Размер шрифта
Цвета сайта
Изображения

Поиск

Обычная версия сайта

Home » Misc » Анализ на тромбоциты

Анализ на тромбоциты


Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)

Метод определения Метод Фонио (микроскопия окрашенного мазка).

Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА)

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация

Синонимы: Анализ крови на тромбоциты; Тромбоциты, микроскопия (метод Фонио). 

Manual Platelet Count (PLT count): Indirect Method by Fonio.

Краткое описание исследования «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)»

Тромбоциты – мелкие безъядерные клетки, образуются в костном мозге, способны к агрегации (соединению друг с другом) и адгезии (прилипанию к поврежденной сосудистой стенке. Свойства тромбоцитов позволяют образовывать временный сгусток и обеспечивать остановку кровотечения в мелких сосудах (тромбоцитарно-сосудистый гемостаз). В своих гранулах и на поверхности содержат многие активные вещества и некоторые факторы свертывания, поступающие в кровь при активации тромбоцитов и участвующие в механизмах свертывания крови.

Исследование количества тромбоцитов используют для оценки их продукции в диагностике и прогнозе кровотечений, диссеминированного внутрисосудистого свертывания, лейкемии, диагностике и мониторинге тромбоцитозов и тромбоцитопений, контроле ответа на переливание тромбоцитарной массы, стероидную терапию и пр., при контроле химиотерапии или лучевой терапии, в скрининговых обследованиях. Клинические признаки снижения количества тромбоцитов – тромбоцитопении (повышенная склонность к внутрикожным кровоизлияниям, кровоточивость десен, меноррагии и т. п.) – обычно имеют место в случае, когда количество тромбоцитов снижается ниже 50 х 103 клеток/мкл.

С какой целью выполняют исследование «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)»

Исследование применяют с целью диагностики полицитемий, тромбоцитопений, тромбоцитозов, для мониторинга терапии, для контроля уровня тромбоцитов при приеме ряда лекарственных препаратов.

Особенности теста «Тромбоциты, микроскопия (подсчет в окрашенном мазке по методу Фонио)»

Подсчет тромбоцитов входит в состав общего анализа крови и обычно проводится с помощью гематологического анализатора импедансным методом (см. тест № 5). В лаборатории Инвитро при всех результатах автоматического определения тромбоцитов менее 130х103 клеток/мкл и более 550х103 клеток/мкл врач дополнительно проводит микроскопию окрашенного мазка крови с подсчетом количества тромбоцитов по методу Фонио. При некоторых клинических состояниях (в том числе при выраженных тромбоцитопениях и тромбоцитозах, при мониторинге терапии) может быть целесообразным подсчет количества тромбоцитов по методу Фонио вне зависимости от концентрации тромбоцитов. Данное исследование решает эту задачу. 

При автоматизированном подсчете количества тромбоцитов в случае их агрегации (связанной, например, с активацией тромбоцитов при проблемном взятии крови), анализатор не распознает соединенные в крупные комплексы клетки и может выдать ложно заниженное количество тромбоцитов. Результат, полученный с прибора в случае существенно заниженного или завышенного количества тромбоцитов, проверяет врач путем микроскопии окрашенного мазка крови. При этом возможен подтверждающий комментарий: «Проверено по мазку», либо: «Тромбоциты в агрегатах, рекомендуется повторить исследование!».

Тромбоциты в крови - какие анализы сдавать?

Версия для печати

 

Прогностический показатель развития тромботических осложнений или геморрагического синдрома.

Тромбоциты образуются в костном мозге из мегакариоцитов, примерно две трети периферического пула находится постоянно в системе циркуляции, одна треть - в селезенке. Физиологические колебания количества тромбоцитов в крови в течение суток составляют до 10%. У женщин во время менструации количество тромбоцитов может уменьшиться на 25-50%.

Тромбоциты обеспечивают нормальную проницаемость и резистентность стенок микрососудов (ангиотрофическая функция), образуют тромбоцитарную пробку за счет способности к адгезии (адгезивно-агрегационная функция).

Повышение количества тромбоцитов в крови (тромбоцитоз) может быть первичным (результат первичной пролиферации мегакариоцитов) и вторичным, реактивным, возникающим на фоне какого-либо заболевания. 9/л

15-30 дн. мужчина 248-586 женщина 279-571 31-60 дн. мужчина 229-562 женщина 331-597 61-180 дн. мужчина 244-529 женщина 247-580 6мес.-<2лет мужчина 206-445 женщина 214-459 2-< 6 лет мужчина 202-403 женщина 189-394 6-< 12 лет мужчина 206-369 женщина 199-367 12-<18 лет мужчина 175-332 женщина 194-345 ≥18 лет мужчина 187-381 женщина 179-403
Повышение значений (тромбоцитоз) Понижение значений (тромбоцитопения)
  • Острая кровопотеря и острый гемолиз
  • Спленэктомия
  • Послеоперационный период
  • Злокачественные новообразования
  • Ревматоидный артрит
  • Туберкулез
  • Язвенный колит
  • Остеомиелит
  • Миелопролиферативные заболевания
  • Лейкозы
  • Метастазы рака в костный мозг
  • Дефицит В12 и фолиевой кислоты
  • Вирусные инфекции
  • Ауто- и иммунные гемолитические анемии
  • Лимфопролиферативные заболевания
  • Системная красная волчанка
  • Протезирование клапанов сердца
  • Портальная гипертензия

О возможных противопоказаниях необходимо проконсультироваться со специалистом

Функциональные тесты тромбоцитов — Testing.

com

Что тестируется?

Тромбоциты (также известные как тромбоциты) представляют собой небольшие круглые клеточные фрагменты, необходимые для нормального свертывания крови. Функциональные тесты тромбоцитов косвенно оценивают, насколько хорошо тромбоциты человека помогают остановить кровотечение в организме.

Тромбоциты образуются в костном мозге и циркулируют в крови. Когда происходит повреждение кровеносного сосуда и начинается кровотечение, первыми элементами, помогающими остановить кровотечение, являются тромбоциты. Они делают это тремя способами. Они:

  • Приклеить к месту повреждения
  • Слипаются (агрегируют) с другими тромбоцитами, образуя временную пробку
  • Высвобождение соединений, которые стимулируют дальнейшую агрегацию и возможное образование тромба

Эти реакции приводят к образованию рыхлой тромбоцитарной пробки в процессе, называемом первичным гемостазом. В то же время активированные тромбоциты поддерживают каскад коагуляции, серию шагов, которые включают последовательную активацию белков, называемых факторами свертывания крови. Это называется вторичным гемостазом, и два процесса приводят к образованию стабильного сгустка, который остается на месте до тех пор, пока травма не заживет.

Если тромбоцитов недостаточно или если они не функционируют нормально ни по одному из трех основных способов, стабильный сгусток может не образовываться, и у человека может быть повышенный риск чрезмерного кровотечения. Количество тромбоцитов в крови можно определить с помощью подсчета тромбоцитов, что может помочь в диагностике заболеваний, связанных со слишком большим или слишком малым количеством тромбоцитов. Однако общую способность тромбоцитов правильно функционировать в организме труднее измерить.

