2011-2017 © МБУЗ ГКП № 7, г.Челябинск.
Выявленные маркеры | Диагноз | Примечание |
IgM анти-HAV и HBsAg | Вирусный гепатит А. Сопутств.: «носительство HBsAg». | При типичных признаках острого ГА. Необходимо тщательное клинико-лабораторное исследование для исключения ОГВ и ХГВ. |
IgM анти-HAV, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс | Вирусный гепатит А. Сопутств.: хронический гепатит В (нерепликативная фаза). | При выявлении признаков хронического гепатита у больных острым ГА и отсутствии маркеров репликации (HBV-DNA, HBeAg, IgM анти-НВс). |
IgM анти-HAV, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс, IgM анти-НВс, HBeAg, HBV-DNA | Вирусный гепатит А. Сопутств.: хронический гепатит В (репликативная фаза). | При выявлении признаков хронического гепатита у больных острым ГА. |
HBsAg, HBeAg, IgM анти-НВс, IgM анти-HDV | Острая коинфекция ВГВ и ВГD. | При отсутствии IgG анти-НВс и клинико-анамнестических признаков обострения ХГВ |
HDV-RNA, IgM анти-HDV, HBsAg | Острая суперинфекция ВГD. | При отрицательных результатах обследования на IgM анти-HBV (или низких титрах этих антител). |
Анти-HCV IgG | Реконвалесцент ВГС (или ВГС-пастинфекция) — при отрицательных результатах исследования на: IgM анти-HCV и HCV-RNA. | Только у практически здоровых при отсутствии эпидемиологических данных и клинико-лабораторных признаков поражения печени. |
При невозможности подобного исследования | Диспансерное наблюдение такое же, как при диагнозе «носительство HBsAg» | |
Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA | Острый вирусный гепатит С. | При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого гепатита и отсутствии маркеров других ВГ. Диспансерное наблюдение такое же, как и при ОГВ. |
Анти-HCV IgG, анти — HCV core IgM, анти — HCV core IgG, анти — HCV NS, HCV-RNA | Хронический вирусный гепатит С (фаза реактивации). | При наличии клинико-биохимических признаков хронического поражения печени. Диспансерное наблюдение такое же, как при ХГВ. |
Выявленные маркеры | Диагноз | Примечание |
Анти-HCV IgG анти-HCV core IgG, анти — HCV NS | Хронический вирусный гепатит С (латентная фаза). | При отсутствии в крови HCV-RNA, анти — HCV core IgM и клинико-биохимических признаков обострения ХГС. |
HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV IgG, анти-HCV core IgM, анти — HCV core IgG, анти — HCV NS, HCV-RNA | Острый вирусный гепатит В Сопутств.: хронический вирусный гепатит С (фаза деактивации) | При наличии клинико-лабораторных признаков ОГВ. Сопутствующий диагноз является следствием детального клинико-лабораторного обследования на ГС. |
HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV IgG, анти-HCV core IgG, анти — HCV NS | Острый вирусный гепатит В Сопутств.: хронический вирусный гепатит С (латентная фаза) | При наличии клинико-лабораторных признаков ОГВ. Сопутствующий диагноз является следствием детального клинико-лабораторного обследования на ГС. |
HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV (total), анти-HCV core IgM, HCV-RNA | Острая коинфекция ВГВ/ВГС | При наличии лишь клинико-лабораторных и эпидемиологических признаков, характерных для острых вирусных гепатитов. |
Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс | Острый вирусный гепатит С. Сопутств.: хронический гепатит В (нерепликативная фаза). | При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого ГС. |
Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс, IgM анти-НВс, HBeAg, HBV-DNA | Острый вирусный гепатит С. Сопутств.: хронический гепатит В (репликативная фаза). | При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого ГС и хронического ГВ. |
О.А. Тарасенко, И.А. Гукасян, Л.В.Соболевская, Т.В. Черненко
Станция переливания крови Департамента Здравоохранения г. Москвы
В настоящее время исследование образцов донорской крови на маркеры вирусных гепатитов В (ВГВ) и С (ВГС) проводят серологическими методами: иммуноферментным (ИФА) или иммунохемилюминисцентным (ИХЛА) анализом, позволяющими определять наличие в них поверхностного антигена ВГВ (HBsAg) и антител к белкам ВГС (анти HCV). Введение в лабораторную практику службы крови обязательного тестирования донорской крови на указанные серологические маркеры ВГВ и ВГС позволило значительно снизить риск посттрансфузионной передачи ВГС и ВГВ.
Известно, однако, что при ВГС специфические антитела появляются в среднем через 10-12 недель от момента заражения, а в некоторых случаях сроки их появления могут отодвигаться до 30-50 недель [2,6]. Поэтому при исследовании методами ИФА или ИХЛА образцов крови, взятой от донора с ранней стадией ВГС, когда антитела еще не выявляются (период, так называемого, серонегативного окна), получают, как правило, ложноотрицательный результат. В то же время именно в этот период ВГС наблюдается, выраженная виремия и связанная с ней высокая « инфекционная способность» инфицированной крови [3 ]. В связи с этим компоненты крови, заготовленные от донора, находящегося в периоде «серонегативного окна», являются основным источником заражения реципиента ВГС при гемотрансфузии.
Использование NAT-технологий, в частности метода ПЦР, позволяет выявить РНК HCV в крови уже через 1-2 недели после заражения, т.е. приблизительно за 60 дней до выявления в ней антител к HCV серологическими тестами.
HBsAg в большинстве случаев является наиболее значимым серологическим маркером острого и хронического ВГВ, выявление которого в крови свидетельствует с высокой степенью вероятности о присутствии в ней вируса . Однако, зарегистрированы случаи заражения ВГВ при переливании HBsAg-негативной крови. В настоящее время известно о существовании по крайней мере двух «ускользающих (escape)» мутантов HBsAg [9,13], которые могут возникать как естественным путем в ходе инфекционного процесса, так и после противовирусной терапии. Эти штаммы HBV способны передаваться горизонтальным путем и обусловливать ложно негативный результат при скрининге донорской крови на HBsAg. Описана, так называемая, «молчащая» форма ВГВ, характеризующаяся наличием низких концентраций вируса в крови при не детектируемом уровне HBsAg [2, 11]. Она может наблюдаться у некоторых больных после острого ВГВ с самостоятельным разрешением и даже после успешно проведенного противовирусного лечения, а также при хроническом ВГВ. Установлено, что «молчащая» инфекция представляет клиническую форму ВГВ, способную передаваться через компоненты крови, а диагностика ее основывается на тщательном сборе анамнеза и применении высокочувствительного метода ПЦР для определения вирусной ДНК [1].
Задачей настоящей работы было оценить целесообразность использования метода ПЦР для скрининга донорской крови на маркеры ВГС ВГВ.
Пробы крови от каждого донора забирали в 2 пробирки: одну пробирку с разделительным гелем для получения сыворотки для серологических исследований и вторую пробирку с ЭДТА для получения плазмы для ПЦР.
Скрининг донорских сывороток на серологические маркеры ВИЧ 1,2, ВГВ и ВГС проводили методом ИФА на аппарате Evolis (компания Biorad, США) или методом ИХЛА на аппарате Architect (компания Abott, США).
Для определения антител к HCV методами ИФА и ИХЛА использовали, соответственно, тест-системы Murex anti HCV (Abbott, США) и тест-системы Architect anti HCV (компания Abbott, США).
