Размер шрифта
Цвета сайта
Изображения

Обычная версия сайта

Как расшифровать анализ на антитела к коронавирусу по крови инвитро таблица


Что значат результаты IgM, IgG к SARS-CoV-2? Как их понимать?

  • ИНВИТРО
  • Библиотека
  • Полезные статьи
  • Заметки инфекциониста
  • Что значат результаты...

коронавирус

covid 19

SARS-CoV-2

антитела к коронавирусу

антитела IgM и IgG

27942 15 Сентября

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Для корректной оценки результатов ваших анализов в динамике предпочтительно делать исследования в одной и той же лаборатории, так как в разных лабораториях для выполнения одноименных анализов могут применяться разные методы исследования и единицы измерения.

Если пациент сдал кровь на иммуноглобулины М и G к SARS-CoV-2 – то основные варианты/сочетания полученных результатов:

  1. Положительные IgM, отрицательные IgG 
  2. Положительные М и G 
  3. Отрицательные IgM, положительные IgG 
  4. Отрицательные IgM и IgG

Прежде, чем расшифровать данные варианты, хотелось бы остановиться на важном термине, который будет использоваться в тексте. «Инфекционный процесс» – это взаимодействие организма человека и патогенного микроорганизма, вся совокупность происходящих в нашем организме физиологических и патологических процессов, от момента заражения до санации от возбудителя. Болезнь – это частное, крайнее проявление инфекционного процесса, характеризующееся, в частности, появлением клинических симптомов. Инфекционный процесс далеко не всегда «выливается» в болезнь. Понимание этого особенно актуально во время пандемии COVID-19 для объяснения широко используемого термина «бессимптомные носители». Такие пациенты клинически не больны, но эпидемиологически могут быть опасными для окружающих. Никогда ранее, ни при одном инфекционном заболевании, ни при одной эпидемии (пандемии) в мире – не выявляли такое количество клинически здоровых носителей.

Для чего необходимо данное разъяснение? Чтобы было четкое понимание того, что человек с ЛЮБЫМИ положительными результатами Ig к SARS-CoV-2:

  • Встречался с данными вирусом 
  • Но это далеко не всегда значит то, что он переболел COVID-19. Вполне возможно, что он был «бессимптомным носителем». Соответственно: термин «переболел» при интерпретации положительных результатов антител без знания анамнеза и клинической картины – неправилен.

Итак, варианты полученных результатов.

Вариант 1: острый инфекционный процесс. Давность инфицирования – примерно 1-3 недели от момента заражения.

Вариант 2: инфекционный процесс давностью от 3 до 8-10 недель от момента заражения.

Вариант 3: примерная давность контакта с SARS-CoV-2 – более 10-12 недель.

Вариант 4: либо пациент, получивший данный результат не встречался с SARS-CoV-2, либо контакт был совсем недавно, до недели от момента обследования.

Это – наиболее частые и типичные сочетания результатов IgM и G. Возможно также получение «сомнительного» результата одного из тестов. Что такое «сомнительный результат»?

Это значение, полученное при конкретном анализе пациента, которое не позволяет трактовать данный результат, как «положительный» или «отрицательный». Чаще всего, такой результат возможен при низком уровне антител, который характерен, например, для ранних сроков заболевания. В таком случае необходимо пересдать данный анализ через 10-14 дней для оценки динамики. Возможны также медицинские состояния, при которых уровень ЛЮБЫХ антител может быть снижен (онкологические заболевания, иммуносупрессивная терапия, иммунодефициты и другие).

О том, как меняется уровень антител, о «клетках памяти» - в следующих публикациях.

А.С. Поздняков, к.м.н.,
инфекционист, главный врач ООО «Инвитро-Сибирь»


Статистика INVITRO по пациентам с выявленными антителами к коронавирусу

Анализы для выявления антител в организме

490 руб

В корзину

Антитела, качественные, к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgM; (Anti-SARS-CoV-2, S (spike) protein, qualitative, IgM)

Для проведения исследования в медицинских офисах необходимо предъявить СНИЛС и документ удостоверяющий личность. Синонимы: IgM антитела к вирусу, вызывающему COVID-...

До 1 рабочего дня

Доступно с выездом на дом

990 руб

В корзину

ВАЖНО!

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Для корректной оценки результатов ваших анализов в динамике предпочтительно делать исследования в одной и той же лаборатории, так как в разных лабораториях для выполнения одноименных анализов могут применяться разные методы исследования и единицы измерения.


Рекомендации

  • Врач-инфекционист: острая фаза пандемии прошла, но вирус никуда не делся

    13937 16 Марта

  • Заметки инфекциониста

    14036 08 Октября

  • Заметки инфекциониста

    19815 12 Июля

Показать еще

коронавирус

covid 19

Коронавирусная болезнь COVID-19

Настоящая пандемия COVID19 вызвана вирусом SARS-Cov-2, который относится к роду β-коронавирусов. Инфицирование человека могут вызывать только альфа- и бетта- подтипы коронавируса

Подробнее

коронавирус

covid 19

SARS-CoV-2

антитела к коронавирусу

антитела IgM и IgG

Антитела – что это, для чего нужны организму?

В данной публикации продолжим объяснение медицинских терминов, которые все больше и больше фигурируют в информационном пространстве с учетом продолжающейся пандемии, вызванной вирусом SARS-CoV-2.

Подробнее

коронавирус

covid 19

SARS-CoV-2

коллективный иммунитет

Коллективный иммунитет

В последнее время люди стали использовать термины, о которых ранее даже не слышали: «инкубационный период», «антитела», «ПЦР», «коллективный иммунитет».