Функциональные тесты тромбоцитов представляют собой группу анализов, в которых используется специальное оборудование для измерения способности тромбоцитов к агрегации и стимулированию свертывания в образце крови. Существует множество доступных тестов, но ни один из них не выявляет все проблемы с функцией тромбоцитов. Кроме того, нет общепринятого мнения о том, какой тест (ы) лучше всего подходит для каждого случая.

В дополнение к оценке людей на наличие чрезмерного кровотечения, тесты функции тромбоцитов могут использоваться в других ситуациях. Существуют ситуации, в которых желательно уменьшить способность тромбоцитов к агрегации, например, у людей с повышенным риском образования опасного тромба или с повышенным риском сердечных приступов. Этим людям могут быть назначены лекарства, которые снижают активацию тромбоцитов или снижают их способность к агрегации. Людям, принимающим антитромбоцитарные препараты, такие как низкие дозы аспирина или клопидогреля, могут быть назначены тесты функции тромбоцитов для контроля их лечения. Однако в настоящее время среди медицинских экспертов нет единого мнения о полезности функциональных тестов тромбоцитов в антитромбоцитарной терапии.

Скрининговые тесты

Время кровотечения
В прошлом первичным скринингом дисфункции тромбоцитов было время кровотечения или стандартизированное время кровотечения. Это был единственный тест, который напрямую измерял функцию тромбоцитов в организме. Он включает в себя выполнение двух небольших неглубоких стандартных надрезов на внутренней стороне предплечья и измерение времени, в течение которого кровотечение остановится. В последние годы процедура определения времени кровотечения потеряла популярность. Многие больницы больше не предлагают его, и несколько национальных организаций выступили с заявлениями против его рутинного использования. Время кровотечения не является чувствительным или специфичным и не обязательно отражает риск или тяжесть хирургического кровотечения. Он плохо воспроизводим, на него может повлиять прием аспирина и мастерство человека, проводящего тест, и он часто оставляет небольшие тонкие шрамы на предплечье.

Определение времени закрытия
Этот тест измеряет время, необходимое тромбоцитам в образце крови, чтобы закупорить небольшое отверстие в крошечной трубке после воздействия различных активирующих веществ. Это называется временем закрытия. Длительное время закрытия указывает на снижение функции тромбоцитов, но не определяет причину. Этот тест может быть ненормальным, если количество тромбоцитов низкое, если функция тромбоцитов снижена, если снижены другие белки, необходимые для функции тромбоцитов, или если присутствуют антитромбоцитарные препараты. Этот тип анализа можно использовать для скрининга болезни фон Виллебранда и некоторых нарушений функции тромбоцитов, но он не выявляет все нарушения функции тромбоцитов, особенно легкие формы. Этот тест относительно прост в выполнении и доступен во многих медицинских учреждениях. Необходимо будет провести дополнительное тестирование, чтобы определить точную причину любых аномальных результатов.

Вискоэластометрия (или тромбоэластометрия)
Сгустки крови должны быть прочными, чтобы остановить кровотечение и предотвратить новое кровотечение, пока не произойдет заживление. Этот тип тестирования предназначен для определения прочности сгустка крови по мере его образования. Чаще всего его проводят в крупных больницах либо в операционной в качестве теста по месту оказания медицинской помощи, либо в клинической лаборатории.

Конечная точка гранул или конечная точка агрегации тромбоцитов
Эти тесты определяют количество шариков или тромбоцитов с покрытием, которые агрегируют после добавления веществ для активации тромбоцитов в образце крови. Они обеспечивают единую меру агрегации (конечную точку), а не меру агрегации во времени. Большее количество тромбоцитов, агрегирующих или прилипающих к гранулам, указывает на лучшую функцию тромбоцитов. Эти тесты могут быть ненормальными, если количество тромбоцитов низкое, если функция тромбоцитов снижена или если присутствуют антитромбоцитарные препараты.

Соотношение числа тромбоцитов
Количество тромбоцитов измеряют в исходном образце. В образец добавляют вещество, чтобы активировать тромбоциты и вызвать их агрегацию. Повторно измеряется количество тромбоцитов – второй раз учитываются только те, которые не агрегировали. Разница между первым измерением и вторым измерением является показателем функции тромбоцитов.

Диагностические тесты

Агрегометрия тромбоцитов
Многие различные вещества могут активировать тромбоциты, в том числе белки в ране, факторы, высвобождаемые из других активированных тромбоцитов, и факторы, вырабатываемые системой свертывания, которая помогает тромбоцитам формировать прочную пробку для остановки кровотечения. Описано множество различных аномалий тромбоцитов из-за проблем с одной или несколькими из этих систем активации. Агрегометрия тромбоцитов состоит из 4-8 отдельных тестов. В каждом тесте в кровь добавляют другое вещество, активирующее тромбоциты (агонист), с последующим измерением агрегации тромбоцитов в течение нескольких минут. По завершении вся группа тестов анализируется и интерпретируется, чтобы определить, есть ли какие-либо признаки аномальной функции тромбоцитов. Тестирование агрегации тромбоцитов является золотым стандартом в тестировании функции тромбоцитов и может диагностировать различные наследственные и приобретенные нарушения функции тромбоцитов. Обычно его проводят в академических медицинских центрах или крупных больницах из-за сложности тестирования и интерпретации.

Люмиагрегометрия
Подобно агрегометрии тромбоцитов, люмиагрегометрия одновременно измеряет высвобождение определенных органических веществ из гранул тромбоцитов (маленьких мешочков внутри тромбоцитов) с использованием метода люминесценции. Этот метод измеряет количество света, излучаемого при добавлении активирующих веществ, что приводит к превращению АДФ (аденозиндифосфат) в АТФ (аденозинтрифосфат). Это измерение отражает любые аномалии, которые могут присутствовать в гранулах тромбоцитов, что является проблемой у пациентов с «дефектами депонирующего пула», которые часто наблюдаются при синдромах серых тромбоцитов, синдромах Германски-Пудлака и синдромах Чедиака-Хигаси.

Проточная цитометрия
Тромбоциты можно оценить на функциональные дефекты с помощью проточной цитометрии. В этом тесте используются лазеры для определения белков, присутствующих на поверхности тромбоцитов, и их изменения при активации тромбоцитов. Проточная цитометрия тромбоцитов является узкоспециализированной процедурой, доступной только в нескольких университетских больницах и референс-лабораториях для диагностики наследственных нарушений функции тромбоцитов.

Как отбирают пробу для тестирования?

Образец крови берется иглой из вены на руке. В связи с критическими временными ограничениями, связанными с активацией/функцией тромбоцитов, вас могут направить непосредственно в лабораторию, выполняющую анализы. Если у вас в анамнезе было чрезмерное кровотечение, вы должны сообщить об этом лечащему врачу, сдавшему кровь.

Требуется ли какая-либо подготовка к анализу для обеспечения качества образца?