Для выявления HBsAg методом ИФА использовали тест-системы Monolisa HBsAg Ultra (Bio-Rad, США) и тест-системы Architect HBsAg (компания Abbott, США).
Образцы, показавшие при первичном исследовании в ИФА или ИХЛА положительный результат на анти ВИЧ 1,2, анти HCV или HBsAg, отбирали для повторного исследования в тех же тест-системах и подтверждающих тестах.
Все серонегативные образцы исследовали методом ПЦР на наличие РНК HIV, HCV и ДНК HBV.
В течение 2008 года ПЦР-исследования проводили на аппаратах Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor ( компания Roch, Швейцария) с использованием тест-систем: Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor HIV 1 Monitor Test , Cobas Ampliprep/ Cobas Amplicor HCV Test и Cobas Amplicor HBV Monitor Test.
С января 2009 года исследования выполняли методом ПЦР в режиме реального времени на инструментальном комплексе Cobas 201 (Roche. Швейцария), включающем пипетирующую рабочую станцию, аппарат для автоматического выделения нуклеиновых кислот Cobas Ampliprep и анализатор Cobas Taqman для автоматического проведения амплификации и детектирования нуклеиновых кислот с использованием 5 нуклеазной технологии. Многоканальные оптические системы прибора позволяют регистрировать флуоресцентный сигнал от исследуемого образца в каждом цикле ПЦР. Для ПЦР-анализа серонегативных образцов использовали мультиплексные тест-системы CobasTaqScreen MPX Test, разработанные компанией Roche специально для скрининга донорской крови [10]. За счет включения в реакционную смесь различных пар специфических праймеров и зондов эти системы позволяют выявлять одновременно в одной пробирке РНК HIV-1 rpyппы М и группы О, HIV-2, HCV и ДНК HBV. Образцы, при исследовании которых регистрировали нарастание флуоресцентного сигнала, считали положительными, т.е. содержащими вирусную РНК (ДНК). Такие образцы исследовали повторно в той же тест-системе. При получении повторно положительного результата проводили идентификацию выявленной нуклеиновой кислоты с помощью указанных выше ПЦР-диагностикумов на отдельные инфекции.
Результаты исследования представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1 - Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом ПЦР на комплексе Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor
Количество исследований | Количество образцов, содержащих: | ||
| PHKHCV | РНК HIV | ДНК HBV |
56 983 | 8 | 0 | 0 |
Таблица 2 - Результаты исследования серонегативных образцов донорской крови методом ПЦР на комплексе Cobas S 201
Количество исследований | Количество положительных результатов в тесте МРХ | Количество положительных результатов в дискриминаторном тесте на: | ||
РНК HCV | РНК HIV | ДНК HBV | ||
62 438 | 31 | 16 | 0 | 4 |
При исследовании 56983 серонегативных образцов донорской плазмы на наличие вирусной РНК (ДНК) на аппаратах Cobas Ampliprep/Cobas Amplicor с помощью диагностических тест-систем на отдельные иифекции (табл.1) было выявлено 8 образцов, содержащих РНК HCV. При этом РНК HIV-1 и ДНК HBV ни в одном из исследованных образцов выявлено не было.
При исследовании 62438 серонегативных образцов на аппаратном комплексе Cobas 201 с помощью тест-систем CobasTagScreen МРХ в 31 случае было зарегистрировано нарастание флуоресцентного сигнала, свидетельствующее о наличии в образце вирусной РНК (ДНК) (табл.2). Дискриминаторный анализ этих образцов с помощью тест- систем на отдельные инфекции выявил в 16-и из них РНК HCV, в 4-х. других- ДНК HBV в низкой концентрации (менее 60 IU./ml). Остальные 11 образцов, положительные в тесте CobasTagScreen МРХ, показали отрицательный результат в индивидуальных тестах на РНК HIV-1, РНК HCV и ДНК HBV. Однако при исследовании образцов, содержащих ДНК HBV и образцов с не идентифицированной нуклеиновой кислотой на наличие антиНВсоr во всех случаях выявили выраженную серологическую реакцию (коэффициент позитивности колебался от 7,8 до 8,6) (табл.3).
Таблица 3 - Выявление ДНК HBV у серонегативных доноров
№ п/п | Результат скринингового теста | Результат ПЦР-теста на ДНК HBV | Наличие Anti НВсог | Наличие Anti HBs |
1 | + | - | + | - |
2 | + | + | + | - |
3 | + | - | + | - |
4 | + | - | + | + |
5 | + | + | + | - |
6 | + | - | + |
|
7 | + | - | + | - |
8 | + | + | + | - |
9 | + | - | + | + |
10 | + | - | + | - |
11 | + | + | + | _ |
12 | + | - | + | + |
13 | + | - | + | - |
14 | + | - | + | + |
15 | + | - | - | - |
В 4-х образцах были также обнаружены антитела к HBsAg . Наличие в образцах с не идентифицированной нуклеиновой кислотой серологических маркеров HBV инфекции позволяет считать, что в них присутствует ДНК HBV в концентрации ниже предела чувствительности теста Cobas Amplicor HBV Monitor (40 IU/ml), выявляемая, однако, более чувствительной тест-системой CobasTagScreen MPX (3,3-4,4 IU/ml).
Обобщая полученные результаты, мы установили, что методом ПЦР из 119421 образцов донорской плазмы, показавших отрицательный результат в серологических тестах, выявлено 24 образца (0,02%), содержащих РНК HCV. 16 HCV -позитивных образцов имели нормальный уровень трансаминаз, в то время как в 8-и других был зарегистрирован повышенный уровень активности АЛТ. Подобная картина может наблюдаться как при ранней инфекции (период серонегативного окна), так и при хроническом ВГС у лиц с подавленным иммунитетом. Данные литературы, свидетельствующие об отсутствии прямой зависимости между уровнем АЛТ и наличием РНК HCV в сыворотке крови [4] позволяют считать, что обнаружение РНК HCV в крови является наиболее информативным показателем HCV-инфекции в период серонегативного окна.
Также нами было выявлено 11 случаев ВГВ у HBsAg негативных доноров. В 4-х из них низкий уровень виремии сохранялся несмотря на наличие анти- HBS. Известно, что подобное состояние иногда может наблюдаться длительное время после клинического выздоровления от острого ВГВ. Предполагают, что персистенция вируса в этом: случае может осуществляться в форме иммунного комплекса с анти-HBs [11]. В остальных случаях сочетание низкого уровня виремии с наличием только анти-НВсог скорее укладывается в картину «молчащей» формы хронического ГВ. Считают, что отрицательные результаты при детекции HBsAg у больных ВГВ могут быть вызваны низким уровнем HBsAg, образованием иммунных комплексов, а также мутациями вируса в S-регионе [11,17]. Механизмы, поддерживающие низкий уровень репликации вируса при «молчащей» форме ГВ нуждаются в дальнейшем изучении. В настоящее время к факторам, способным поддерживать персистенцию вируса в крови при «молчащей» HBV- инфекции относят инфицирование вирусом моноцитов крови, формирование иммунных комплексов с антителами, ослабленный иммунитет и коинфекцию [11,17].
Таким образом, на основании полученных результатов можно заключить, что скрининг образцов донорской крови с применением ПЦР-тестирования для выявления вирусной РНК (ДНК) позволит снизить риск посттрансфузионной передачи вирусных гепатитов В и С, за счет выявления инфицированных доноров, находящихся в периоде серонегативного окна и доноров с молчащей формой инфекции. Алгоритм апробации донорской крови, при котором скрининг образцов методом ПЦР проводят одновременно с исследованием их в серологических тестах, позволит не только повысить инфекционную безопасность гемопродукции, но и сократить промежуток времени от момента забора крови до выдачи ее в лечебные учреждения, что особенно важно для сохранения компонентов с ограниченным сроком годности.