Подробнее

коронавирус

covid 19

COVID-19: механизмы и пути передачи, инкубационный период, группы риска

Вирус в настоящее время известен как коронавирус 2 тяжелого острого респираторного синдрома (Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus 2 - SARS-CoV-2), и вызванное им заболевание называется коронавирусной болезнью 2019 (COronaVIrus Disease 2019 - COVID-19).

Подробнее

Коронавирус

COVID-19

Лечение новой коронавирусной инфекции COVID-19

Коронавирусная инфекция продолжает развиваться, появляются новые штаммы, и те протоколы лечения, которые еще совсем недавно были актуальными, уходят на второй план, а специалисты ищут новые схемы.

Подробнее

Анализ на количественные антитела IgG к спайковому белку S коронавируса COVID-19

Метод определения

Иммуноферментный анализ (ИФА), SARS-CoV-2-IgG количественный-ИФА-БЕСТ (Вектор Бест, Россия).

Исследуемый материал Сыворотка крови

Доступен выезд на дом

Для проведения исследования в медицинских офисах Москвы необходимо предъявить СНИЛС и документ удостоверяющий личность.

Синонимы: Анализ крови на антитела к SARS-CoV-2 (S-белку, включая RBD), IgG, количественное определение; Антитела класса G к SARS-CoV-2 (S-белку и RBD), количественно. Anti-SARS-CoV-2 (S protein, including RBD), IgG, quantitative; Anti-SARS-CoV-2, spike (S) protein (RBD), IgG, quantitative. 

Краткая характеристика определяемых количественно IgG антител к S-белку 

SARS-CoV-2 SARS-CoV-2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 – тяжелого острого респираторного синдрома коронавирус 2) – официальное наименование вируса, вызвавшего эпидемию COVID-19.  

COVID-19 (coronavirus disease 2019 – коронавирусная болезнь 2019) – название болезни, которую индуцирует новый вид коронавируса. 

Источником передачи инфекции SARS-CoV-2 является, в основном, больной человек, в том числе находящийся в инкубационном периоде заболевания, составляющем от 2 до 14 (в среднем 5-7) дней. Клинические проявления могут быть неспецифичными симптомами ОРВИ (чаще – повышение температуры, сухой кашель, затруднение дыхания). Дополнительные эпидемиологические признаки – подтвержденный либо вероятный контакт с больными COVID-19, а также проявления в виде пневмонии с характерными изменениями в легких по данным компьютерной томографии (КТ), свидетельствуют о высокой вероятности COVID-19. 

SARS-CoV-2 стимулирует гуморальный и клеточный ответ иммунной системы инфицированного человека. Гуморальный ответ характеризуется типичным профилем продукции специфических антител классов M и G, которые способны распознавать и связывать чужеродные белки, характерные для этого патогена, участвуя в механизмах его нейтрализации и удаления. Антитела класса M появляются первыми – это может наблюдаться через несколько дней от появления симптомов. Почти одновременно или вскоре вслед за ними появляются IgG (более, чем у половины пациентов уже в период 8-14 дней от начала клинических признаков инфекции, а в период от 15 дней и более – у 99% пациентов). По уровню и динамике концентрации антител в крови гуморальный иммунный ответ индивидуально варьирует, в том числе и в зависимости от тяжести болезни. Уровень IgM снижается до неопределяемого обычно в пределах до одного, реже – двух месяцев от начала заболевания, в то время как IgG антитела могут сохраняться в крови длительное время (3-5 месяцев и более), выполняя защитную роль. 

Четыре структурных белка, которые кодирует РНК вируса SARS-CoV-2, – спайковый (S), оболочечный (E), нуклеокапсидный (N), мембранный (M). Структуры, выступающие на поверхности вируса подобно шипам и придающие сходство с короной, сформированы спайковым (S) белком. S-белок состоит из двух субъединиц, на одной из которых располагается рецептор-связывающий домен (RBD), посредством которого вирус связывается с рецепторами на клетках эпителия дыхательных путей человека при заражении. Нуклеокапсидный и спайковый белки в ходе инфекции вызывают наиболее выраженный антительный ответ. Выявление специфических антител к этим белкам используют в качестве иммунных свидетельств прошлого контакта организма с новым коронавирусом. При этом нейтрализующая активность антител, вырабатываемых против SARS-CoV-2, преимущественно соотносится с антителами к S-белку (который в связи с этим является главной мишенью в вакцинологии).

Вакцинные препараты, использующие в качестве мишени S-белок коронавируса (в том числе векторная Гам-КОВИД-Вак – Спутник V, Спутник Лайт), или вакцины на основе мРНК S-белка, как и инактивированные цельновирионные вакцины (в т. ч. КовиВак) также индуцируют выработку антител к S-белку SARS-CoV-2. 

С какой целью используют количественное определение IgG антител к S-белку SARS-CoV-2 

Выявление специфических антител к вирусу SARS-CoV-2 класса G указывает на факт недавнего или прошлого воздействия вируса. Поэтому такие тесты используют в комплексной диагностике при наличии клинических подозрений на инфекцию новым коронавирусом или ее осложнения. Основной метод лабораторного подтверждения острой инфекции COVID-19 – выявление методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) присутствия РНК вируса в биоматериале, взятом из дыхательных путей, обычно – мазке из носоглотки и ротоглотки. Однако, информативность РНК-тестирования зависит от достаточности содержания вируса в материале выбранной локализации на той или иной стадии инфекции, а также качества взятия материала. Наиболее информативны ПЦР-исследования мазков из рото- и носоглотки в первые 1-5 дней от начала клинических проявлений инфекции. На более поздних сроках (более 1-2 недель) целесообразно дополнительно к ПЦР-тестированию мазков применять исследование крови на наличие специфических антител, вырабатываемых организмом в ответ на инфекцию SARS-CoV-2. 