Как правило, подготовка к анализу не требуется. Однако вам может быть рекомендовано воздержаться от приема препаратов, которые могут повлиять на результаты этих тестов, таких как аспирин, нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) или любые безрецептурные препараты, содержащие подобные препараты. Наиболее распространенные НПВП включают ибупрофен, напроксен и ингибиторы ЦОГ-2. (Дополнительную информацию о лекарствах, их ингредиентах и ​​торговых марках см. в разделе Медикаменты и добавки MedlinePlus.) Тем не менее, не прекращайте прием лекарств, если это не рекомендовано вашим лечащим врачом.

Общие вопросы

Как используется тест?

Различные функциональные тесты тромбоцитов используются для оценки способности тромбоцитов слипаться и образовывать сгусток. Они могут использоваться по разным причинам. Примеры некоторых ситуаций, в которых они могут быть использованы, включают:

  • Для выявления и помощи в диагностике дисфункции тромбоцитов у лиц с обильным кровотечением в анамнезе. Именно в этой области наиболее часто используются функциональные тесты тромбоцитов. Их можно использовать для скрининга дисфункции и, наряду с другими тестами на нарушение свертываемости крови, для диагностики врожденных и приобретенных дисфункций тромбоцитов. Болезнь фон Виллебранда, например, является наиболее распространенным наследственным заболеванием, связанным с дисфункцией тромбоцитов. Снижение выработки или дисфункция фактора фон Виллебранда (ФВ) приводит к уменьшению адгезии тромбоцитов к поврежденному кровеносному сосуду и увеличению кровопотери.
  • Для мониторинга функции тромбоцитов во время сложных хирургических вмешательств, включая операции по искусственному кровообращению, катетеризации сердца, трансплантации печени и травмам. Например, тем, кто перенес операцию по искусственному кровообращению, назначают антикоагулянты для снижения свертываемости крови, что приводит к повышенному риску чрезмерного кровотечения. В то же время обход сердца и механическая циркуляция крови активируют большое количество тромбоцитов и вызывают их дисфункцию. Мониторинг количества тромбоцитов в крови (количество тромбоцитов) во время операции на сердце также помогает практикующим врачам поддерживать тонкий баланс между кровотечением и свертыванием крови.
  • Для скрининга предоперационных пациентов из группы риска , у которых в личном или семейном анамнезе есть кровотечения. Медицинские работники в настоящее время оценивают человека на наличие известных факторов риска и полагаются на историю болезни человека и результаты других тестов на коагуляцию, таких как ПВ и АЧТВ, для определения общего риска чрезмерного кровотечения. Не существует единого скринингового теста на функцию тромбоцитов, который бы точно предсказал, у каких людей может возникнуть кровотечение во время операции. Интересно, что исследования показали, что функциональные тесты тромбоцитов бесполезны для прогнозирования риска кровотечения у людей, принимающих антитромбоцитарные препараты, такие как аспирин, клопидогрель или нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП).
  • Для контроля за антитромбоцитарной терапией , назначаемой некоторым людям после инсульта или сердечного приступа для подавления свертывания крови. В настоящее время большинство антитромбоцитарных препаратов не рутинно контролируются с помощью тестирования функции тромбоцитов. Ожидается, что по мере создания большего количества антитромбоцитарных препаратов будут разработаны дополнительные методы для их мониторинга.
  • Для выявления устойчивости к аспирину . Низкие дозы аспирина назначают в качестве антитромбоцитарной терапии многим людям, перенесшим сердечно-сосудистые заболевания, такие как сердечный приступ или инсульт. Считается, что у некоторых людей, проходящих эту терапию, у которых случился повторный сердечный приступ, есть резистентность к аспирину. В настоящее время резистентность к аспирину является несколько расплывчатым термином, и нет единого мнения относительно его определения, количества людей, страдающих от него, или способов его измерения. Возникают вопросы относительно того, может ли тестирование предсказать, что произойдет с отдельным человеком, будет ли резистентность сохраняться или будет временной, и связана ли она также с резистентностью к другим антитромбоцитарным препаратам, таким как клопидогрел. Хотя эти тесты становятся все более доступными и простыми в проведении, до сих пор нет единого мнения о том, как изменить терапию на основе результатов. Большинство согласны с тем, что предстоит еще много работы по определению его клинической значимости.

Тестирование функции тромбоцитов может включать одно или несколько из следующего:

  • Анализ времени закрытия
  • Вискоэластометрия
  • Время кровотечения
  • Агрегометрия тромбоцитов/люмиагрегометрия
  • Проточная цитометрия

Некоторые другие тесты, которые могут проводиться в сочетании с тестами функции тромбоцитов или в качестве последующих тестов для оценки нарушений тромбоцитов, включают общий анализ крови (CBC), количество тромбоцитов, PT, PTT, D-димер и фактор фон Виллебранда (vWF). .

Когда он заказан?

Один или несколько тестов функции тромбоцитов назначаются всякий раз, когда практикующий врач хочет оценить функцию тромбоцитов. Это может быть:

  • Когда у человека наблюдаются симптомы дисфункции тромбоцитов, такие как чрезмерное кровотечение; к ним относятся легкие кровоподтеки, частые кровотечения из носа, обильные менструальные кровотечения, кровоточивость десен, чрезмерное кровотечение во время стоматологических процедур и т. д.
  • Перед операцией или другой инвазивной процедурой
  • Во время операции, особенно длительной
  • Когда человек принимает лекарство, которое может влиять на функцию тромбоцитов

Что означает результат теста?

Интерпретация результатов различных типов тестов функции тромбоцитов зависит от того, почему тесты были выполнены.

При расследовании обильного кровотечения или возможности кровотечения во время операции аномальные результаты могут указывать на наличие нарушения тромбоцитов. Тестирование на недостаточность или аномалии факторов свертывания крови (тесты на нарушение свертываемости крови) в дополнение к клинической оценке часто необходимо для выявления наследственного заболевания или приобретенного состояния как причины дисфункции. Часто могут потребоваться семейные исследования, чтобы определить, является ли аномалия наследственной или приобретенной.

Примеры наследственных нарушений функции тромбоцитов включают:

  • Болезнь фон Виллебранда – снижение выработки или дисфункция фактора фон Виллебранда приводит к снижению адгезии тромбоцитов к поврежденному кровеносному сосуду и увеличению кровопотери
  • Тромбастения Гланцмана – влияет на способность тромбоцитов к агрегации
  • Синдром Бернара-Сулье – характеризуется снижением адгезии тромбоцитов
  • Болезнь депо – может повлиять на способность тромбоцитов высвобождать вещества, способствующие агрегации

Приобретенная дисфункция тромбоцитов – те, которые не передаются по наследству – могут быть вызваны хроническими состояниями, такими как:

  • Почечная недостаточность (уремия)
  • Миелодиспластический синдром (МДС)
  • Определенные лейкозы (хронический миелоидный лейкоз или ХМЛ; острый миелоидный лейкоз или ОМЛ)

Некоторые приобретенные нарушения тромбоцитов, носящие временный характер, включают:

  • Снижение функции вследствие приема таких лекарств, как аспирин и нестероидные противовоспалительные препараты
  • Аномальная функция после длительной операции по шунтированию сердца

Когда человек принимает антитромбоцитарные препараты, такие как аспирин, результаты тестирования отражают реакцию тромбоцитов на препарат.