ЛИТЕРАТУРА
1. Амосов А.Д. Гепатит В (издание 2). Кольцов, 2001.- 128 с.
2. Голосова Т..В., Никитин И.К. Гемотрансмиссивные инфекции.- М.., 2003.- 191 с.
3. Карякин А.В., Скоцеляс Е.Д., Терентьева Л.А. Мониторинг безопасности донорского контингента России//Трансфузиология, 2007.- №1-2.- с.21.
4. Майер К.П. Острый вирусный гепатит С.// В кн.: Гепатит и последствия гепатита. /Пер. с нем.- М.: ГЭОТАР Медицина,. 1999.- с.91-98.
5. Малышев B.C., Федорова В.Д., Потехин О.Е. Маркеры вирусного гепатита В у доноров крови и в группах сравнения // Иммунопатология, аллергология, инфектология.-1999.- №1.- с.103-105.
6. Рагимов А.А., Дашкова Н.Г. Основы трансфузионной иммунологии. - М., 2004.-280 с.
7. Allain J.P. Occult hepatitis В virus infection: implication in transfusion. // Vox Sang., 2004, Vol.86, N.2, p.83-91.
8. Busch M.P., Glynn S.A.. Strainer S.L. et al. A new strategy for estimating risk of transfusion-transmitted viral infections based on rates of detection of resently infected donors.// Transfusion, 2004, vol. 45, p.254-264.
9. Gutierrez C, Devesa M., Loureiro C.L. et al. Molecular and serological evaluation of surface antigen negative hepatitis В virus infection in blood from Venezuela. // J.Med.Virol., 2004, Vol. 3, N.2 p.200-207.
10. Herman S., Ohhashi Y., Kyger E. et al. Performance characteristics of a new multiplex NAT screening test for HBV, HCV and HIV. The Cobas TagScreen MRX Test on the COBAS S 201 system.// Vox Sang., 2007, Vol.91, Suppl.3:81.
11. Ke-Qin Hu. Occult hepatitis В virus infection and its clinical implications. // Journal of viral hepatitis, 2002, Vol.9, p.243-257.
12. Kleinman SH., Strong DM., Tegtmeier GE. Et.al. Hepatitis В virus (DBV) DNA screening of blood donation in minipools with the Cobas AnipliScreen HBV test. // Transfusion, 2005.VoI.45, p.1247-1257.
13. Levicnik.-Stezinar S. Hepatitis В surface antigen escape mutant in a first blood donor potentially missed by a routine screening assay. // Clin.Lab.< 2004, Vol.50, N.l-2, p.49-51.
14. Minegishi K., Yoshikawa A., Kishimoto S. et al. Superiority of minipool nucleic acid amplifycation technology for hepatitis В virus over chemiluminescence immimoassay for hepatitis В surface antigen screening. Vox Sang., 2003, Vol.84, p.287-291.
15. Roth W.K., Weber M., Petersen D. et al. NAT for HBV and anti HBc testing increase blood safety. // Transition, 2002, Vol.42, p.869-875.
16. Stramer S.L., Glynn S.A., Kleinman S.H. et al. Detection of HTV-1 and HCV infections among antibody-negative blood donors by nucleic acid- amplification testing.// N Engl Med, 2004, vol.351, p.760-768.
17. Weber В., Melchior W., Gehrke R. et al. Hepatitis В virus markers in anti-ITBc only positive individuals. III. Med. Virol., 2001, Vol.64, N.3, p.312-3 19.
18. Yoshikawa A, Gotanda Y., Itabashi M. et al. Hepatitis В NAT virus-poselive blood donors in the esrly and late stages of HBV infection: analyses of the window period and kmetics of HBV DNA. Vox Sang.,2005, Vol.88, p.77-86.
19. Голосова Т.В., Никитин И.К. Гемотрансмиссивные инфекции. - М.,2003.
Все статьи в разделе "Лабораторная диагностика"
Обнаружение HBsAg («АШ-БЭ-ЭС антиген») в крови – скрининговая методика диагностики гепатита В. Анализ основан на том, что при контакте организма с вирусом происходит иммунный ответ в виде продукции специальных антител. HBsAg – это компонент внешней оболочки вируса, который провоцирует иммунитет. То есть целью борьбы иммунитета является «уничтожение» HBsAg, путем продукции антител против HBsAg: при их контакте происходит разрушение вируса. Зачастую данный антиген удается обнаружить еще в инкубационном периоде. Выявление в крови через 6 месяцев после начала заболевания – признак перехода гепатита из острой формы в хроническую.
Гепатит В («Б») – вирусное заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита В (ВГВ) и передающееся от человека к человеку по парентеральному механизму – то есть, через инфицированную кровь. Заражение осуществляется половым путем, от матери к плоду, через зараженные предметы быта и медицинское оборудование (иглы, скальпеля, ножницы, бритвы, расчески, зубные счетки и т.п.), при переливании крови. Вирус обнаруживается во многих биологических жидкостях – крови, слюне, моче, сперме, влагалищной и спинномозговой жидкости, менструальной крови. Считается, что заразность (контагиозность) ВГВ превосходит ВИЧ в 100 раз! Вирус обладает высокой устойчивостью к агрессивным факторам внешней среды: низким или высоким температурам, воздействию кислот и щелочи. При комнатной температуре ВГВ сохраняется несколько недель (например, в засохшем пятне крови на кончике иглы или бритвы). В замороженной сыворотке крови – 15 лет.
Тем не менее, невозможно инфицироваться данным гепатитом держась за руки, пользуясь общей посудой, через поцелуй или объятие, при кашле, чихании, грудном вскармливании.
Клиническая картина заболевания имеет ряд важных особенностей:
Инкубационный период (от момента заражения до первых клинических проявлений) составляет от 60-120 дней. Вирус проникает в клетки печени и встраивает свой код ДНК в ДНК-структуру печеночных клеток. Иммунная система человека начинает воспринимать зараженные клетки, как чужеродный организм и атакует его. Как следствие, развивается воспаление печени – гепатит. Если иммунитет справляется с возбудителем, то заболевание излечивается. Если же нет – то болезнь переходит в хроническую форму.
Течение хронического гепатита имеет волнообразный, цикличный характер:
Период репликации: размножение вируса внутри клеток печени (гепатоцитов). На данном этапе особых клинических проявлений нет.
Период интеграции: выход новых вирусных частиц из гепатоцитов, попадание их в кровоток с дальнейшей транспортировкой в другие отделы печени, внедрение в ее незараженные участки. В этот период наблюдается яркая клиническая картина.
Клиническая картина гепатита В:
Заболевание начинается с общего плохого самочувствия, потери аппетита, тошноты и рвоты, боли во всем теле, повышение температуры до 37-38 градусов. Кал становится светлым, моча – темнеет, появляется желтушность сначала склеры глаз, затем кожных покровов. Желтуха сопровождается сильным кожным зудом. Дальнейшее развитие гепатита зависит от иммунитета пациента и своевременной и адекватной терапии.
Хронический вирусный гепатит может стать причиной цирроза печени (необратимое тяжелое изменение) или даже рака печени - гепатоцеллюлярной карциномы.