Оценка уровня IgG антител к SARS-CoV-2 может использоваться также с целью выявления иммунологических свидетельств прошлой (в том числе субклинической или бессимптомной инфекции) для оценки вероятного иммунного статуса обследуемого человека по отношению к этому вирусу, прослеживания контактов, популяционных эпидемиологических исследований.  

Поскольку большинство зарегистрированных и разрабатываемых вакцин против SARS-CoV-2 нацелено на выработку антител к S-белку, количественная оценка уровня этих антител может быть информативным методом для оценки динамики иммунного ответа на вакцинацию такими препаратами. В частности, этот тест может использоваться для оценки ответа на применение векторной вакцины с включением S-белка Гам-КОВИД-ВАК – Спутник V, Спутник Лайт, а также цельновирионных инактивированных вакцин (в том числе – КовиВак производства ФНЦ им. М.П. Чумакова) или вакцин на основе мРНК S-белка (в частности, вакцин Pfizer-BioNTech и Moderna или другие). Тест не применим для оценки иммунитета после вакцинации вакциной ЭпиВакКорона. 

Применяемые в данном тесте калибраторы аттестованы по Первому международному стандарту ВОЗ для антител к SARS-CoV-2, результат представляется в единицах этого стандарта (BAU/мл), что поможет сравнивать результаты тест-систем, нацеленных на выявление иммуноглобулинов того же класса и специфичности.


Диапазон количественного измерения: 3-500 BAU/мл.


Elecsys® Anti-SARS-CoV-2

Тяжелый острый респираторный синдром Коронавирус 2 (SARS-CoV-2) представляет собой оболочечный одноцепочечный РНК-вирус семейства Coronaviridae. Коронавирусы имеют структурное сходство и состоят из 16 неструктурных белков и 4 структурных белков: шипа (S), оболочки (E), мембраны (M) и нуклеокапсида (N). Коронавирусы вызывают заболевания с симптомами от легкой простуды до более тяжелых, таких как коронавирусная болезнь 2019 (COVID-19).), вызванные SARS-CoV-2 1,2 .

SARS-CoV-2 передается от человека к человеку преимущественно воздушно-капельным путем, хотя возможна и непрямая передача через загрязненные поверхности 3-6 . Вирус проникает в клетки-хозяева через ангиотензинпревращающий фермент 2 (ACE2), который наиболее распространен в легких 7,8 .

Инкубационный период для COVID-19 варьируется от 2 до 14 дней после заражения, при этом в большинстве случаев симптомы проявляются примерно через 4–5 дней после заражения 3,9,10 . Спектр симптоматической инфекции варьируется от легкой (лихорадка, кашель, утомляемость, потеря обоняния и вкуса, одышка) до критической 11,12 . Хотя большинство симптоматических случаев не являются тяжелыми, тяжелое заболевание возникает преимущественно у взрослых в пожилом возрасте или с сопутствующими заболеваниями и требует интенсивной терапии. Острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС) является серьезным осложнением у пациентов с тяжелым заболеванием. Критические случаи характеризуются, например, дыхательной недостаточностью, шоком и/или полиорганной дисфункцией или отказом 11,13,14 .

Точный диагноз COVID-19 влечет за собой прямое обнаружение РНК SARS-CoV-2 с помощью технологии амплификации нуклеиновых кислот (NAAT) 21-23 . Серологические анализы, которые выявляют антитела против SARS-CoV-2, могут способствовать выявлению лиц, ранее инфицированных вирусом, и оценке степени воздействия на население. Таким образом, они могут помочь принять решение о применении, усилении или ослаблении мер по сдерживанию 24 .

При заражении SARS-CoV-2 у хозяина возникает иммунный ответ против вируса, включая выработку специфических антител против вирусных антигенов. И IgM, и IgG обнаруживаются уже на 5-й день после появления симптомов 25,26 . Медиана сероконверсии наблюдалась на 10-13 день для IgM и на 12-14 день для IgG 27-29 , в то время как максимальные уровни были зарегистрированы на 2-3 неделе для IgM, на 3-6 неделе для IgG и на 2 неделе для общего антитело 25-31 . В то время как IgM, по-видимому, исчезают примерно на 6-7 неделе 32,33 , в это время наблюдается высокая серопозитивность IgG 25,32,33 . Хотя IgM обычно является основным классом антител, секретируемых в кровь на ранних стадиях первичного ответа антител, уровни и хронологический порядок появления антител IgM и IgG, по-видимому, сильно различаются для SARS-CoV-2. Анти-SARS-CoV-2 IgM и IgG часто появляются одновременно, и сообщалось о некоторых случаях, когда IgG появляется раньше, чем IgM, что ограничивает его диагностическую ценность 26,27,29,34,35 .

После заражения или вакцинации сила связывания антител с антигенами со временем увеличивается — этот процесс называется созреванием аффинности 36 . Высокоаффинные антитела могут вызывать нейтрализацию путем распознавания и связывания специфических вирусных эпитопов 37,38 . При инфекции SARS-CoV-2 антитела, нацеленные на белки шипа и нуклеокапсида, которые коррелируют с сильной нейтрализующей реакцией, образуются уже на 9-й день и далее, что позволяет предположить, что сероконверсия может привести к защите, по крайней мере, на ограниченное время 34,39-42 .

Какие тесты потенциально могут быть использованы для скрининга, диагностики и мониторинга COVID-19 и каковы их преимущества и недостатки?

20 апреля 2020 г.