Есть что-нибудь еще, что я должен знать?

Тестирование функции тромбоцитов не является точным отражением процесса свертывания крови в организме ( in vivo ). У человека с нормальными результатами функционального теста тромбоцитов во время и после операции может наблюдаться обильное кровотечение или несоответствующее свертывание крови.

Большинство образцов для тестирования функции тромбоцитов стабильны только в течение очень короткого периода времени. Выбор тестов часто ограничен тем, что доступно на местном уровне.

Существует несколько препаратов, которые могут повлиять на результаты тестов функции тромбоцитов. Некоторые из них включают:

  • Аспирин и аспиринсодержащие соединения (салицилаты)
  • Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП), такие как ибупрофен, и любые безрецептурные препараты, содержащие НПВП
  • Трициклические антидепрессанты
  • Антигистаминные препараты
  • Некоторые антибиотики
  • Некоторые добавки (включая чеснок, куркуму, тмин, гингко билоба)

Должен ли каждый проходить тесты на функцию тромбоцитов?

Многим людям никогда не понадобится тестирование функции тромбоцитов. Как правило, это показано только при кровотечении, приеме определенных лекарств или проведении определенных операций. Тесты не показаны для общего скрининга.

Может ли мой лечащий врач выбрать один из множества тестов функции тромбоцитов?

Как правило, больница или лаборатория предлагают один или несколько тестов, но не широкий выбор. Поскольку образец должен быть протестирован незамедлительно, ваш лечащий врач выберет из того, что есть в наличии. В редких случаях, если практикующий врач хочет провести определенный тип теста, вам может потребоваться обратиться в клинику, больницу или другой город, где проводится этот тест.

Изменится ли функция тромбоцитов со временем?

Можно. В то время как некоторые состояния, связанные с дисфункцией тромбоцитов, передаются по наследству, другие приобретаются и могут возникнуть в любой момент вашей жизни. Дисфункция тромбоцитов, вызванная хроническим заболеванием, может сохраняться, но, как правило, поддается лечению. Дисфункция, вызванная лекарствами, обычно проходит после прекращения приема лекарств.

  • Подсчет тромбоцитов (PLT) Анализ крови Узнать больше
  • Общий анализ крови (общий анализ крови) Узнать больше
  • Мазок крови Узнать больше
  • Тест ПВ/МНО (протромбиновое время и международное нормализованное отношение) Узнать больше
  • Анализ крови АЧТВ (частичное тромбопластиновое время) Узнать больше
  • Фактор фон Виллебранда Узнать больше
  • Клопидогрел (генотипирование CYP2C19) Узнать больше
  • Ассоциация поддержки нарушений тромбоцитов Узнать больше
  • Тромбоциты в Интернете: Тромбоциты Узнать больше
  • MedlinePlus: Заболевания тромбоцитов Узнать больше
  • Национальный институт сердца, легких и крови: тромбоцитемия и тромбоцитоз Узнать больше
  • Национальный институт сердца, легких и крови: тромбоцитопения Узнать больше

Источники

Источники, использованные в текущем обзоре

Обзор 2017 г. , выполненный Николь Зиглер, MT (ASCP) и Редакционно-ревизионным советом.

Kottke-Marchant, Kandice (© 2016) Алгоритмический подход к тестированию гемостаза Второе издание: Издательство Колледжа американских патологов (CAP), Нортфилд, Иллинойс. стр. 17-32, 99-120

Чендлер, В.Л. Экстренная оценка гемостаза у кровоточащего больного. Int J Lab Hematol . 2013; 35:339-343. Доступно в Интернете по адресу https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ijlh.12071/pdf. По состоянию на 27.04.17 По состоянию на 02.06.2017.

Харрисон П. и Лордкипанидзе М. Проверка функции тромбоцитов. Hematol Onc Clin N Am . 2013; 27:411-441.

Breet NJ, van Werkum, JW, Bouman HJ, et al. Сравнение шести основных функциональных тестов тромбоцитов для прогнозирования клинического исхода у пациентов, перенесших имплантацию коронарного стента. ЯМА 2010; 303(8): 849-56. Доступно в Интернете по адресу https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20179285. Резюме по состоянию на 02. 06.2017.

Breet NJ, van Werkum JW, Bouman HJ и др. Высокая реактивность тромбоцитов на аспирин, измеренная с помощью функциональных тестов тромбоцитов, основанных на агрегации, ингибировании циклооксигеназы-1, связана с возникновением атеротромботических событий. J Thromb Haemost 2010;8(10):2140-8. Доступно в Интернете по адресу https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1538-7836.2010.04017.x/abstract. Проверено 27.04.17.

Паничча Р., Приора Р., Алессандрелло А. и др. Функциональные тесты тромбоцитов: сравнительный обзор. Управление рисками для здоровья сосудов 2015; 11:133-148.

Источники, использованные в предыдущих обзорах

Томас, Клейтон Л., редактор (1997). Циклопедический медицинский словарь Т Абера. FA Davis Company, Филадельфия, Пенсильвания [18-е издание].

Пагана, Кэтлин Д. и Пагана, Тимоти Дж. (2001). Справочник по диагностическим и лабораторным тестам Mosby , 5-е издание: Mosby, Inc. , Сент-Луис, Миссури.

Время кровотечения. Библиотека медицинской информации AccessMed [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.hendrickhealth.org/healthy/000209.htm.

Эльстром, Р. (28 октября 2001 г., обновлено). Тест на агрегацию тромбоцитов. Медицинская информация MedlinePlus, Медицинская энциклопедия [он-лайн информация]. Доступно на сайте https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003669.htm.

Мента, С. (весна 1999 г.). Коагуляционный каскад. Оценка физиологических расстройств, Медицинский колледж Университета Флориды [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.medinfo.ufl.edu/year2/coag/title.html.

Анализатор функции тромбоцитов (PFA)-100 – Часто задаваемые вопросы. Онкологический институт больницы Флориды, клинические и исследовательские лаборатории [он-лайн информация]. Доступно на сайте https://www.fhci-labs.com/researchlabs/clinicallabs/hemostasisandthrombosis/faq/pfa-faq.htm.

Коттке-Марчант, К. и Аллер, Р. (январь 2003 г.). К многофункциональным анализаторам. Колледж американских патологоанатомов, январь 2003 г. Обзор инструментов [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.cap.org/apps/docs/cap_today/surveys/coagSurvIntro.html.

Коркоран Г. и Коттке-Марчант К. (июнь 2002 г.). В погоне за причинами нарушений тромбоцитов. Колледж американских патологоанатомов, очерк [Электронная статья]. Доступно в Интернете по адресу https://www.cap.org/apps/docs/cap_today/feature_stories/platelet_disorders_feature.html.

