-YAP (Tschaharganeh et al., 2013; Kim et al., 2017b, c). Интересно, что инактивирующие мутации в негативном регуляторе Wnt AXIN не приводят к усилению передачи сигналов Wnt / β-catenin в гепатоцеллюлярной карциноме, как можно было бы ожидать, а вместо этого связаны с пролиферативным фенотипом и сигнатурными генами, обогащенными для передачи сигналов Notch и YAP, указывающими на Wnt -независимое прямое или косвенное ингибирование YAP с помощью AXIN (Abitbol et al.2018).

Вниз по течению от активированного YAP / TAZ, неконтролируемая пролиферация и нерегулируемый контроль клеточного цикла являются одним из ключевых механизмов, стимулирующих развитие опухоли. Несколько исследований показали, что YAP / TEAD взаимодействуют с факторами транскрипции E2F ниже передачи сигналов ретинобластомы, чтобы способствовать пролиферации при раке, в том числе при раке печени (Ehmer et al., 2014; Kapoor et al., 2014; Ehmer and Sage, 2015; Fitamant et al., 2015; Hiemer et al., 2015; Shi et al., 2016). Хотя низкие уровни активного YAP недостаточны для индукции пролиферации в спокойной печени, сопутствующая активация других пролиферативных сигналов при повреждении или воспалении печени дает YAP-активированным гепатоцитам пролиферативное преимущество, приводящее к их размножению (Ehmer et al.2014; Су и др., 2015). Помимо пролиферации, передача сигналов YAP в HCC участвует во множестве связанных с раком путей, включая подавление апоптоза, дерегулируемый ответ ER / unfolded protein и хромосомную нестабильность (CNI) (Rosenbluh et al., 2012; Wu et al., 2015; Weiler et al., 2017). Наконец, что не менее важно, передача сигналов Hippo является важным игроком в регуляции воспалительной микроокружающей среды. В печени с дефицитом Mst1 / 2 мишень YAP Mcp1 запускает накопление инфильтрирующих опухоль макрофагов, которые нарушают иммунный клиренс трансформированных гепатоцитов и способствуют развитию ГЦК (Guo et al., 2017; Kim et al., 2018). Если возрастающая роль передачи сигналов Hippo в противораковом иммунитете имеет какое-либо отношение к заболеванию печени, еще предстоит изучить, но она может сыграть важную роль в оптимизации стратегий иммунотерапии, направленной на ГЦК (Taha et al., 2018).

Таргетирование сигналов гиппопотама при заболевании печени

Эффективное нацеливание на передачу сигналов Hippo in vivo - либо для стимуляции регенерации печени, либо для ингибирования фиброза и прогрессирования рака - представляет неудовлетворенную потребность в заболевании печени.Печеночная инактивация MST-киназ или YAP с помощью микроинкапсулированной siRNA , а также молчание YAP с помощью AAV-доставленной shRNA дали многообещающую эффективность на мышиных моделях, но переход в клинику пока не предвидится (Fitamant et al., 2015; Yin et al., 2016; Loforese et al., 2017; Jiang et al., 2018). Недавно транзиторная активация передачи сигналов YAP / TAZ с улучшенной регенерацией печени мыши была достигнута путем ингибирования MST1 / 2 киназ с использованием нового соединения XMU-MP-1 (Fan et al., 2016).

В отличие от регенерации, ингибирование YAP / TAZ является перспективным терапевтическим подходом при циррозе, стеатогепатите или гепатоцеллюлярной карциноме. Результаты активации YAP в печени в основном зависят от ее взаимодействия с факторами транскрипции TEAD, что делает комплексы YAP / TEAD многообещающей мишенью. Вертепорфин, вещество, идентифицированное в скрининге соединений для ингибиторов YAP / TEAD, препятствовало развитию ГЦК в печени с дефицитом Nf2 (Liu-Chittenden et al., 2012).Тем не менее, клеточная токсичность из-за нецелевых эффектов, а также образование реактивных кислородных радикалов при световой активации препятствовали переходу вертепорфина в терапию рака (Konstantinou et al., 2017). Недавно антипаразитарный ивермектин был идентифицирован как ингибитор YAP / TEAD-зависимой транскрипции и был успешно использован для ингибирования активации YAP и избыточного роста печени при Mob1a / 1b-дефицитной печени. Хотя механизм ингибирования YAP ивермектином до настоящего времени не до конца понятен, соединение, по-видимому, имеет хороший профиль безопасности, что делает его перспективным лекарственным средством для ингибирования YAP in vivo (Nishio et al., 2016). В клетках аденокарциномы пищевода CA3 - новый ингибитор YAP / TEAD-зависимой транскрипции - успешно снижал рост опухолевых клеток вместе с установленной химиотерапией (Song et al., 2018). Однако это соединение до сих пор не было протестировано в печени. В дополнение к прямым ингибиторам YAP / TAZ, соединения, которые нацелены на восходящие регуляторы передачи сигналов Hippo, были в центре внимания нескольких исследований (Bae et al., 2017). В клетках HCC ингибиторы танкиразы, которые активируют членов семейства ангиомоксии, а также ингибиторы аурокиназы ограничивают рост опухолевых клеток путем модификации активности YAP (Jia et al., 2017; Лю и др., 2017). Хотя соединения, которые препятствуют механотрансдукции путем нацеливания на F-актин или Rho, успешно использовались для модификации передачи сигналов Hippo и активности YAP in vitro , их эффективность в клетках печени неизвестна, и токсичность, связанная с вмешательством цитоскелета, вероятно, ограничит их in vivo используют (Bae et al., 2017). В Wnt-активированных клетках рака толстой кишки нацеливание на YES1 с одобренным соединением дазатинибом ингибирует фосфорилирование тирозина YAP и активацию транскрипционного комплекса β-catenin-YAP1-TBX5 (Rosenbluh et al., 2012), в то время как в клетках молочной железы ингибирование PI3K / PDK1 способно сдерживать связывание PDK1 с SAV1, что приводит к подавлению передачи сигналов Hippo вверх по течению и снижению активности YAP (Fan et al., 2013). Опять же, эффективность этих соединений при раке печени не была исследована, и тканевая специфичность YAP-взаимодействующих путей сделает идентификацию направленных регуляторов выше по течению еще более сложной. В процессе разработки нескольких многообещающих препаратов-кандидатов для ингибирования YAP / TEAD их применение в настоящее время ограничено доклиническими исследованиями, и первые клинические испытания, которые ожидаются в ближайшем будущем, покажут, оправдаются ли огромные ожидания в отношении активности YAP в лечении. человеческих болезней.