Kile Green 1 , Amanda Winter 2 , Rachel Dickinson 2 , Sara Graziadio 2 , Robert Wolff 3 , SUSAN Mallet 40004, 9004, 9004, 9004, 9004, 9004, 9004, 9004, 9004, , Robert Wolff 3 , SUSAN Mallet 4, , , . Джой Аллен 1

1 NIHR Newcastle In Vitro Diagnostics Co-operative
Университет Ньюкасла, Ньюкасл-апон-Тайн, NE2 4HH
2 NIHR Newcastle In Vitro Diagnostics Co-operative
Ньюкасл-апон-Тайн Фонд больниц NHS, Ньюкасл-апон-Тайн, NE1 4LP
3 Kleijnen Systematic Reviews Ltd 6,0077 Business Park, York, YO19 6FD
4 Institute of Applied Health Research
University of Birmingham B15 2TT

PDF для загрузки


ВЕРДИКТ
Многие диагностические тесты19 на коронавирусную болезнь 20(COVID-19) доступны до сих пор, и каждый день все больше получают разрешения на экстренную помощь. Эти тесты в значительной степени основаны на четырех различных методах: 1) полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (RT-PCR) — текущем стандартном тесте на COVID-19, 2) петлевой изотермической амплификации (LAMP) — простом, но менее разработанном тесте. метод, 3) латеральный поток — ручные одноразовые анализы, дающие результаты для отдельного пациента всего за 15 минут, и 4) твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) — быстрые и технически простые анализы, которые легко читаются и предлагают относительно высокая пропускная способность.  

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Ряд молекулярных методов, от тестирования в центральной лаборатории до тестов по месту оказания медицинской помощи, находятся в стадии разработки или уже доступны для диагностики и лечения пациентов с COVID-19. Эти методы, хотя и хорошо известны исследователям и клиницистам, имеющим опыт амплификации дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), а также анализам антител и антигенов, могут быть относительно неизвестны более широкому сообществу. Этот документ был написан, чтобы изложить и объяснить основные принципы основных мер борьбы с COVID-19.диагностические тесты, используемые в настоящее время или находящиеся на стадии испытаний.

ГЛОССАРИЙ
Ключевые термины, используемые в этом документе (выделены жирным шрифтом), описаны здесь: во время вирусной инфекции. Организм вырабатывает ранние «прототипные» антитела (IgM) средней силы для связывания с вирусом. Они могут начать работу по уничтожению вируса примерно через пять дней после начала новой инфекции. Обычно через восемь-десять дней после начала инфекции антитела IgG с высокой силой связывания могут способствовать более быстрой элиминации вируса. Антитела действуют, создавая соответствующую контурную поверхность для прилипания к антигенам, используя сложный процесс селекции для амплификации антител с наилучшей совместимостью поверхности и самым сильным связыванием.

Антиген – Антиген – это структура, признанная человеческим организмом чужеродной, которая запускает иммунную систему для выработки систем самозащиты для удаления патогенов из крови и тканей. Клиренс антигена возглавляют антитела и лейкоциты.

COVID-19 — Коронавирусная болезнь-19 — Респираторное заболевание, вызванное тяжелым острым респираторным синдромом коронавирус 2 (SARS-CoV-2), в просторечии называемое коронавирусом. В семейство коронавирусов входят не только SARS (-1 и -2) и MERS, но и более легкие формы (вызывающие 15-20% простудных заболеваний).

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота – Молекула, которую люди и большинство организмов используют для хранения своего генетического кода. ДНК содержит информацию, которую клетки используют для производства белков. Он образован двумя нитями, которые соединяются вместе, образуя форму спирали.

Фермент – Фермент – это белок, который ускоряет химические реакции, адаптируя или изменяя другие белки и молекулы.

Флуоресценция – Это свет, испускаемый некоторыми молекулами, когда они поглощают энергию.

Стадный иммунитет — Этот метод защиты от распространения болезни обеспечивает популяционный иммунитет путем вакцинации большого процента населения, тем самым защищая тех, кто не имеет иммунитета, уменьшая вероятность заражения.

РНК – рибонуклеиновая кислота – У человека РНК выполняет множество функций, но главная из них – копирование фрагментов ДНК для создания белков. Некоторые вирусы используют РНК вместо ДНК для хранения своего генетического кода, в том числе вирус, вызывающий COVID-19..

Чувствительность – Способность диагностического теста давать положительный результат, когда он должен быть положительным.

Сыворотка — — это жидкий компонент крови после удаления белков свертывания крови.

Специфичность – Способность диагностического теста давать отрицательный результат, когда он должен быть отрицательным.

Тампон – Небольшой кусочек марли или другого абсорбирующего материала, прикрепленный к палочке, используемой для взятия проб у пациентов. При тестировании на коронавирус используются как длинные, так и короткие мазки. Длинные тампоны используются врачом для взятия мазков из носа, а короткие тампоны могут использоваться самими пациентами. Для разных протоколов могут потребоваться разные типы мазков.

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР)

Обзор технологии

ПЦР — очень распространенный научный метод, который уже около 20-30 лет широко используется в исследованиях и медицине для обнаружения генетической информации. ОТ-ПЦР — это специальная версия, используемая при обнаружении РНК , и теперь она используется в качестве теста для обнаружения SARS-CoV-2, вируса, вызывающего COVID-19 . Этот тип теста часто используется в качестве передового теста для COVID-19 , поскольку он непосредственно проверяет наличие вируса РНК .

Тесты ОТ-ПЦР довольно быстрые, чувствительные и надежные, способны давать результаты через 3–4 часа, хотя обычно это занимает больше времени, если образцы необходимо сначала отправить в специализированные сторонние лаборатории (в среднем 6–8 часов).