Что такое идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура? NHLBI, индекс заболеваний и состояний [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.nhlbi.nih.gov/health/dci/Diseases/Itp/ITP_WhatIs.html.

Что такое болезнь фон Виллебранда? NHLBI, индекс заболеваний и состояний [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.nhlbi.nih.gov/health/dci/Diseases/vWD/vWD_WhatIs.html.

Болезнь фон Виллебранда. NHF [Онлайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.hemophilia.org/bdi/bdi_types3.htm.

Гемостаз. Руководство Merck по диагностике и терапии [он-лайн информация]. Доступно на сайте https://www.merck.com/mrkshared/mmanual/section11/chapter131/131b.jsp.

Нарушения свертываемости крови. The Merck Manual of Medical Information-Home Edition, Раздел 14. Болезни крови, Глава 155 [Информация в режиме онлайн]. Доступно в Интернете по адресу https://www.merck.com/mrkshared/mmanual_home/sec14/155.jsp.

Кортезе Хассетт, А. (2002). Тестирование функции тромбоцитов. Новости трансфузионной медицины, Институт трансфузионной медицины, выпуск № 5 [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.itxm.org/TMU2002/Issue5.htm.

Ли, Д. (24 июля 2000 г.). Агрегометрия тромбоцитов. Стэнфордская интервенционная кардиология [он-лайн информация]. Ранее было доступно в Интернете по адресу https://cvmed.stanford.edu/interventional/aggregometry.htm.

Панели для тестирования коагуляции. Клинические и исследовательские лаборатории, Онкологический институт больницы Флориды [он-лайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.fhci-labs.com/researchlabs/clinicallabs/hemostasisandthrombosis/panels.htm.

Карвилл, Д. и Гайер, К. (сентябрь 2000 г.). Тестирование гемостаза: прошлое, настоящее и будущее. Журнал IVD Technology, ссылка на медицинское устройство [Электронная статья]. Доступно в Интернете по адресу https://www.devicelink.com/ivdt/archive/00/09/005.html.

Локк, Дж. (октябрь 2001 г.). Проблемы в тестировании функции тромбоцитов. Клинические лабораторные стратегии [он-лайн информационный бюллетень AACC]. Предварительную версию можно получить у Jalane по адресу [email protected]

Wuillemin, W., et.al. (2002). Оценка анализатора функции тромбоцитов (PFA-100Т) у больных со склонностью к кровотечениям. Swiss Med Wkly 132:443-448 [Электронный журнал]. PDF-файл доступен для загрузки по адресу https://www.smw.ch/pdf200x/2002/31/smw-10039. PDF.

SE Линд. Время кровотечения не позволяет прогнозировать хирургическое кровотечение. Кровь , июнь 1991 г .; 77: 2547 – 2552.

RPC РОДЖЕРС, Дж. ЛЕВИН и С.Э. ЛИНД. Bleeding Time Revisited Blood , май 1992 г .; 79: 2495 – 2497.

Hankey, G. and Eikelboom, J. (28 февраля 2004 г.) Устойчивость к аспирину. BMJ 2004;328:477-479 [Электронный журнал]. Доступно на сайте https://bmj.bmjjournals.com/cgi/content/full/328/7438/477.

Петерсон, П. (октябрь 2005 г.). Устойчивость к аспирину: правда и вымысел. Освещение конференции Medscape, основанное на избранных сессиях: Патология сегодня: Ежегодное собрание Американского общества клинической патологии 2005 г. [он-лайн CME / CMLE]. Доступно на сайте https://www.medscape.com/viewarticle/518858.

Эйкельбум, Дж. и др. др. (11 июля 2005 г.). Резистентность к аспирину и ее значение в клинической практике. Medscape General Medicine 2005;7(3):76 [он-лайн информация]. Доступно на сайте https://www. medscape.com/viewarticle/506101.

(3 сентября 2004 г.). Accumetrics VerifyNow-Aspirin Assay (ранее Ultegra RPFA-ASA). Резюме FDA 510(k) [он-лайн информация]. PDF-файл доступен для загрузки по адресу https://www.fda.gov/cdrh/pdf4/k042423.pdf.

Пагана, К. Д. и Пагана, Т. Дж. (© 2007). Справочник по диагностическим и лабораторным тестам Mosby , 8-е издание: Mosby, Inc., Сент-Луис, Миссури. стр. 169-171, 728-729.

Clarke, W. and Dufour, D.R., Editors (© 2006). Современная практика клинической химии 900:30: AACC Press, Вашингтон, округ Колумбия. стр. 235-237.

Ву, А. (© 2006). Клиническое руководство Tietz по лабораторным исследованиям , 4-е издание: Saunders Elsevier, Сент-Луис, Миссури. стр. 862-867.

Дагдейл Д. и Чен Ю. (обновлено 2 марта 2009 г.). Тест на агрегацию тромбоцитов. Медицинская энциклопедия MedlinePlus [он-лайн информация]. Доступно на сайте https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003669.htm. По состоянию на сентябрь 2009 г.

(обновлено в декабре 2008 г.). Функциональные нарушения тромбоцитов. ARUP Consult [Онлайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.arupconsult.com/Topics/FxPlateletDisorders.html#. По состоянию на сентябрь 2009 г..

Анг Л. и Махмуд Э. (15 января 2009 г.). Мониторинг пероральной антитромбоцитарной терапии: оправдано ли это? Medscape из Терапевтические достижения в сердечно-сосудистых заболеваниях . [Онлайн информация]. Доступно на сайте https://www.medscape.com/viewarticle/584888. По состоянию на сентябрь 2009 г.

Gurbel, P. et. др. (2007 05 ноября). Мониторинг функции тромбоцитов у пациентов с ишемической болезнью сердца. Medscape из журнала Американского журнала кардиологии . [Онлайн информация]. Доступно в Интернете по адресу https://www.medscape.com/viewarticle/5649.63. По состоянию на сентябрь 2009 г.

Хьюз, С. (28 марта 2009 г.). ACC 2009: Растущие данные в пользу персонализированной антитромбоцитарной терапии. Medscape от Heartwire [Он-лайн информация]. Доступно на сайте https://www.medscape.com/viewarticle/5. По состоянию на сентябрь 2009 г.

Стасик, К. (1 августа 2006 г.). Принципы, показания и ограничения анализатора функции тромбоцитов. CAP NewsPath [он-лайн информация]. Доступно в Интернете через https://www.cap.org. По состоянию на сентябрь 2009 г..

Генри Клиническая диагностика и лечение с помощью лабораторных методов . 21-е изд. Макферсон Р.А. и Пинкус М.Р., ред. Филадельфия: 2007 г., стр. 757–765.

(опубликовано 17 января 2008 г.) Krasopoulos G, «Устойчивость» к аспирину и риск сердечно-сосудистых заболеваний: систематический обзор и метаанализ. BMJ , doi: 10.1136/bmj.39430.529549.BE, доступно в Интернете по адресу https://www.bmj.com/cgi/content/full/bmj.39430.529549.BEv1. По состоянию на сентябрь 2009 г.