Серологические маркеры гепатита В:
маркер | Период болезни | период выздоровления | серологический статус после выздоровления | ||||
инкубационный период | острая фаза заболевания | ||||||
начало | конец | активная репликация | конец фазы репликации ВГВ | ||||
Д Л И Т Е Л Ь Н О С Т Ь | |||||||
| 4 – 12 нед | 1 – 2 нед | 2 недели – 3 месяца | 3 – 6 мес | многие годы | ||
ВГВ-ДНК | - | + | + | - | - | - | |
HBsAg | + | + | + | + | +/- | - | |
HBeAg | - | + | + | - | - | - | |
Anti-HBc IgM | - | - | + | + | +/- | - | |
Anti-HBc (суммарные) | - | - | + | + | + | + | |
Anti-HBe (суммарные) | - | - | - | + | + | +/- | |
Anti-HBs (суммарные) | - | - | - | - | -/+ | + |
Гепатит — серьезное заболевание, поражающее, главным образом, печень. В частности гепатит В и С способствуют развитию хронических заболеваний и, в последствии, приводят к циррозу и раку печени. Анализ на гепатит — эффективная мера по предупреждению серьезных последствий этой вирусной инфекции.
Гепатит А передается контактным путем через зараженные предметы обихода, продукты питания и воду. Для предотвращения этого вируса достаточно соблюдать правила личной гигиены. Анализ на гепатит А заключается в выявлении повышенного уровня печеночных ферментов и билирубина.
Гепатит В передается через кровь естественным или искусственным путем. Эта разновидность вируса определяется по наличию в крови специфических антител, образующихся в результате выработки вирусом антигенов.
Передача вируса гепатита С осуществляется парентерально и может приводить к хроническим формам заболевания. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов этого вида предполагает проведение нескольких тестов (ПЦР, биохимия крови). К сожалению, в настоящее время вакцина против гепатита С не изобретена.
Сдать анализ на гепатит можно в Минске, Гомеле, Бресте, Гродно, Витебске, Могилеве, Бобруйске, Барановичах, Солигорске, Слуцке, Полоцке, Новополоцке, Новогрудке, Орше, Жлобине, Светлогорске, Молодечно, Пинске, Борисове, Речице, Мозыре, Сморгони.
Помимо указанных, существуют и другие типы вирусных гепатитов. Но А, В и С являются самыми распространенными. В медицинской лаборатории «Синэво» Вы можете сдать анализы на гепатит А, В и С и максимум через три дня получить результаты исследований. Лечение гепатита — не то дело, которое стоит откладывать на завтра.
Гепатит B (ВГВ, HВV) – острое инфекционное заболевание, вызываемое ДНК-содержащим вирусом HBV с преимущественно парентеральным механизмом характеризующееся в клинически выраженных случаях симптомами острого поражения печени и интоксикацией (с желтухой и без нее) и протекающее с выраженным полиморфизмом клинических проявлений болезни и исходов от выздоровления до возможности развития хронического гепатита В, цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Вирус гепатита В содержит ДНК и чрезвычайно устойчив во внешней среде (к УФ-лучам, температуре, детергентам).
Гепатит В является антропонозом. Источниками инфекции при гепатите B являются больные с различными формами данного заболевания. Вирус у инфицированных лиц содержится в крови, сперме, вагинальном секрете. Механизм инфицирования – гемоконтактный (парентеральный). Пути инфицирования: естественные (половой, бытовой, перинатальный) и искусственные, связанные с парентеральными вмешательствами. Восприимчивость к ВГВ – всеобщая, обусловленная наличием специфических рецепторов к HBs антигену на гепатоцитах.
Ведущее эпидемиологическое значение при парентеральных гепатитах имеют искусственные пути передачи возбудителя, которые реализуются при проведении немедицинских и медицинских манипуляций, сопровождающихся повреждением кожи или слизистых оболочек, а также манипуляций, связанных с риском их повреждения.
Инфицирование вирусами парентеральных гепатитов при немедицинских манипуляциях, сопровождающихся повреждением кожи или слизистых оболочек, происходит при инъекционном введении наркотических средств (наибольший риск 80-100%), нанесении татуировок, пирсинге, ритуальных обрядах, проведении косметических, маникюрных, педикюрных и других процедур с использованием контаминированных инструментов.
Группу повышенного риска составляют медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные, члены семей HBs-положительных лиц, новорожденные от HBs-положительных матерей.
В жизнедеятельности вируса гепатита В различают две фазы: фазу репликации и фазу интеграции.
В фазе репликации происходит воспроизведение (размножение) вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы синтезируется нуклеокапсид, содержащий ДНК вируса, антигены HBcAg, HBeAg, которые являются основной мишенью иммунной системы. Затем нуклеокапсид мигрирует из ядра в цитоплазму, где реплицируются белки внешней оболочки (HBsAg), и, таким образом, происходит сборка полного вириона. При этом избыток HBsAg, не использованный для сборки вируса, через межклеточное пространство попадает в кровь. Полная сборка (репликация) вируса заканчивается презентацией его растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на мембране гепатоцита, где происходит его "узнавание" иммуноцитами. Антиген HBcAg находится в печеночной клетке, серологическими методами не определяется, потому что отсутствует в крови в свободном виде. Определяется наличие в крови антител (anti-HBc) к этому антигену, вырабатывающихся вследствие его высокой иммуногенности.
В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве. Вирусная ДНК может быть интегрирована не только в гепатоциты, но и в клетки поджелудочной железы, слюнных желез, лейкоциты, сперматозоиды, клетки почек. Фаза интеграции сопровождается становлением клинико-морфологической ремиссии. В этой фазе в большинстве случаев формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к купированию активности процесса и носительству HBsAg. Интеграция делает вирус недосягаемым для иммунного контроля.
Длительность инкубационного периода составляет от 1-4 до 6 месяцев, в среднем – 80 дней. Гепатит В протекает циклически, с различной степенью тяжести: легкая, средняя и тяжелая.
Преджелтушный период длится 8-12 дней и более. Болезнь начинается постепенно. Характерны астеновегетативный (слабость, утомляемость, разбитость) и диспепсический (снижение аппетита, тошнота, иногда рвота, горечь во рту, тяжесть и тупые боли в правом подреберье) синдромы. Часты головная боль, нарушение сна. Примерно у 20-30% больных наблюдают боли в крупных суставах, уртикарную сыпь, реже кожный зуд. В конце преджелтушного периода увеличивается печень (иногда селезенка), появляются темная моча и ахоличный кал. При лабораторном обследовании в моче обнаруживают уробилиноген, иногда желчные пигменты. В крови повышается активность АЛТ и АСТ, обнаруживается ДНК вируса и специфические маркёры HBV-инфекции (HBsAg, HBeAg, анти-HBcIgM). Преджелтушный период может отсутствовать, тогда потемнение мочи и желтушность склер служат первыми симптомами болезни.
Желтушный период. С появлением желтухи самочувствие больных ухудшается: нарастает слабость, снижается аппетит вплоть до анорексии, тошнота, сухость и горечь во рту, нередко – головная боль и головокружение, прекращаются артралгии. В желтушном периоде ещё более увеличивается печень. Постепенно нарастает желтуха, достигая максимума на 2-3 неделе. Моча становится тёмной, кал на высоте желтухи становится ахоличным. Продолжительность желтушного периода варьирует от нескольких дней до нескольких недель, чаще составляет 2-6 недель. Повышение активности АЛТ в 30-50 раз регистрируют в течение всего желтушного периода. Белково-синтетическая функция печени при ВГВ нарушается при тяжёлом течении болезни
(снижение содержания альбумина, протромбинового индекса). В периферической крови обнаруживают тенденцию к лейкопении и лимфоцитозу, СОЭ снижается или в норме.