Многие диагностические и исследовательские компании производят продукты, тесты и оборудование для ОТ-ПЦР, поэтому эта технология широко доступна. Некоторые тесты ОТ-ПЦР разрабатываются как наборы «все в одном», что сокращает объем лабораторных работ и вероятность загрязнения.

Как это работает

После того, как образец взят, химические вещества удаляют все белки, жиры и другие молекулы, оставляя только РНК . Это будет смесь генетического материала человека, а также любой вирусной РНК , которая может присутствовать.

Тестовый набор ферментов копирует РНК в ДНК , которая амплифицируется для обнаружения вируса с помощью ПЦР-машины, которая циклически меняет температуру теста таким образом, чтобы примерно 35 миллиардов копий вируса ДНК созданы для каждой цепи вируса РНК , которая изначально присутствовала.

Флуоресцентные маркеры обычно используются для связывания с амплифицированной ДНК и получения света, который может считываться машиной для получения результата теста. Если интенсивность света, излучаемого в образце, достигает определенного порога, это классифицируется как положительный тест. Количество температурных циклов ПЦР, которые потребовались для достижения порога флуоресценции , регистрируется и дает оценку того, сколько вируса присутствовало в образце пациента.

Что обнаруживает тест?
ОТ-ПЦР определяет, присутствует ли вирусная РНК в образцах, взятых у пациента. Он делает это путем захвата и амплификации областей генетического материала вируса, обычно это шиповидный белок, N-белок или оболочка (см. рисунок).
Для измерения вирусной РНК она преобразуется в ДНК , много раз копируется с использованием повторяющихся температурных циклов в ПЦР-машине, а затем флуоресцирует 9Для обнаружения вируса используются маркеры 0064. Если количество флуоресценции превышает определенный уровень, это подтверждает наличие вируса. Количество температурных циклов, которые машина выполняет для достижения этого порога, записывается, чтобы оценить, сколько вируса присутствовало в образце пациента. Чем меньше число циклов, тем больше вируса присутствовало. Обычно эти образцы берутся из носа или горла с использованием длинных или коротких тампонов , но образцы можно собирать и другими способами. Сбор образцов из мест, где вирус выделяется или размножается, повышает точность теста.

Что означает результат?
Тест ОТ-ПЦР обладает высокой чувствительностью и достаточно надежен, если он проводится на образце из инфицированной части тела во время активной инфекции.

Положительный результат теста: – Положительный результат ПЦР означает, что человек, у которого был взят образец, в настоящее время инфицирован вирусом.
Отрицательный результат теста: – Отрицательный результат ПЦР может означать, что человек в настоящее время не инфицирован этим вирусом, вирус отсутствует в месте, откуда был взят образец, взятый образец был низкого качества или что слишком рано или слишком поздно в инфекции, чтобы обнаружить реплицирующийся вирус. Вот почему отрицательные результаты теста требуют, чтобы новые образцы пациентов были взяты через несколько дней, чтобы уменьшить вероятность ошибочного пропуска инфицированного человека.

Тест ОТ-ПЦР не может определить, был ли у человека вирус, а затем вылечился ли он после окончания болезни COVID-19 , т. е. было ли у человека заболевание, поскольку он обнаруживает только наличие активного вируса.

Преимущества и ограничения
Преимущества:

  • ОТ-ПЦР признан учеными и медицинским персоналом надежным и хорошо задокументированным методом.
  • Поскольку ОТ-ПЦР так распространена в исследованиях и медицине, технология уже используется для тестирования на COVID-19 .
  • RT-PCR может обнаруживать текущие инфекции, позволяя медицинскому персоналу определить, кто в настоящее время инфицирован, а кто нет.

Недостатки:

  • ОТ-ПЦР основывается на захвате и обнаружении вируса, поэтому можно пропустить пациентов, которые вылечились от вируса и выздоровели.
  • Распределение вируса по дыхательным путям у разных пациентов различается, поэтому, даже если человек инфицирован, вирус можно обнаружить только в мокроте или в носоглотке мазок , но не обязательно в обоих местах одновременно.
  • ОТ-ПЦР на COVID-19 может только сказать, заражен ли человек в настоящее время этим конкретным коронавирусом. Он не может предоставить информацию о других заболеваниях или симптомах.

Дополнительная информация
Пожалуйста, перейдите по ссылкам ниже для получения дополнительной информации о ОТ-ПЦР.

Основная сводка ОТ-ПЦР (короткое видео-слайд-шоу):
https://www.youtube.com/watch?v=EaGh2eKfvC0
Научные принципы ОТ-ПЦР (20-минутное видео о принципах ОТ-ПЦР):
https://www.youtube.com/watch?v=DH7o9Df5_50
Как коронавирус выявляется с помощью ОТ-ПЦР (краткий статья о тестировании COVID-19 методом ОТ-ПЦР):
https://www.iaea.org/newscenter/news/how-is-the-covid-19-virus-detected-using-real-time-rt- pcr

Петлевая изотермическая амплификация (LAMP)

Обзор технологии
копии вируса ДНК , LAMP проводят при постоянной температуре 60-65°C.
Количество ДНК , полученное в LAMP, намного выше, чем в RT-PCR, и положительный результат теста можно увидеть визуально, не требуя, чтобы машина считывала результаты.
LAMP — это более новый метод по сравнению с ОТ-ПЦР, но он технически прост и удобен для выполнения обученным ученым, что делает его потенциально полезным методом для обнаружения COVID-19 . Поскольку это более новая технология, доказательств ее использования меньше, но диагностические компании в настоящее время проводят клинические испытания в ее поддержку.