Harrison’s Principles of Internal Medicine . 16-е изд. Каспер Д., Браунвальд Э., Фаучи А., Хаузер С., Лонго Д., Джеймсон Дж. Л., ред. McGraw-Hill, 2005, стр. 676–678.

Генри Клиническая диагностика и лечение с помощью лабораторных методов. 22-е изд. Макферсон Р., Пинкус М., ред. Филадельфия, Пенсильвания: Saunders Elsevier: 2011, 805-816.

Клиническая гематология Уинтроба. 12-е изд. Грир Дж., Ферстер Дж., Роджерс Г., Параскевас Ф., Глэдер Б., Арбер Д., Минс Р., ред. Филадельфия, Пенсильвания: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс: 2009, стр. 1362-1363.

(© 2014) Нарушения функции тромбоцитов. Написано Дэвидом Пейджем, рецензировано Сарой Дж. Израэлс, доктором медицины FRCP(C). Канадское общество гемофилии. Доступно в Интернете по адресу https://www.hemophilia.ca/en/bleeding-disorders/platelet-function-disorders/introduction/. По состоянию на февраль 2014 г.

(28 августа 2012 г.) Сью Хьюз. Следует ли измерять функцию тромбоцитов? Новые данные. Медскейп Новости. Доступно на сайте https://www.medscape.com/viewarticle/769925. По состоянию на февраль 2014 г.

(8 октября 2013 г.) Майкл О’Риордан. Экспертная группа считает, что тестирование функции тромбоцитов может принести пользу некоторым пациентам с ЧКВ. Медскейп Новости. Доступно на сайте https://www.medscape.com/viewarticle/812254. По состоянию на февраль 2014 г.

Горелик П., Фарук М. Достижения в нашем понимании «резистентности» к антиагрегантам для профилактики ишемического инсульта. Лечение инсульта. 2013; 2013: 727842. Опубликовано в Интернете 14 июля 2013 г. по адресу https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3725785/. По состоянию на февраль 2014 г.

(7 декабря 2012 г.) Лиза Наингголан. Фармакологи ставят под сомнение резистентность к аспирину. Медскейп Новости. Доступно на сайте https://www.medscape.com/viewarticle/775844. По состоянию на февраль 2014 г.

Брэд С. Карон, доктор медицинских наук, и Элизабет Джабен, доктор медицинских наук. Функция тромбоцитов, лабораторные методы оценки эффективности антиагрегантной терапии. Новости клинической лаборатории Апрель 2011 г.: Том 37, номер 4. Доступно в Интернете по адресу https://www.aacc.org/publications/cln/2011/April/Pages/PlateletFunction. aspx#. По состоянию на февраль 2014 г.

Подробнее

См. меньше

Этот веб-сайт использует файлы cookie, чтобы обеспечить вам максимальное удобство на нашем веб-сайте.

I Accept

Высокопроизводительный анализ распространения тромбоцитов: инструмент для диагностики геморрагических нарушений, связанных с тромбоцитами

Гематологические. 2020 март; 105(3): e124–e128.

doi: 10.3324/haematol.2019.225912

, 1, * , 1, * , 1 , 1 , 1 , 1, 2 , 1 , 2 , 1, 2 и 1 , от имени исследований GAPP GAPP . состояний, представляющих уникальную диагностическую проблему. В то время как золотым стандартом анализа функции тромбоцитов является светопропускающая агрегометрия, дефекты тромбоцитов выявляются только примерно у 50% пациентов с клиническим анамнезом кровотечения, согласующимся с нарушением тромбоцитов. Мы протестировали когорту пациентов, включенных в исследование UK-GAPP (генотипирование и фенотипирование тромбоцитов) с подозрением на нарушение функции тромбоцитов, с помощью высокопроизводительного анализа распространения тромбоцитов. Мы обнаружили дефект распространения тромбоцитов у 32 из 55 протестированных пациентов (58%), и из них у 16 ​​были представлены нормальные результаты люмиагрегометрии, несмотря на значительную оценку инструмента оценки кровотечения (BAT). Кроме того, семья, идентифицированная с помощью этого подхода, впоследствии была идентифицирована как несущая редкий генетический вариант 9.0029 TUBB1 , ген, связанный с макротромбоцитопенией. Эта работа предполагает, что морфологические дефекты, обнаруженные с помощью метода распределения тромбоцитов с высоким содержанием, могут идентифицировать дисфункции тромбоцитов, не обнаруженные с помощью люмиагрегометрии.

Нарушения функции тромбоцитов представляют собой гетерогенную группу состояний, клиническая и лабораторная диагностика которых осложняется рядом сообщаемых симптомов кровотечения, а также функциональной избыточностью сигнальных путей тромбоцитов. Чтобы решить эту проблему, пациенты с подозрением на наследственные нарушения свертываемости крови часто набираются для тестирования функции тромбоцитов (PFT) после первоначальной оценки. 1 Основным соображением при разработке панели PFT является наилучшее использование ограниченного количества образцов. Несмотря на множество доступных PFT, дефект тромбоцитов не всегда выявляется у пациентов со значительным кровотечением в анамнезе. Действительно, у пациентов с характером кровотечения, согласующимся с нарушениями тромбоцитов, мы и другие находим дефект тромбоцитов только примерно у 50% пациентов. Чтобы устранить ограничения существующих подходов, в исследовании GAPP был выполнен ряд дополнительных PFT, включая агрегометрию импеданса (Multiplate ® ), агрегация тромбоцитов в 96 лунках, агрегация на коллагене при скорости артериального сдвига (1000 с -1 ) и анализ ретракции сгустка у подгруппы пациентов. 2 , 3 К сожалению, это использование нескольких PFT не увеличило число пациентов с выявленным нарушением функции тромбоцитов. Здесь мы исследовали высокопроизводительный анализ тромбоцитов, нанесенных на фибриноген, для изучения морфологических дефектов и дефектов тромбоцитов.

Полные методы представлены в Онлайн-приложение . Вкратце, в исследование GAPP включали пациентов с кровотечением неизвестной причины. 4 Периферическую кровь, собранную у пациентов и здоровых добровольцев, использовали для получения богатой тромбоцитами плазмы для люмиагрегометрии и отмытых тромбоцитов в концентрации 2×10 7 /мл для нанесения на покровные стекла, покрытые фибриногеном. Растекающиеся образцы инкубировали в течение 45 мин перед фиксацией, иммуноокрашиванием и флуоресцентной микроскопией. Захваченные изображения были подвергнуты полуавтоматическому конвейеру анализа изображений с использованием программных платформ с открытым исходным кодом KNIME и Ilastik. Это произвело сегментацию тромбоцитов и соответствующие измерения площади и округлости. 5 , 6

Пациенты были набраны с различными симптомами кровотечения, соответствующими дефекту тромбоцитов (n=55). Шкала Международного общества тромбоза и гемостаза (ISTH)-BAT использовалась для количественной оценки истории кровотечений пациентов; баллы были доступны для 40 человек, за исключением педиатрических пациентов. Общий средний балл BAT составил 9,825 (диапазон от 2 до 23), при этом баллы ≥4 считались показателем чрезмерного кровотечения. 7