Период реконвалесценции может продолжаться до 6 месяцев. Клинико-биохимические изменения исчезают медленно: содержание билирубина в сыворотке нормализуется в течение 2-4 недель; повышенная активность ферментов сохраняется от 1 до 3 мес. У ряда больных можно наблюдать волнообразный характер гиперферментемии в период реконвалесценции. Рецидив заболевания с клинико-ферментативным обострением и гипербилирубинемией требует исключения HDV-гепатита.
Возможны субклиническая и инаппарантная формы (отсутствие жалоб и клинических проявлений, но выявление специфических маркеров гепатита В при повышенном уровне или нормальном уровне АЛТ).
Верификация диагноза гепатита В основана на выявление специфических серологических маркеров и ДНК вируса. Рекомендуется проведение определения ДНК вируса гепатита В методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) качественно и количественно пациентам с подозрением на острым вирусным гепатитом В для ранней диагностики установления уровня вирусной нагрузки. ПЦР позволяет выявить ДНК вируса в сыворотке крови, лимфоцитах, что указывает на репликацию. ДНК ВГВ начинает обнаруживаться в крови в среднем через месяц после инфицирования и является первым диагностическим маркером ВГВ, опережая появление HBsAg на 10-20 дней. Исследование на ДНК ВГВ позволяет проводить раннюю диагностику ОГВ, выявлять скрытые (латентные) формы ГВ и мутантные по HBeAg штаммы вируса. Количественное определение ДНК ВГВ позволяет судить о вирусологическом ответе при лечении.
Положительный результат ПЦР за период более 6 месяцев указывает на хроническую инфекцию. Определение вирусной нагрузки (количество ДНК вируса в крови) позволяет оценить вероятность перехода заболевания в хроническую форму. Повышенные уровни печеночных трансаминаз при положительном результате ПЦР являются показателями необходимости проведения терапии. Во время лечения вирусного гепатита В исчезновение ДНК вируса свидетельствует об эффективности лечения.
Показания к назначению:
Референсные значения: не обнаружено (отрицательный результат).
Необходимо воздержаться от приема пищи в течение 2-3 часов.
Комплексное исследование объединяет 4 анализа, обязательных для госпитализации, постановки на учет, перевода из/в лечебное учреждение, получения санитарной книжки, трудоустройства и пр. Исследования позволяют обнаружить заболевания, передаваемые при медицинских процедурах и половым путем: ВИЧ, гепатиты В и С, сифилис. В случае анонимной сдачи данного обследования не требуется указывать паспортные данные (Ф. И. О).
ВИЧ-инфекция — медленно прогрессирующее заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). Вирус поражает клетки иммунной системы, имеющие на своей поверхности рецепторы CD4: Т-хелперы, моноциты, макрофаги, клетки Лангерганса, дендритные клетки, клетки микроглии. В результате работа иммунной системы угнетается, развивается синдром приобретённого иммунного дефицита (СПИД), организм больного теряет возможность защищаться от инфекций и опухолей, возникают вторичные оппортунистические заболевания, которые не характерны для людей с нормальным иммунным статусом.
Гепатит В — антропонозное вирусное заболевание, вызываемое возбудителем с выраженными гепатотропными свойствами – вирус гепатита В (в специальной литературе его могут обозначать «вирус ГВ», ВГВ или HBV) из семейства гепаднавирусов. Вирус отличается чрезвычайно высокой устойчивостью к различным физическим и химическим факторам: низким и высоким температурам (в том числе кипячению), многократному замораживанию и оттаиванию, длительному воздействию кислой среды. Во внешней среде при комнатной температуре вирус гепатита В может сохраняться до нескольких недель: даже в засохшем и незаметном пятне крови, на лезвии бритвы, конце иглы. В сыворотке крови при температуре +30°С инфекционность вируса сохраняется в течение 6 месяцев, при температуре −20°С около 15 лет; в сухой плазме — 25 лет. Инактивируется при автоклавировании в течение 30 минут, стерилизации сухим жаром при температуре 160°С в течение 60 минут, прогревании при 60°С в течение 10 часов.
Гепатит C — антропонозное вирусное заболевание с парентеральным и инструментальным путем заражения. Заражение также возможно через поврежденную кожу и слизистые, наиболее опасным фактором передачи является кровь. Часто протекает в виде посттрансфузионного гепатита с преобладанием безжелтушных форм и склонен к хронизации. Гепатит С называют «ласковым убийцей» из-за способности маскировать истинную причину под видом множества других заболеваний.
Сифилис — хроническое системное венерическое инфекционное заболевание с поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, нервной системы с последовательной сменой стадий болезни, вызываемое бактериями вида Treponema pallidum (бледная трепонема). Сифилис передаётся в основном половым путём, в связи с чем относится к группе венерических заболеваний, или ИППП (инфекций, передаваемых половым путём). Однако возможна передача сифилиса и через кровь, например, при переливании крови заражённого сифилисом донора, или у инъекционных наркоманов при пользовании общими шприцами и/или общими ёмкостями для растворов наркотиков, или в быту при пользовании общим «кровавым» инструментом типа зубных щёток или бритв.
1006. “4 обязательных анализа”
1029. “4 обязательных анализа, экспресс-тест” (срок выполнения 2 часа)
Стоимость забора биоматериалаНастоящим уведомляем Вас о том, что с 01 марта 2016 года Лаборатория «Литех» изменяет порядок и стоимость забора биоматериала. Прейскурант
*Цены у Партнеров могут отличаться.
|
Гепатит B (ВГВ, HВV) – острое системное вирусное заболевание. Характеризуется поражением печени и различными внепеченочными проявлениями, Протекает остро или хронически, в желтушной (35%) или безжелтушной (65%) формах. Вирус гепатита В содержит ДНК и чрезвычайно устойчив во внешней среде (к УФ-лучам, температуре, детергентам). Гепатит В передается с кровью и биологическими жидкостями парентеральным, трансплацентарным, половым и бытовым путями. Группу повышенного риска составляют лица, практикующие внутривенную наркоманию, беспорядочные половые связи, а также медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные, члены семей HBs-положительных лиц, новорожденные от HBs-положительных матерей.
Проникая в организм, вирус гепатита попадает в макрофаги крови и разносится по организму. Репликация вируса происходит в лимфатических узлах, костном мозге, фолликулах селезенки, макрофагах, гепатоцитах. Повреждение печени обусловлено, в основном, за счет иммунного лизиса; также вирус оказывает прямое цитопатическое действие.
Инкубационный период – в среднем составляет 4-12 дней, но может растягиваться до 12 месяцев. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз, увеличиваются печень и селезенка. Возможно повышение концентрации билирубина до 2-2,5 нормальных значений, хотя это не приводит к потемнению мочи. Встречаются гриппоподобный, артралгический, диспептический или смешанный варианты клинического течения продромы. Наиболее неблагоприятным является течение продромы по типу сывороточной болезни (зуд, мигрирующие околосуставные высыпания).