Как это работает
LAMP-тесты на COVID-19 начинаются со сбора образцов из носа или горла с помощью тампона сильный кашель.
Как и ОТ-ПЦР, вирусная РНК в образце преобразуется в ДНК , что позволяет ее копировать.
Амплификация вирусной ДНК с использованием технологии LAMP и реагентов может быть обнаружена, когда реакционная смесь становится мутной из-за образования химического вещества под названием «пирофосфат магния». Поскольку это помутнение можно увидеть невооруженным глазом, оно позволяет легко диагностировать COVID-19 учеными и клиницистами.
Точность результатов можно повысить, используя в реакционной смеси специальные флуоресцентные красители или красители, изменяющие цвет.
Поскольку красители взаимодействуют с вирусной ДНК , можно измерить интенсивность света или изменение цвета, чтобы получить приблизительное количество молекул вирусной РНК , которые первоначально находились в образце.

Что обнаруживает тест?
Подобно ОТ-ПЦР, LAMP определяет наличие или отсутствие вируса РНК присутствует в образцах, взятых у пациента. Он делает это путем захвата и амплификации областей генетического материала вируса, обычно шиповидного белка, белка N, оболочки или нескольких областей одновременно (см. диаграмму вируса в разделе ОТ-ПЦР выше).
Образцы можно собирать так же, как и для ОТ-ПЦР, обычно из носа или горла с использованием длинных или коротких тампонов , или через слизь, выделяющуюся при сильном кашле человека. Чтобы измерить вирусную РНК , ее необходимо преобразовать в ДНК с использованием фермента и многократно скопированного. Результаты теста определяют по помутнению или изменению цвета реакционной смеси.

Что означает результат?

Как и ОТ-ПЦР, тесты LAMP обладают высокой чувствительностью и надежны, если они выполняются на образце из инфицированной части тела во время активной инфекции.

Положительный результат теста: – Положительный результат теста LAMP означает, что человек, у которого был взят образец, в настоящее время инфицирован вирусом.
Отрицательный результат теста: — Отрицательный результат LAMP может означать, что человек в настоящее время не заражен этим вирусом, вирус отсутствует в месте, откуда был взят образец, или что это слишком рано или слишком поздно для инфекции для обнаружения репликации вируса. Вот почему, когда результаты теста отрицательные, новые образцы пациентов берутся через несколько дней, чтобы уменьшить вероятность ошибочного пропуска инфицированного человека.

LAMP-тесты не могут определить, переболел ли человек вирусом, а затем избавился от него после окончания COVID-19 заболевание, т. е. было ли у человека заболевание, поскольку оно обнаруживается только при наличии активного вируса.

Преимущества и ограничения

Преимущества:

  • LAMP — это быстрый метод, который может дать результаты через 2-3 часа.
  • Результаты можно прочитать на глаз.
  • Этот простой и дешевый метод можно применять в больничных лабораториях, что сокращает время между взятием образца и постановкой диагноза.
  • LAMP может обнаруживать текущие инфекции болезней, позволяя медицинскому персоналу определять, кто в настоящее время инфицирован, а кто нет.

Недостатки:

  • Эта технология новее, чем ОТ-ПЦР, и за ней не стоит такой обширный опыт исследований. Тесты с использованием технологии LAMP для COVID-19 все еще оцениваются в клинических условиях.
  • Наука, стоящая за созданием этих тестов, сложнее, чем ОТ-ПЦР.
  • Тесты LAMP основаны на захвате и обнаружении вируса, поэтому можно пропустить пациентов, которые избавились от вируса и выздоровели от болезни.
  • Распространение вируса в дыхательных путях у разных пациентов различается, поэтому, даже если человек инфицирован, вирус можно обнаружить только в мокроте или мазке из носоглотки , но не обязательно в обоих местах одновременно.
  • LAMP-тесты на COVID-19 могут только сказать, заражен ли человек в настоящее время этим конкретным коронавирусом. Он не может предоставить информацию о других заболеваниях или симптомах и не сообщает персоналу, был ли пациент ранее инфицирован вирусом или есть ли у пациента какой-либо иммунитет к вирусу.

Дополнительная информация
Пожалуйста, перейдите по ссылкам ниже для получения дополнительной информации об анализах LAMP.

Краткое введение в LAMP для диагностики (8-минутное видео):
https://www. youtube.com/watch?v=Kc_0Hs_EI2Y

Анимированное слайд-шоу процесса LAMP в действии (2-минутное видео):
https://www.youtube.com/watch?v=ZXq756u1msE

Loop-mediated Isothermal Amplification (научно-исследовательская статья о диагностике с использованием LAMP):
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19396514/

Латеральный поток/коллоидный золото иммунохроматография

. Тесты на антитела ' в средствах массовой информации, поскольку они в настоящее время используются для обнаружения антител к заболеванию в крови пациента. Технология также тестируется на предмет использования антигена .
В тестах с латеральным потоком используется та же технология, что и в тестах на беременность. Тесты бокового потока могут обнаружить антитела к вирусу из крови пациента, указывающие на то, что пациент болен COVID-19 или выздоровел от COVID-19 . Реже тесты бокового потока могут использоваться для обнаружения присутствия активного вируса путем непосредственного обнаружения вирусных белков.