Люмиагрегометрию проводили, как описано ранее. 8 , 9 На основании этого дефекты тромбоцитов в когорте были разделены на шесть категорий; Дефицит циклооксигеназы (ЦОГ) (n=4), дефект передачи сигнала Gi-рецептора (n=4), дефект секреции (n=8), тромбоцитопения (n=8), множественные дефекты (n=5) и отсутствие дефектов (n=26) ) (). При наборе образцы тромбоцитов от больных также подвергали намазыванию на фибриноген. Образцы фиксировали и окрашивали фаллоидином, чтобы просто и точно очертить морфологию клеток с высоким соотношением сигнал/шум, необходимым для надежной высокопроизводительной визуализации и анализа. Крупномасштабный набор данных был создан путем взятия шести полей зрения из репрезентативной области каждого слайда. Для создания контрольного набора данных тромбоциты пяти здоровых добровольцев обрабатывали одинаково. Изображения, полученные в результате этих анализов, были подвергнуты полуавтоматическому рабочему процессу сегментации для измерения площади и округлости для каждого тромбоцита, которые были нанесены на график с медианой набора данных (). Измерения площади и округлости у пяти репрезентативных здоровых контролей использовались для определения нормальных диапазонов. Данные пациентов, выходящие за пределы этих диапазонов, были определены как указывающие на потенциальный дефект.

Таблица 1

Фенотипы всех пациентов, включенных в исследование GAPP, которые были включены в исследования распространения тромбоцитов.

Открыть в отдельном окне

Открыть в отдельном окне

Высокопроизводительное измерение площади и округлости тромбоцитов. Измерения площади и округлости были получены с использованием полуавтоматического рабочего процесса анализа изображений, а аномалии были идентифицированы путем сравнения с контрольным диапазоном, установленным путем распространения данных от здоровых добровольцев (красный прямоугольник) (n = 5). Образцы пациентов с медианами и доверительными интервалами за пределами контрольного диапазона были классифицированы как положительные совпадения (синие прямоугольники) либо для дефекта площади тромбоцитов, либо для округлости, в то время как образцы, которые вышли за пределы обоих нормальных диапазонов, были классифицированы как двойные положительные результаты (оранжевые прямоугольники). .

В целом, аномальные морфологии распространения были обнаружены у 32 из 55 протестированных пациентов (58%). Это включало пациентов с дефектами только в области тромбоцитов (n = 6), только округлостью тромбоцитов (n = 13), как площадью, так и округлостью (n = 13) или отсутствием дефекта (n = 23) (). Аномальная площадь и округлость согласуются с округлыми, нераспространенными тромбоцитами, и такие двойные положительные совпадения считались надежным показателем морфологических дефектов распространения. После выявления потенциального дефекта распространения тромбоцитов образцы коррелировали с имеющимися PFT и клиническими данными, чтобы установить, предсказывают ли аномалии распространения дисфункцию тромбоцитов.

В целом дефекты распространения были обнаружены у девяти пациентов, у которых также был дефект агрегации (Gi=3, секреция=5, ЦОГ=1). Интересно, что у 16 ​​из 32 пациентов (50%), у которых были выявлены дефекты распространения, не было выявлено функциональной аномалии при люмиагрегометрии, что свидетельствует о выявлении дополнительных дефектов тромбоцитов с помощью этого анализа распространения (16). Кроме того, эти 16 пациентов имели значительный балл BAT (средний балл BAT = 11). Репрезентативные изображения иммунофлуоресценции и сегментации для площади (пациенты 2 и 4), округлости (пациенты 23 и 24.1) или обоих дефектов (пациенты 41.1 и 41.2) показаны на рис. Из десяти двойных положительных результатов распространения тромбоцитов с доступной оценкой ISTH-BAT восемь (80%) продемонстрировали значительную оценку кровотечения (медиана BAT = 11). В совокупности эти данные подтверждают, что высокопроизводительный анализ распространения может дополнять данные, полученные с помощью люмиагрегометрии, как за счет подтверждения дефектов агрегации, так и за счет выделения морфологических аномалий, не обнаруживаемых с помощью «золотого стандарта» у пациентов с чрезмерным кровотечением.

Открыть в отдельном окне

Распределение дефектов растекания тромбоцитов, связанных с дефектами люмиагрегометрии. (A) Тепловая карта, показывающая наличие дефекта распространения или агрегации. Каждая строка представляет отдельного пациента. Каждая колонка изображает аномалию распространения тромбоцитов (A - дефект площади распространения тромбоцитов, B - дефект распространения циркулярности тромбоцитов, C - дефект циркулярности и площади распространения тромбоцитов) или D - тромбоцитопения или дефект люмиагрегометрии, E - дефект секреции тромбоцитов, F - дефект ЦОГ, G - дефект сигнализации Gi, H - дефект множественной агрегации). Красным цветом: двойные положительные попадания. Темно-зеленый: одиночные совпадения для дефекта распространения или агрегации. Черным цветом: несколько попаданий в категорию. Светло-зеленый: нет совпадений ни для одного из тестов. Пациенты с двойным положительным попаданием и повышенным баллом Инструмента оценки кровотечения выделены красным шрифтом. (B) Круговая диаграмма, показывающая распределение «двойных положительных» дефектов распространения тромбоцитов. (C) Репрезентативные иммунофлуоресцентные и сегментационные изображения распространения тромбоцитов у выбранных пациентов с явными дефектами округлости или площади. На верхней панели показаны изображения репрезентативного контрольного здорового донора. На нижних панелях показаны изображения пациентов 2 и 4, у которых был обнаружен только дефект распространения тромбоцитов, пациентов 23 и 24.1, у которых был только дефект циркулярности тромбоцитов, и пациентов 41.1 и 41.2, у которых были дефекты распространения как площади, так и циркулярности.

Исследование GAPP направлено на выявление фенотипа и генетических причин кровотечения. Ключевой вопрос заключается в том, может ли распространение тромбоцитов идентифицировать пациентов с генетическим дефектом в случаях, когда агрегометрия в норме. В этой когорте пациентов был применен анализ секвенирования всего экзома с использованием установленного биоинформатического конвейера. 10 У одного такого пациента был идентифицирован гетерозиготный вариант миссенс TUBB1 (p.Arg359Trp) (пациент 41.2), но не у родного брата пациента, 41.1. Этот генетический дефект также согласуется со сниженным количеством тромбоцитов, наблюдаемым только у пациента 41,2 (107×10 9 /л), а не в родственном (221×10 9 /л). Известно, что дефекты TUBB1 вызывают макротромбоцитопению 11 – 14 , и идентификация этого варианта с помощью анализа распределения тромбоцитов подтверждает эффективность этого инструмента при изучении предполагаемых нарушений функции тромбоцитов. Интересно, что это открытие согласуется с предыдущими сообщениями, показывающими минимальное влияние ингибирования цитоскелета на агрегацию тромбоцитов. Это говорит о том, что отсутствие дефекта агрегометрии у TUBB1 -дефектные пациенты, вероятно, из-за незначительного эффекта, который совпадает с контрольной группой. В этом случае распространение тромбоцитов эффективно выявляет дефект, который классически маскируется в экспериментах по агрегации. 15 – 17

В этом исследовании высокопроизводительный анализ распределения тромбоцитов систематически коррелировал с клиническими данными и данными люмиагрегометрии, чтобы определить полезность первого анализа в исследовании нарушений функции тромбоцитов. Мы обнаружили, что пациенты с положительной аномалией округлости и площади, соответствующие морфологии аномально маленьких и круглых тромбоцитов, являются как положительными, так и отрицательными в отношении дефектов агрегации. Восемьдесят процентов пациентов с распространяющимся дефектом, но с отрицательным результатом агрегометрии на наличие дефекта, имели значительный показатель кровотечения. Кроме того, в этой когорте мы выявили TUBB1 как причинный генетический вариант у человека с тромбоцитопенией.