Острый период (2-12 дней) протекает с интоксикационным синдромом: снижением аппетита, диспепсией, инверсией сна. В трети случаев возникает желтуха: резко повышается уровень билирубина, слизистые оболочки и кожа окрашиваются в различные оттенки желтого цвета, появляется зуд. Наиболее тревожным симптомом является снижение протромбинового индекса и альбумина крови, свидетельствующие о печеночно-клеточной недостаточности. Осложнение заболевания печеночной энцефалопатией свидетельствует об острой гепатодистрофии. Бурный гуморальный иммунный ответ зачастую приводит к появлению иммунных комплексов, оседающих на эндотелии сосудов почек, щитовидной железы, половых органов и др. Возникают васкулиты. В программе системных проявлений HBV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, хронический гастрит, синдром Шегрена, идеопатическая тромбоцитопеническая пурпура, узелковый периартериит, гломерулонефрит, синдром Гийена – Барре, ревматоидный артрит, и др.
Фаза выздоровления характеризуется исчезновением признаков холестаза, нормализацией процессов обмена веществ, восстановлением функции печени, на первый план выходят системные проявления заболевания. По сравнению с другими вирусными гепатитами, гепатит В имеет более системный характер, менее благоприятно протекает у детей. Хроническое течение возникает в 5% случаев. «Здоровые носители» HBsAg, также как и больные хроническим гепатитом В, подвержены высокому риску развития цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Системные проявления не всегда исчезают вместе с излечением гепатита В.
Разработанные на сегодняшний день вакцины не вызывают вакцино-обусловленного гепатита В, т.к. представляют собой генно-инженерный HBs-антиген. Однако вакцинопрофилактика обеспечивает защиту от гепатита В только на 5-7 лет. До вакцинации, по итогам вакцинации и по прошествии 5 лет после вакцинации необходимо исследовать уровень anti-HBs-антител.
В современной лабораторной диагностике вирусного гепатита В основная роль отводится выявлению в анализах серологических маркеров инфицирования вирусом: HBsAg, HВeAg, анти-НВс класса IgM и IgG, анти-НВе и анти-HBs и геномной ДНК вируса.
Качественное обнаружение в крови HBV ДНК является основным арбитражным критерием, характеризующим активность вирусного процесса, который можно использовать при заражении мутантными формами вируса, при иммуносупрессии (больные онкологическими заболеваниями, наркоманы и т.д.) и для количественной оценки присутствующего в организме возбудителя.
Количественная характеристика содержания ДНК HВV в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии. Если концентрация вируса меньше 105 копий/мл, то прогноз курса лечения благоприятный, если выше, то необходимо применить другие схемы лечения.
Снижение концентрации ДНК вируса гепатита В в течение недели после начала курса лечения не менее чем на треть является быстрым и точным параметром для предсказания эффективности терапии, приводящей к раннему вирусологическому ответу.
В целом, показанием к анализу на наличие HBV ДНК служит выявление ранней HBV-инфекции, поскольку ПЦР дает положительный результат уже на первых неделях инфекции при отсутствии других серологических маркеров.
HBsAg - поверхностный антиген вируса гепатита В, основной маркер при анализе острого и хронического гепатита В - представляет собой белковую молекулу (липопротеин), ответственную за адсорбцию вируса на поверхности гепатоцитов (клеток печени). После встраивания вируса в геном печеночных клеток они начинают продуцировать вирусную ДНК и белки, и новые молекулы HBsAg поступают в кровь.
HBsAg - основной маркер инфицирования HBV. При остром вирусном В в большинстве случаев (90-80 %) HBsAg удается выявить в инкубационном периоде, начиная с 3-5-й недели заражения. Средняя продолжительность циркуляции антигена - 70-80 дней. Быстрое исчезновение HBsAg (в первые дни желтухи) с появлением антиНВs - плохой прогностический признак. При хроническом гепатите В HBsAg может циркулировать в крови больного на протяжении многих лет. Возможно пожизненное носительство HBsAg.
HBsAg способен активизировать клеточные протоонкогены. Через достаточно длительный срок (более 20 лет) возможно развитие гепатокарциномы.
HBеAg (антиген инфекционности) представляет собой сердцевинный белок, кодируется тем же геном, что и НBсore Ag. Обнаруживается в крови в период вирусемии, параллельно с HBsAg, начиная с конца инкубационного периода. В этом периоде с высокой вероятностью методом ПЦР обнаруживается HBV-DNA(ДНК ВГВ). Вероятность заражения здорового человека при попадании HBеAg "+" крови в десятки раз выше, чем в том случае, если сероконверсия наступила, HBeAg исчез и заменился anti-HBe. В крови циркулирует недолго, меньше, чем HBsAg, исчезает к концу желтушного периода (примерно к 9 неделе с начала болезни). Циркуляция антигена инфекционности в течение 2 мес и более является признаком хронизации гепатита В. Т.о. этот показатель может служить маркером контагиозности хронических НВsAg - носителей. При хроническом ВГВ с высокой репликативной активностью возможно обнаружение его в течение нескольких лет. Этот антиген циркулирует только в присутствии HBsAg, поэтому целесообразно обследовать именно HBsAg-позитивные сыворотки.
Антитела к HB-core антигену появляются в анализе при остром гепатите В в крови вскоре после появления HBsAg, персистируют после исчезновения HBs-антигена перед появлением анти-HBs-антител и сохраняются длительное время после выздоровления (при HBV-инфекции они самые "долгоживущие" и могут обнаруживаться пожизненно). В отсутствие информации о других маркерах в анализе гепатита В, наличие анти-HBcore позволяет предположить, что человек может быть активно инфицирован или переносил гепатит В в прошлом и имеет иммунитет. Анти-HBcore-антитела могут быть единственным серологическим маркером перенесенного гепатита В и потенциально инфицированной крови.
Определение суммарных антител anti-НBcore применяют в целях диагностики текущего или перенесенного в прошлом гепатита В. Присутствие общих антител anti-НBcore не дает возможности дифференцировать острую, хроническую или перенесенную в прошлом инфекцию.
Антитела к HBсore антигену класса М начинают вырабатываться в период первого появления клинических симптомов гепатита В и сохраняются до периода выздоровления.
Синтез антител к HBeAg в организме начинается после элиминации антигена инфекционности, они свидетельствуют о прекращении репликации (размножения) вируса в организме. К концу 9-й недели эти антитела можно обнаружить у 90% больных. В период выздоровления эти антитела могут исчезать. Однако обнаружение anti-HBe не всегда является показателем отсутствия инфекционности данной конкретной сыворотки. Иногда возможно появление мутантной, дефектной HBeAg-отрицательной формы вируса, т.е. вирус данный антиген синтезировать не способен. Но при этом хотя в крови обнаруживаются anti-HBe, высокая репликативная активность вируса сохраняется.
Anti-HBs-антитела появляются в фазе выздоровления после острого гепатита В, обычно через 3-4 месяца после элиминации HBsAg (так называемая фаза "окна"). Продолжительность фазы окна может варьировать от 1 мес до 1 года, в зависимости от состояния иммунной системы больного.В этот период "окна" важно обследовать пациента на anti-HBc IgM.
Anti-HBs-антитела особенно важны в обеспечении иммунной защиты против данного вируса, поэтому количественное определение анти-HBs-антител обычно используют в контроле эффективности иммунитета при вакцинации против гепатита В. Со временем, титр антител снижается вплоть до необнаружения.Иногда возможно пожизненная циркуляция anti-HBs антител. Появление в анализах анти-HBs на фоне клинического улучшения у больного гепатитом В и исчезновение HBsAg является хорошим прогностическим признаком,и показателем выздоровления.
При хроническом течении гепатита В возможно параллельное определение поверхностного антигена и антител к нему. Обнаружение в анализе анти-HBs в острой фазе гепатита В параллельно с HBsAg свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания.