Тесты бокового потока на антитела для SARS-CoV-2 производятся в виде наборов для тестирования, используемых специалистом или клиницистом, а не самими пациентами. Для них требуется капля крови пациента либо из вены, либо из маленького укола пальца, аналогично тесту укола пальца, используемому для мониторинга уровня сахара в крови при определенных типах диабета.
Эти типы тестов работают совершенно иначе, чем методы RT-PCR и LAMP, и обнаруживают иммунный ответ пациента на вирус, а не обнаруживают сам вирус.
Тесты бокового потока на антитела могут быть выполнены быстро, а производство тестов может быть дешевым, поэтому несколько диагностических компаний усердно работают над разработкой тестов бокового потока для SARS-CoV-2.
Основным преимуществом этого типа теста также является возможность увидеть, инфицированы ли пациенты в настоящее время или выздоровели после COVID-19 , даже если они полностью выздоровели и избавились от вируса несколько месяцев назад. Однако он не может отличить активную инфекцию от предыдущей.

Как это работает
Иммуноанализы с латеральным потоком для COVID-19 — это простые устройства, которые могут обнаруживать антител в крови.
Небольшой образец крови пациента берется из вены или из пальца клиницистом и помещается на губчатую подушечку в тестовом устройстве. Несколько капель разбавляющей жидкости, называемой «буфером», добавляются, чтобы помочь пробе крови течь через устройство.
По мере прохождения образца через устройство присутствующие в образце антитела против SARS-CoV-2 будут присоединяться к химическим веществам в устройстве, захватывая антитела на тестовой и контрольной линиях. Этот процесс захвата и связывания приводит к изменению цвета вдоль тестовой и контрольной линий, которое можно увидеть невооруженным глазом, образуя одну, две или три линии в зависимости от типа присутствующих антител
(IgM или IgG).

Что обнаруживает тест?
Иммуноанализ с латеральным потоком на SARS-CoV-2 выявляет два типа защитных антител , которые вырабатываются организмом, когда иммунная система распознает чужеродную структуру, в данном случае SARS-CoV-2, вирус, вызывающий COVID-19. 19 .
Эти антитела помогают бороться с болезнью и остаются в крови в течение нескольких месяцев после того, как вирус и болезнь вылечены. Наличие антител в организме часто называют иммунитетом или иммунитетом человека к вирусу, так как эти , антитела защищают от повторного заражения и возврата той же болезни.
Когда мы заражаемся вирусом, наша иммунная система вырабатывает ранние «прототипы» антител (IgM) с промежуточной силой связывания с вирусом, которые способны начать работу по уничтожению вируса примерно через 5 дней после новой инфекции. Как правило, через 8-10 дней после заражения антитела IgG с высокой силой связывания могут способствовать более быстрой элиминации вируса. Антитела действуют, образуя соответствующую контурную поверхность, чтобы прилипать к чужеродным антигенов , используя сложный процесс селекции для амплификации антител с наилучшим совпадением поверхности и самым сильным связыванием.

Иммуноанализы с латеральным потоком антител могут быть разработаны для обнаружения IgM или IgG по отдельности или обоих вместе.

Иммуноанализы с латеральным потоком Antigen представляют собой еще более новую технологию с дополнительными научными и техническими проблемами, что означает, что они вряд ли будут разработаны в период пандемии. Эти антиген 9Анализы 0064 выявляют вирус напрямую, без этапов амплификации ОТ-ПЦР и LAMP, и, как и эти тесты, способны обнаруживать только текущую активную вирусную инфекцию, но не перенесенную инфекцию.

Что означает результат?
Антитело Иммуноанализ с латеральным потоком обнаруживает антитела к вирусу в крови. Они не обнаруживают сам вирус . Возможность надежного обнаружения реакции иммунной системы с использованием только одного образца (крови) является огромным преимуществом, равно как и усиление сигнала обнаружения, генерируемого иммунным ответом организма. Использование 9Сам по себе ответ антитела 0055
не позволяет различить людей, которые в настоящее время инфицированы, и тех, кто излечился от вирусной инфекции.
Тесты на антитела обеспечивают чрезвычайно важную возможность обнаружения перенесенной инфекции вирусом для выявления людей, у которых не было симптомов, людей, которые избавились от вируса и, таким образом, больше не рискуют заразиться или передать вирус другим. Кроме того, тесты на антитела имеют решающее значение для оценки распространения вируса среди населения и уровня «коллективный» иммунитет в популяции. Это важно для понимания потенциальных последствий отмены или применения мер по борьбе с вирусом, таких как карантин, социальное дистанцирование, закрытие школ и рабочих мест.
Иммуноанализ на антитела IgG и IgM в латеральном потоке очень прост для чтения:
Должна появиться контрольная линия, чтобы показать, что анализ работает правильно.
Затем появятся тестовые линии, если в образце будет обнаружен любой из типов антител . Появление линий для IgG или IgM, или для того и другого, указывает на положительный тест, что свидетельствует о том, что пациент был инфицирован вирусом 9.0055 COVID-19 коронавирус.

Преимущества и ограничения  

Преимущества:

  • Анализ латерального потока очень быстр для одного пациента, дает результаты всего за 15 минут.
  • Тестирование уровней антитела в крови позволяет проверить на присутствие вируса один образец пациента из одной доступной части тела, где отбор проб является неинвазивным.
  • Эти тесты требуют минимальной подготовки для выполнения и не зависят от специализированных лабораторий или ученых для анализа.

Недостатки:

  • Технология новая, и доказательства ее точности в диагностике коронавируса все еще оцениваются.
  • На данный момент доступные тесты бокового потока могут только определить, был ли пациент в какой-то момент инфицирован COVID-19 . Потребуется дальнейшее тестирование, чтобы проверить, инфицирован ли пациент в настоящее время. Будущие версии этой технологии могут позволить клиницистам выявлять текущие инфекции.
  • Испытания на боковой поток более дорогие и трудоемкие при больших партиях испытаний, чем в специализированной лаборатории тесты на антитела , такие как ELISA.