Особый интерес представляет то, что у большого числа пациентов с положительным результатом на дефекты распространения тромбоцитов и с обильным кровотечением в анамнезе дефекты агрегации отрицательны. могут быть пропущены только с помощью люмиагрегометрии. Кроме того, этот анализ распределения тромбоцитов не зависит от количества тромбоцитов, как в случае PFT на основе агрегации 9.0439 8 , 9 и, следовательно, может быть полезным инструментом для проверки дефектов функции тромбоцитов у пациентов с тромбоцитопенией. Наш подход подтверждает использование высокопроизводительного анализа распространения тромбоцитов в качестве аналитического инструмента для улучшения и дополнения существующих PFT. Поскольку подходы к визуализации с высоким содержанием становятся все более доступными и распространенными, применение стратегий распределения тромбоцитов с высокой пропускной способностью, вероятно, станет бесценным дополнением к текущему арсеналу PFT.

Информация об авторстве, взносах, раскрытии финансовой и другой информации предоставлена ​​авторами и доступна в онлайн-версии этой статьи на сайте www.haematologica.org.

Финансирование: работа в лабораториях автора поддерживается Британским фондом сердца (PG/13/36/30275; FS/15/18/31317; PG/15/114/31945) Авторы благодарят Imaging Suite и COMPARE Основные возможности Бирмингемского университета. Авторы также признательны за помощь и поддержку Иэну Стайлсу из Бирмингемского университета.

1. Bolton-Maggs PH, Chalmers EA, Collins PW, et al. Обзор наследственных заболеваний тромбоцитов с рекомендациями по их лечению от имени UKHCDO. Бр Дж Гематол. 2016; 135 (5): 603–633. [PubMed] [Google Scholar]

2. Lordkipanidze M, Lowe GC, Kirkby NS, et al. Характеристика множественных путей активации тромбоцитов у пациентов с кровотечением как вариант высокопроизводительного скрининга: использование 96-луночного оптимального анализа. Кровь. 2014; 123(8):e11–22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

3. Аль Гаити Р., Дрейк С., Уотсон С.П., Морган Н.В., Харрисон П. Сравнение многоэлектродной агрегометрии с люми-агрегометрией для диагностики пациентов с легкими нарушениями свертываемости крови. Джей Тромб Хемост. 2017; 15 (10): 2045–2052. [PubMed] [Google Scholar]

4. Watson SP, Lowe GC, Lordkipanidze M, Morgan NV. Генотипирование и фенотипирование нарушений функции тромбоцитов. Джей Тромб Хемост. 2013; 11 (Приложение 1): 351–363. [PubMed] [Google Scholar]

5. Sommer C, Straehle C, Köthe U, Hamprecht FA. Ilastik: Набор инструментов для интерактивного обучения и сегментации. Восьмой международный симпозиум IEEE по биомедицинской визуализации (ISBI). 2011; 230–233. [Академия Google]

6. Berthold MR, Cebron N, Dill F, et al. KNIME - майнер информации konstanz: версия 2.0 и выше. Исследуйте новости. 2009 г.; 11(1):26–31. [Google Scholar]

7. Лоу Г.С., Лордкипанидзе М., Уотсон С.П. Полезность инструмента оценки кровотечения ISTH для прогнозирования дефектов тромбоцитов у участников с подозрением на наследственные нарушения функции тромбоцитов. Джей Тромб Хемост. 2013; 11 (9): 1663–1668. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

8. Dawood BB, Wilde J, Watson SP. Референтные кривые для агрегации и секреции АТФ для помощи в диагностике нарушений свертываемости крови на основе тромбоцитов: эффект ингибирования путей АДФ и тромбоксана а(2). Тромбоциты. 2007 г.; 18(5):329–345. [PubMed] [Google Scholar]

9. Dawood BB, Lowe GC, Lordkipanidze M, et al. Оценка участников с подозрением на наследственные нарушения функции тромбоцитов, включая рекомендации и валидацию оптимизированной панели агонистов. Кровь. 2012 г.; 120 (25): 5041–5049. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

10. Johnson B, Lowe GC, Futterer J, et al. Полноэкзомное секвенирование выявляет генетические варианты при наследственной тромбоцитопении со вторичными дефектами качественной функции. Гематология. 2016; 101 (10): 1170–1179. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

11. Kunishima S, Kobayashi R, Itoh TJ, Hamaguchi M, Saito H. Мутация гена бета1-тубулина, связанная с врожденной макротромбоцитопенией, влияет на сборку микротрубочек. Кровь. 2009 г.; 113(2):458–461. [PubMed] [Google Scholar]

12. Burley K, Westbury SK, Mumford AD. Варианты TUBB1 и признаки тромбоцитов человека. Тромбоциты. 2018; 29(2):209–211. [PubMed] [Google Scholar]

13. Кунисима С., Нисимура С., Судзуки Х., Имаидзуми М., Сайто Х. Мутация Tubb1, нарушающая сборку микротрубочек, нарушает образование протромбоцитов и приводит к врожденной макротромбоцитопении. Евр Дж Гематол. 2014; 92(4):276–282. [PubMed] [Google Scholar]

14. Fiore M, Goulas C, Pillois X. Новая мутация в TUBB1, связанная с тромбоцитопенией, подтверждает, что С-концевая часть β1-тубулина играет роль в сборке микротрубочек. Клин Жене. 2017; 91(6):924–926. [PubMed] [Google Scholar]

15. Natarajan P, May JA, Sanderson HM, Zabe M, Spangenberg P, Heptinstall S. Эффекты цитохалазина h, мощного ингибитора реорганизации цитоскелета, на функцию тромбоцитов. Тромбоциты. 2000 г.; 11(8):467–476. [PubMed] [Академия Google]

16. Торти М., Фештетич Э.Т., Бертони А., Синигалья Ф., Балдуини К. Индуцированная агонистами полимеризация актина необходима для необратимости агрегации тромбоцитов. Тромб Хемост. 1996 год; 76(3):444–449. [PubMed] [Google Scholar]

17.

Learn more

 

2011-2017 © МБУЗ ГКП №  7, г.Челябинск.