HBsAg | anti-HBs | anti-HBc | HBeAg | anti-HBe |
ВГВ/ДНК |
Трактовка результатов | |
IgM | общ. | ||||||
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
Активная репликация ВГВ (дикий штамм) |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
+/- |
+ |
Активная репликация ВГВ (мутантный штамм) |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
+/- |
- |
Разрешившийся острый гепатит |
+ |
- |
- |
+ |
- |
+/- |
- |
“Здоровый” носитель -HBsAg |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
- |
Фаза “окна” острого гепатита В |
- |
+ |
- |
+ |
- |
+/- |
- |
Иммунитет после перенесенного гепатита В |
- |
+ |
- |
- |
- |
- |
- |
Иммунитет после вакцинации |
Прямое выявление наличия вируса в организме:
Серологические исследования:
Вирусный гепатит продолжает представлять огромную проблему для общественного здравоохранения. Ежегодно около 1,4 миллиона человек во всем мире умирают от гепатита и осложнений инфекции – цирроза печени или рака. Всемирная организация здравоохранения поставила цель сократить это число до 400 000 человек. ежегодно до 2030 г. К сожалению, менее 5% инфицированных знают о своем заболевании, поэтому одним из первых шагов, который стоит предпринять, является диагностика людей из группы риска.[1]
Печень – самая крупная и одна из важнейших желез с очень большим регенеративным потенциалом. Он принимает участие во многих процессах в организме, в том числе в углеводном, белковом и жировом хозяйстве; синтезирует белки, ферменты, липиды и липопротеины, факторы свертывания крови, запасает витамины А, В12, D, а также железо и медь, выводит токсины из организма и поддерживает иммунитет организма.
Вирусы, обладающие гепатотропными свойствами, являются этиологическими факторами вирусных гепатитов.В Польше чаще всего заражаются вирусами А, В и С (HAV, HBV, HCV), реже вирусами D, E и G (HDV, HEV, HGV).
По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), около 2 миллиардов человек в мире переболели инфекцией ВГВ, а 257 миллионов страдают хроническим гепатитом В. В Польше в последние годы наблюдается снижение заболеваемости гепатитом В. в области стерилизации медицинского оборудования и материалов, программы всеобщих прививок, профилактики после заражения гемоконтактными инфекциями и улучшения социально-экономических условий в стране.
Инфекции HCV касаются около 130-150 миллионов человек в мире [2], в Польше около 200 тысяч. человек [3]. Большинство пациентов (96%) не подозревают об этом, поскольку хроническая ВГС-инфекция часто протекает бессимптомно и может длиться годами. У этих больных, как и в случае ВГВ-инфекции, имеется повышенный риск отдаленных осложнений в виде цирроза печени и первичной гепатоцеллюлярной карциномы.
„ Современные методы диагностики позволяют выявить и дифференцировать инфекцию и назначить правильное лечение.Тем не менее, необходимо пройти тест на инфекцию», — говорит Ивона Козак-Михаловска , доктор медицинских наук, кандидат медицинских наук , заместитель медицинского директора Synevo.
Лабораторные исследования обычно проводят с сывороткой венозной крови. Специальной подготовки к тесту не требуется, но, как и при большинстве определений, не рекомендуется брать кровь сразу после обильной еды.
Основные лабораторные тесты на здоровье печени
Биохимические тесты, наиболее часто выполняемые при оценке функции печени , включают следующие ферменты: аланин- и аспартатаминотрансферазы (синонимы: АЛТ, АСТ или ГОТ, ГПТ или АСТ, АЛТ), щелочная фосфатаза ЩФ, гамма-глутамилтрансфераза ГТФ ( ГГТФ, γ-ГТФ).Также измеряют уровень билирубина и общего белка, проводят протеинограмму (электрофоретическое разделение белков сыворотки) и протомбиновое время (ПВ) и каолин-кефалиновое время (АЧТВ). В зависимости от направления диагностики проводятся и другие специализированные лабораторные исследования.
" Уровень АСТ и АЛТ в острой фазе вирусного воспаления превышает в 10-15 раз верхнюю границу референтных значений и может достигать значений до 1000 МЕ/л. При хронических состояниях эти значения ниже.В случае HCV-инфекции в хронической фазе примерно у 1/3 пациентов трансаминазы в норме», — говорит д-р Козак-Михаловска. «Уровень билирубина у больных гепатитом также может оставаться нормальным на этой стадии инфекции. Значения других упомянутых тестов изменяются в зависимости от морфотических изменений в печени и степени нарушения ее функции», — добавляет он.
Диагностика вирусного гепатита
" С целью диагностики типа вирусного воспаления, определения фазы инфекции и прогноза проводятся специализированные серологические исследования, заключающиеся в определении уровня антигенов, т.е. компонентов вирусной структуры, и антител - продуктов специфический гуморальный ответ хозяина» , — подчеркивает д-р Козак-Михаловская.
Гепатит А вызывается РНК-вирусом семейства Picornaviridae . Инфекции встречаются во всем мире, особенно в районах с низкими санитарно-гигиеническими нормами. Вирус выделяется с фекалиями, а загрязненная фекалиями среда становится его резервуаром. Заражение может произойти через кишечник, через грязные руки и употребление в пищу немытых овощей и фруктов. Воспаление типа А обычно слабое, с последующей элиминацией вируса. Первым серологическим показателем является антиген ВГА, выявляемый в течение 2-4 нед в фекалиях, причем его наибольшая концентрация наблюдается до появления клинико-лабораторных симптомов заболевания.Антитела IgM к ВГА появляются в сыворотке крови при появлении симптомов. Их титр нарастает в течение нескольких дней, затем снижается и полностью исчезает примерно через полгода. Параллельно, хотя и медленнее, растут антитела IgG. Они сохраняются годами, представляя собой естественную защиту от последующей инфекции ВГА.
HBV — ДНК-содержащий вирус семейства Hepadnaviridae , передается с током крови в результате использования нестерильного медицинского оборудования (иглы, хирургические инструменты) или косметического оборудования (косметические процедуры и татуировки), от инфицированных матерей новорожденным (чаще всего в перинатальном периоде), при половом контакте с инфицированным партнером, после введения инфицированной крови или препаратов крови, после введения наркотических средств.Этот вирус присутствует во всех жидкостях организма, поэтому медицинские работники должны соблюдать особую осторожность в связи с непосредственным контактом с биологическим материалом. Инфекция часто не вызывает острых симптомов и протекает бессимптомно или с неспецифическими симптомами, например гриппоподобными симптомами. Такая инфекция приводит к хроническому состоянию и может вызывать осложнения — цирроз печени и первичную гепатоцеллюлярную карциному.
Серологическая диагностика ВГВ основана на определении HBs-антигена (поверхностного антигена), HBe-антигена и/или анти-HBs или анти-HBe антител против них, а также определении анти-HBc и HBc IgM-антител.
Вирус HCV принадлежит к РНК-вирусам семейства Flaviviridae . Заражение, как и в случае с ВГВ, происходит в результате контакта с зараженной кровью. При подозрении на инфицирование вирусом С в качестве скринингового теста обычно проводят скрининг на антитела к ВГС . Они появляются в сыворотке примерно через 80 дней (33-129 дней) от заражения, поэтому их титр следует определять не ранее, чем через 4 недели после контакта с вирусом.В связи с возможностью получения ложноположительных результатов при скрининговом тесте в медицинских лабораториях введены соответствующие процедуры в соответствии с рекомендациями экспертов Польской рабочей группы. В случае неоднозначно отрицательного результата на анти-ВГС следует повторить тест в образце из второго сбора, а при повторном пограничном или реактивном результате рекомендуется начать дальнейшую диагностику, в том числе определение вирусной РНК. В сыворотке РНК ВГС обнаруживается через несколько дней после инфицирования.