Дополнительная информация
Дополнительные сведения о технологии латерального потока см. по ссылкам ниже.

Основные сведения об иммуноанализах с латеральным потоком (короткая двухминутная анимация):
https://www.abingdonhealth.com/videos/how-does-a-lateral-flow-immunoassay-work/

Как коронавирус обнаружено с помощью ОТ-ПЦР и латерального потока (короткая статья часто задаваемых вопросов о тестировании COVID-19 с помощью ОТ-ПЦР и латерального потока):
https://www. bivda.org.uk/News-Events/Blog/ArticleID/270/A-short-FAQ-on-COVID-19-Testing

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Обзор технологии
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это распространенный биохимический метод, который можно использовать для обнаружения антигенов или антител в зависимости от типа используемого теста. В ИФА
используются ферментов , связанных с антителами , которые могут присоединяться к тестируемой молекуле и вызывать изменение цвета, которое можно измерить с помощью специализированного прибора. Сила изменения цвета дает ученым и клиницистам представление о количестве интересующих молекул в образце.
ELISA можно проводить в виде стандартных партий до 96 анализов, выполняемых одновременно, что позволяет использовать дешевый и эффективный метод для одновременного тестирования большого количества образцов пациентов. Эта технология может помочь увеличить количество пациентов, которых можно проверить на SARS-CoV-2. Наиболее эффективные анализы ELISA при мониторинге предшествующей инфекции обнаруживают антител против SARS-CoV-2. В будущем ИФА можно будет использовать для тестирования на активную вирусную инфекцию путем обнаружения вирусного белка (9).0055 антиген ), но это тестирование не будет таким точным и пока не доказано.

Как это работает
ELISA обнаруживает антитела , вырабатываемые в крови пациентов в результате заражения SARS-CoV-2. Весь тест может быть выполнен в одной пробирке или лунке и включает смешивание образцов пациентов , антител , антигенов и ферментов вместе с молекулой, изменяющей цвет. В приведенном ниже примере описывается типичный антитело ИФА.

 

Что обнаруживает тест?
Тесты ELISA для обнаружения антител обнаруживают реакцию антител на инфекцию COVID-19 .
Обнаружение антител к SARS-CoV-2 может сказать врачу, был ли пациент инфицирован COVID-19 в настоящее время или в прошлом. Однако инфицированные пациенты не будут обнаружены сразу после заражения, а только тогда, когда иммунная система к вирусу может быть обнаружена в крови, примерно через 5 дней после заражения для теста, обнаруживающего IgM 9.0055 антитела , то есть примерно в то же время, когда появляются симптомы. Современные знания предполагают, что после заражения человека вирусом его иммунная система предотвратит заражение тем же вирусом в будущем.
Этот тест ИФА на антитела предоставляет очень важную информацию для диагностики, лечения и выздоровления от COVID-19 , а также поможет исследователям оценить, сколько людей в популяции были инфицированы, что важно для планирования инфекционного контроля.

Что означает результат?
Тест на антитела с использованием ИФА покажет положительный результат (изменение цвета), если у пациента есть антитела к COVID-19 . Это может означать не то, что у них в настоящее время есть вирус, а только то, что он был у них в какой-то момент. Это связано с тем, что антитела остаются в крови даже после того, как инфекция прошла, чтобы помочь обеспечить организм иммунитетом, если они снова вступят в контакт с вирусом.
Отрицательный результат (без изменения цвета) будет означать, что пациент не инфицирован COVID-19 и может не иметь иммунитета против него.

ELISA Тесты на антиген могут быть разработаны в будущем для выявления текущих инфекций. Такой тест на антиген с использованием ИФА покажет положительный результат (изменение цвета), если у пациента в крови COVID-19 . Это будет означать, что пациент в настоящее время инфицирован COVID-19 . Отрицательный результат (без изменения цвета) будет означать, что нет 9В образце пациента обнаружено 0055 COVID-19 антигенов . Это может означать, что у пациента нет COVID-19 , но также может означать, что он слишком рано заразился, чтобы быть положительным. Если у них есть симптомы COVID-19 , они должны пройти повторное тестирование через несколько дней, чтобы убедиться.

Преимущества и ограничения

Преимущества:

  • ELISA — простой и дешевый лабораторный метод.
  • ELISA хорошо зарекомендовал себя и задокументирован в науке и медицине.
  • Обычно результаты можно получить в течение 1–3 часов после взятия пробы пациента.
  • Благодаря тому, что это так быстро выполняется, это можно сделать в лаборатории больницы, что сокращает время постановки диагноза.
  • Тестирование ИФА
  • можно проводить одновременно на нескольких образцах, поэтому его можно использовать для быстрого тестирования, масштабируемого для тестирования большего числа пациентов.

Недостатки:

  • Тесты ELISA еще недостаточно хорошо зарекомендовали себя для тестирования SARS-CoV-2 COVID-19 , хотя многие компании усердно работают над их производством и тестированием на пациентах.

Дополнительная информация
Пожалуйста, перейдите по ссылкам ниже для получения дополнительной информации о технологии ELISA.

В Википедии есть хороший обзор основных доступных типов ИФА (ссылка на Википедию):
https://en.wikipedia.org/wiki/ELISA

Резюме научного видео об ИФА (2-минутное видео):
https://www.youtube.com/watch?v=70TPrfL_8-M

Краткая научная статья о тестировании на коронавирус с упоминанием тестов ИФА:
https: //www.sciencemag.org/news/2020/03/new-blood-tests-antibodies-could-show-true-scale-coronavirus-pandemic

ВЫВОДЫ

 

2011-2017 © МБУЗ ГКП №  7, г.Челябинск.