Тест высокой чувствительности и специфичности для определения нуклеиновых кислот вирусов типа В и С молекулярными методами . При HBV-инфекции определяют вирусную ДНК, при HCV-инфекции - РНК. Тестирование репликации вируса путем определения ДНК или РНК (качественное или количественное) позволяет определить активность инфекции и является условием для назначения пациентам лечения. Дополнительно в случае HCV-инфекции определяют генотип вируса, что определяет вид, продолжительность и эффективность терапии, а также определяет прогноз.
Тест также важен для пациентов, у которых серологические тесты не дают окончательного ответа. Более того, оценка концентрации генетического материала вируса используется при мониторинге эффектов противовирусного лечения. Исчезновение или скорость снижения вирусной нагрузки определяют, будет ли лечение продолжено или изменено.
Анализы антител против ВГС и РНК ВГС могут не совпадать. В ранней фазе заболевания антитела с сывороточной РНК еще будут отсутствовать, но их можно обнаружить после стихания виремии, т.е. при неопределяемом уровне вирусной РНК.Наличие анти-HCV-антител в сыворотке крови не определяет диагноз инфекции, а лишь свидетельствует о контакте с HCV. Антитела к ВГС можно обнаружить в сыворотке в течение нескольких лет после лечения и исчезновения симптомов, иногда они могут присутствовать на протяжении всей жизни.
Заражения вирусами D и G в Польше выявляются редко.
HDV называется дельта-фактором и представляет собой вирус с малой РНК. Он может распространяться через кровь, но только с вирусом В.Суперинфекция HDV у человека, уже инфицированного HBV, может привести к сверхострому молниеносному гепатиту и смерти. У носителей HBV дополнительная инфекция HDV усугубляет заболевание.
HGV имеет геном, сходный с HCV, и также является РНК-содержащим вирусом. Антитела к HGV обнаруживаются только у 25% инфицированных. HGV, вероятно, не вызывает никаких заболеваний. Клиническое значение инфекции HGV все еще исследуется.
ПОЛЕЗНО ЗНАТЬ Антиген HBs связан с поверхностным белком оболочки HBV и является самым ранним серологическим индикатором активного гепатита B.Выявляется в сыворотке крови за 1-4 нед до появления клинических симптомов или не позднее 1-2 нед после их появления. У 5-10% больных антиген остается отрицательным, несмотря на инфекцию. У большинства пациентов она исчезает в течение полугода. Выживаемость антигена в течение более длительного времени свидетельствует о хронической инфекции, вызванной вирусом В. Определение концентрации антигена HBs является хорошим маркером активности заболевания и ответа на лечение. Из-за частых перекрестных реакций используемые аналитические методы разделили определение антигена HBs на два этапа: скрининг-тест и подтверждающий тест, который проводится, если результат скрининг-теста не является однозначно отрицательным. В последние годы стало возможным контролировать лечение ВГВ также путем количественного определения антигена HBs. Он предоставляет гораздо более сложную информацию, чем HBV-DNA. Это имеет большое значение при наблюдении за пациентами с супрессией, а также за носителями антигена HBs, у которых ДНК ВГВ обычно не определяется. Постепенное снижение концентрации антигена HBs может свидетельствовать о высоких шансах на терапевтический успех, тогда как стабильный уровень свидетельствует о необходимости модификации лечения.Считается, что для оценки прогноза и эффективности терапии следует интерпретировать как концентрацию антигена HBs (количественно), так и уровень HBV-ДНК. Антитела против HBs (анти-HBs) появляются в период выздоровления, обычно примерно через четыре недели после исчезновения антигена, и являются единственными антителами, реагирующими на вакцину. Они могут встречаться и у носителей, но сопровождаются высоким титром антигена HBs. Часто они выявляются одновременно с антигеном HBs.Антитела исчезают через несколько лет после заражения. Определение анти-HBs-антител используют при диагностике и мониторинге гепатита В и для оценки эффективности вакцинации против вируса В. Наличие анти-HBs свидетельствует об устойчивости к инфекции, является серологическим признаком иммунного ответа на инфекцию или вакцинация. Уровни антител > 10,0 МЕ/л считаются защитой от воздействия вируса В. По данным Института Роберта Коха, ревакцинация должна проводиться, когда уровень анти-HBs антител падает ниже 100 МЕ/л (если вакцинация прошла успешно после последней инъекции доза вакцины, концентрация антител должна быть > 100,0 МЕ/л).У пациентов с диагнозом HBV-инфекция титры антител выше 10 МЕ/л и неопределяемый HBs-антиген свидетельствуют о выздоровлении, неинфекционности и резистентности к будущим инфекциям HBV. Они не требуют вакцинации. Антиген HBe происходит от HBc-антигенного структурного белка, который образует ядро вируса. HBe является прямым свидетельством репликации вируса в гепатоцитах и указывает на высокую инфекционность субъекта. Выявляется на ранней стадии инфекции, примерно через 7-14 дней после появления поверхностного антигена HBs, а в восстановительном периоде исчезает раньше, чем HBs.Если он длится более 3-4 месяцев, это может быть признаком хронической инфекции. Титры обоих антигенов быстро возрастают в фазе репликации вируса при острой инфекции. Отрицательный результат теста на HBe может свидетельствовать о ранней фазе острой инфекции до пика репликации вируса или о раннем периоде выздоровления, когда концентрация антигена падает ниже определяемого значения. Во время острой HBV-инфекции происходит сероконверсия, которая приводит к потере антигена HBe и начинают появляться антитела анти-HBe .Обычно это указывает на процесс заживления и снижает инфекционность. Часто и антиген, и антитела выявляются на короткое время. Образование антител также используется в качестве индикатора ответа на лечение у пациентов с хронической инфекцией. Как правило, анти-HBe-антитела сохраняются в течение одного-двух лет, но могут сохраняться и дольше. Определение антигена HBc , в связи со сложной методической процедурой не проводится при рутинной диагностике ВГВ-инфекций. Анти-HBc антитела появляются в сыворотке через несколько дней после обнаружения антигена HBe. Они являются первым продуктом гуморального ответа и возникают незадолго до или одновременно с клиническими симптомами заболевания печени. В первой фазе это антитела IgM. Их титр очень быстро нарастает, со временем постепенно снижается и полностью исчезает через 6-9 мес. Низкий уровень анти-HBc IgM-антител у части больных может обнаруживаться и при состояниях хронического гепатита с активным воспалением (хронический агрессивный гепатит, поствоспалительный цирроз).В фазе инфекции, когда HBe- и HBs-антигены и соответствующие антитела не выявляются вследствие сероконверсии, наличие анти-HBc IgM-антител может быть единственным свидетельством острой HBV-инфекции. Антитела к HBc IgG появляются параллельно с антителами IgM и сохраняются в течение многих лет, часто до конца жизни. | 90 129 90 130 90 131
Для комиссии | |
Гюнтер ВЕРХОЙГЕН | |
Вице-президент |
______
(1) Дз.У. Л 331, 7 декабря 1998 г., п. 1.
(2) Журнал законов № ОЖ Л 131, 16.05.2002, стр. 17.
(3) Журнал законов № ОЖ L 189, 20.07.1990, стр. 17.
.